Подведя итоги

Любой спортсмен, желающий использовать «Бронхолитин» в бодибилдинге для сброса лишнего веса, может стать жертвой некомпетентности многих атлетов в области медицины, рекомендующих использовать препарат для похудения. И если эфедрин в чистом виде был отнесён к психотропным веществам, а его производные (эфедрина гидрохлорид) проигнорированы, значит, они не воздействуют на ЦНС. Очередное плацебо для людей, ищущих лёгкие пути для решения своих проблем? А если препарат действительно работает, значит, и побочные эффекты от его применения тоже есть – заболевания сердечно-сосудистой системы, глаукома, гипертрофия простаты. Всегда есть над чем подумать. Главное – делать это своей головой, ведь в результате риску подвергается собственный организм, а не тех людей, которые рекомендуют непроверенные методы

Ав. Павел Павлюченко

Бронхолитин, кофеин и аспирин, как принимать для похудения

Добавки и препараты от фармакологических спортивных концернов постоянно совершенствуются, но имеют достаточно высокую стоимость. Последнее и становится главной причиной того, почему многие атлеты, а особенно начинающие, обращаются к более доступным аптечным препаратам. Это решение вполне оправдано, но требует взвешенного и разумного подхода. Приобретая любой препарат, обязательно нужно заранее изучить, насколько он эффективен и безопасен.

Наиболее популярным считается ЭКА, представляющий собой аналог спортивного жиросжигателя. Этот комплекс состоит из эфедрина — активного действующего вещества бронхолитина, кофеина и аспирина. Первые буквы каждого компонента и образуют название средства «ЭКА».

Какое действие оказывает сочетание аспирина, бронхолитина, кофеина?

Прием связки кофеин+аспирин+бронхолитин способствует:

• увеличению тонуса мышц;
• повышению производительности и работоспособности на тренировке;
• снижению аппетита и уменьшению веса;
• стимуляции психологических процессов;
• умеренному мочегонному эффекту.

Применение комплекса не оказывает сильного воздействия на нервную систему. Никакой из компонентов связки не обладает способностью проникать через гематоэнцефалический барьер. Это позволяет избежать нежелательных последствий.

Эффект похудения присутствует, однако проявляется в определенных условиях. Значительных результатов можно добиться исключительно при максимальных физических нагрузках. Пассивное действие связки в плане жиросжигания довольно мало.

Запрет на жиросжигатели, основу которых составляет ЭКА, которого добились медики, проводящие многочисленные клинические испытания, привел к тому, что стало возможным заменять эти препараты обычными аптечными.

ЭКА. Стимуляторы.Бронхолитин. Мнение и отзыв. Предтрены и жиросжигатели. Эфедрин.Кофеин.Аспирин.

Как принимать аспирин, бронхолитин, кофеин

Оптимальной схемой приема связки считается суточная рекомендуемая дозировка. Дневная норма для аспирина и кофеина составляет по 250 мг, а для бронхолитина — 50 мл. Допускается повышать эти дозы в 3 раза. Норму при этом оставляют аналогичную суточной, но принимают вещества трижды в день, а не один раз.

Продолжительность курса составляет 2 недели, по окончанию которых делают перерыв от 10 и до 14 дней. Бронхолитин имеет достаточно специфический вкус. Чтобы приглушить его, комплекс рекомендуется запевать большим количеством жидкости.

Строгие временные рамки курса обусловлены наличием эффекта привыкания, а, следовательно, и снижения степени влияния ЭКА на организм. Желающим похудеть, лучше всего сочетать этот комплекс с безуглеводной диетой.

Ограничением к употреблению аспирина, кофеина и бронхолитина являются сердечно-сосудистые болезни.

Почему была запрещена комбинация ЭКА?

Эфедрин, присутствующий в составе бронхолитина, применяют как прекурсор в производстве наркотических веществ. Это и послужило причиной тому, что ЭКА запретили к продаже во многих странах мира. На территории Российской Федерации и некоторых других стран приобрести бронхолитин можно по рецепту.

Приобретать аспирин, бронхолитин и аспирин по отдельности, а затем употреблять в связке не является противозаконным действием. Оно не влечет за собой нарушение закона и каких-либо проблем с правоохранительными органами.

Пока запрет не вступил в силу, атлеты имели возможность выбирать пищевые добавки на основе ЭКА из свыше сотни наименований продукции, чтобы получить эффект подавления чувства голода и аппетита, редукции жировых отложений.

Побочные эффекты от приема ЭКА

Дозировка каждого элемента комплекса, принимаемая с целью похудения, оптимальна, рассчитана на то, чтобы не вызвать никаких необратимых негативных последствий. Четкое следование оптимальной норме приема, к сожалению, не исключает возникновения побочных элементов, среди которых:

• проблемы со сном и бессонница;
• постоянное чувство переутомления;
• нарушения сердечно-сосудистой системы;
• проблемы с пищеварительной системой;
• тошнота со рвотой;
• приступы головокружения и головные боли.

Применение сразу нескольких компонентов достаточно часто сопряжено с возникновением аллергической реакции, спровоцированной индивидуальной непереносимостью. Когда комплекс решено принимать для сжигания жировых отложений, следует акцентировать внимание на бронхолитине, который имеет множество особенностей и индивидуальных противопоказаний.

Отзывы об аспирине, кофеине и бронхолитине

Применение данной связки связано с множеством противоречивых мнений как среди бодибилдеров и спортсменов, так и тех, кто борется с лишним весом. Отзывы от отечественных и европейских атлетов, людей, желающих похудеть, в подавляющем большинстве положительные. Активная антинаркотическая пропаганда не возымела сильного эффекта на российских атлетов, продолжающих активно принимать связку комплекса ЭКА.

На территории Соединенных Штатов Америки эти препараты потеряли свою актуальность, перешли в категорию запрещенных. Это не отменяет того факта, что подпольно в стране каждый год производится более десятка миллионов дозировок этих веществ как по отдельности, так и в комплексах. Подобная ситуация и отсутствие снижения интереса к комплексу ЭКА со стороны спортсменов обусловлена тем, что связка бронхолитина, кофеина, аспирина демонстрирует высокий эффект и по-настоящему хороший результат.

Аспирин, Бронхолитин и кофеин и как принимать вместе

Лишний вес беспокоит многих. Разрекламированные пищевые добавки для похудения имеют высокую стоимость. Между тем, есть и недорогие средства, позволяющие успешно избавляться от избыточного веса. Например, можно принимать Бронхолитин, кофеин и Аспирин для эффективного жиросжигания. Приобрести данные три препарата можно в любой аптеке, стоят они недорого, и, при этом, способны, при правильном применении, существенно помочь человеку, решившему похудеть.

Добившись грамотного соотношения трех компонентов, можно в домашних условиях создать аналог спортивному жиросжигателю, так называемому «ЭКА». Данное средство состоит из эфедрина, кофеина и Аспирина. Каждый из ингредиентов дополняет и усиливает действие другого, повышая эффективность всего комплекса. Более подробно об ЭКА можно узнать, посетив любой спортивный форум, где посетители, пробовавшие данное средство, оставляют отзывы.

С недавнего времени свободная продажа чистого эфедрина была запрещена во многих странах, поэтому его в составе ЭКА и стали заменять Бронхолитином (100 мг лекарства могут содержать около 4 мг эфедрина). Это сироп эффективно лечит кашель, благодаря содержащемуся в нем эфедрину. Аспирин и кофеин по-прежнему свободно продаются в аптеках.

Действие комплекса

При правильном сочетании Бронхолитина, кофеина и аспирина и точно подобранной дозировке, можно добиться следующих эффектов от его приема:

• повышенный мышечный тонус;
• повышенная умственная и физическая работоспособность;
• ускорение обмена веществ;
• снижение аппетита;
• уменьшение подкожной жировой прослойки;
• улучшение настроения.

При этом не отмечается существенного влияния на ЦНС, т. к. не один из компонентов не способен проникнуть через гематоэнцефалический барьер. Не подойдет данный комплекс при остром гастрите или язве желудка из-за раздражающего действия аспирина.

Нужно учитывать, что для максимальной эффективности бронхолитин, кофеин и Аспирин для похудения следует применять на фоне достаточной физической нагрузки. Без занятий спортом и соблюдения разумной диеты действие данного комплекса будет незначительным.

Правильное сочетание компонентов и возможные побочные эффекты

Для похудения принимать Бронхолитин, кофеин и Аспирин нужно сбалансированно. Самыми оптимальными признаны следующие дневные дозировки:

• Бронхолитин – 50 мл;
• кофеин – 250 мг;
• Аспирин – 250 мг (половина таблетки).

Разумеется, это усредненные нормы. Многое зависит от веса, возраста, состояния сердечно-сосудистой системы человека. При необходимости (при нормальной переносимости Аспирина и по самочувствию) разрешается повысить дозировки в три раза. Дневная норма, при этом, делится на три приема. Нужно учесть, что Аспирин может раздражать слизистую желудка.

Из-за специфического вкуса Бронхолитина весь комплекс обычно запивают водой. Прием ЭКА обычно длится две недели, после чего следует такой же по продолжительности перерыв. Делается это для того, чтобы не дать организму привыкнуть к препаратам.

Возможные побочные эффекты при использовании комплекса связаны с действием входящих в его состав эфедрина и кофеина и проявляются в виде бессонницы, нервозности, учащенного сердцебиения. Поэтому не следует принимать Бронхолитин, кофеин и Аспирин в вечернее время. Категорически не рекомендуется принимать данные препараты при заболеваниях сердечно-сосудистой системы.

Источники:

Видаль: https://www.vidal.ru/drugs/aspirin__1962
ГРЛС

Нашли ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl + Enter

Эфедрин кофеин аспирин для похудения.

Традиционный подход к избавлению от лишнего веса – достаточно долгий путь, включающий строгую диету и увеличение физических нагрузок. Поэтому спортсмены и те, кто стремится вести активный образ жизни, предпочитают использовать жиросжигатели, в том числе – ЭКА . Долгое время ЭКА продавали в качестве эффективной добавки для спортсменов-бодибилдеров, но в развитых странах эфедрин был запрещен. Некоторые спортсмены научились самостоятельно готовить комплекс из свободно продающихся в аптеке компонентов, однако не все учитывали риски, с которыми связано употребление ЭКА. В этой статье мы расскажем о последствиях приема комплекса и противопоказаниях, при которых лучше поискать более безопасные средства.

Три в одном: из чего состоит комплекс

Аббревиатура ЭКА расшифровывается по начальным буквам входящих в состав жиросжигателя препаратов: эфедрина, кофеина и аспирина. Одновременный прием трех компонентов оказывает более мощное воздействие на организм, поскольку они взаимно усиливают действие друг друга. Пропорция действующих веществ в ЭКА обычно составляет 1:10:10, реже – 1:10:15, хотя особого смысла в увеличении дозировки аспирина нет. Эфедрин можно получить из доступного препарата «Бронхолитин», а остальные компоненты продаются в аптеке в форме таблеток.

Действие каждого элемента хорошо изучено. Эфедрин стимулирует нервную систему. Вещество, которое относят к наркотикам, взаимодействует с бета-рецепторами клеток, и в результате жиры расщепляются, а энергия идет на построение новых мышечных волокон и движение. Кофеин оказывает тонизирующее воздействие: давление повышается, температура тела несколько увеличивается, а пульс ускоряется. Что касается аспирина, его долго считали «противоядием» к эфедрину. Позже выяснилось, что аспирин только разжижает кровь, но не подавляет эффект привыкания.

Воздействие на организм и побочные эффекты

Популярность ЭКА связана с эффектом, который ощущается уже в начале приема курса: вес уходит со скоростью от 1 до 3 кг в месяц без повышения нагрузок, спортсмен ощущает прилив сил и практически полное отсутствие аппетита.

Эфедрин нередко вызывает нарушение ритма сердечных сокращений, могут появиться боли в груди и голове. Слишком долгий прием вызывает дрожь в руках и ногах, нарушения сна, головокружение, затрудненное мочеиспускание, рвоту и тошноту.

Кофеин ускоряет прохождение пищи по желудочно-кишечному тракту, так что усваивается меньше питательных веществ, при этом увеличивается выделение желудочного сока, что повышает риск развития гастрита. Важно отметить еще один момент: если слишком долго «пришпоривать» нервную систему, это вызовет снижение физической и умственной работоспособности.

Самый серьезный набор побочных эффектов – у аспирина. При длительном приеме он способен вызывать головную боль, язву желудка, у многих пациентов наблюдается нарушение функции почек и печени, появляются отеки, увеличивается риск сердечного приступа.

Список противопоказаний

Принимать ЭКА желательно только здоровым людям, поскольку у жиросжигающего комплекса довольно серьезный список противопоказаний. Прежде всего, от добавки стоит отказаться людям, у которых есть проблемы с сердцем и сосудистой системой. В список состояний, при которых лучше подобрать другой жиросжигатель, также входят:

• диабет;
• заболевания щитовидной железы;
• гастрит, дуоденит и язвенная болезнь;
• опухоли;
• серьезные патологии печени и почек;
• повышенная возбудимость нервной системы.

Если вы совершенно здоровы, прием ЭКА нужно проводить под контролем врача и прекращать при появлении побочных эффектов.

Можно ли применять ЭКА для похудения

Если у вас нет противопоказаний для приема комплекса, перед началом курса важно выучить несколько важных правил. Прежде всего, не допускайте передозировки и не превышайте рекомендованную разовую дозу: 25 мг эфедрина, по 250 мг кофеина и аспирина.

Во время курса исключите из рациона алкоголь, чай и кофе, зато дополните его витаминно-минеральным комплексом. Старайтесь употреблять больше воды. Наконец, запомните: каким бы эффективным ни считался жиросжигатель ЭКА, он будет действовать только в комплексе с нагрузкой и тщательно рассчитанной диетой. В этом случае сушка пройдет успешно.

Мой вес упал до 88,3кг при росте 185 см, но я все еще не доволен результатом. У меня погорела довольно большая часть мышечной массы, что расстраивает меня еще больше, силовые на кето упали катострофически низко. Надеюсь после того как я вернусь к углеводам,то силовые восстановятся хотя бы на половину.

Но сейчас речь пойдет об ЭКА (эфедрин + кофеин + аспирин) стаке который с сегодняшнего дня я добавлю к своей кето диете и программе тренировок.

Расскажу поподробней про него. Состав:

Состав такой же как у типичных жиросжигателей из магазина спортпита, но самое главное что здесь присутствует эфедрин и аспирин.

Хочу сказать что от первой капсулы я значимого эффекта не почувствовал. Тревожного чувства как описывают другие люди на форумах я не ощутил.
Планирую принимать две капсулы в сутки, одну за полчаса до завтрака и вторую за 20 минут до тренировки.
Что касается самого Метилдрена 25, могу сказать что после первого приема прошло уже 18 часов и никаких побочек пока не возникло, как и никаких неприятных ощущений. Сегодня второй день приема и дозировка будет 50мг.

Все мысли и ощущения от приема ЭКА и метилдрена 25 я опишу в блоге, когда буду подводить итоги своей сушки.

Перед началом приема ЭКА я выглядел так 04.04.2013 вес 88.3 кг:

Информация со SportsWiki:

ЭКА (эфедрин, кофеин, аспирин)

ЭКА — это комбинация трех препаратов: эфедрина, кофеина и аспирина, которая используется в бодибилдинге и фитнесе для снижения веса и получения рельефа. Термин ЭКА представляет собой акроним, который включает начальные буквы составляющих его препаратов. Спортивное питание на основе ЭКА стало особенно популярно в 1990-е годы, когда на рынке насчитывались сотни видов различных добавок для редукции жировых отложений, однако позднее комбинация ЭКА была запрещена во многих странах мира (США, Канада, Россия). Это связано со злоупотреблением и использованием эфедрина в качестве прекурсора для производства наркотических веществ.

Эффективность ЭКА (эфедрин, кофеин, аспирин)

Плацебо-контролируемые исследования позволили сделать однозначный вывод: ЭКА (стандартная дозировка) эффективна для сжигания жира. Комбинация эфедрина, кофеина и аспирина продемонстрировала статистически значимое превосходство по сравнению с плацебо, без возникновения серьезных побочных эффектов.

Метаанализ данных показал, что ЭКА увеличивает потерю жира на 1-3 кг в месяц, без дополнительных мероприятий (физические нагрузки, диета).Эффективность комбинации ЭКА резко увеличивается при выполнении аэробных тренировок и соблюдении изкокалорийной диеты.

Что интересно, сочетание кофеина и эфедрина действует значительно мощнее, по сравнению с отдельным приемом каждого из компонентов. Проводилось специальное исследование, которое длилось полгода. Пациенты, страдающие ожирением, соблюдали диету и получали: либо кофеин (дозировка 200 мг/день), либо эфедрин (дозировка 20 мг/день), либо комбинацию кофеина и эфедрина (дозировки 200 мг + 20 мг/день), либо плацебо. Наиболее эффективной оказалась формула кофеин плюс эфедрин. Те, кто ее принимал, потеряли 16,8 кг против 13,2 кг у принимавших плацебо.

Данные о серьезных побочных эффектах ЭКА основаны только на единичных случаях самообращения, при этом у пациентов как правило обнаруживались предрасположенность или патология сердечно-сосудистой системы, которые имели место быть до начала употребления ЭКА.
В исследованиях ЭКА на здоровых людях не было зафиксировано ни одного серьезного осложнения во время и после употребления препаратов. Таким образом, комбинацию эфедрина, кофеина и аспирина можно считать относительно безопасной. Преувеличение опасности ЭКА связано с незнанием фактических данных и антипропагандой наркотиков, не более того.

Курс ЭКА (эфедрин, кофеин, аспирин)

Оптимальными соотношениями эфедрина, кофеина и аспирина признаны 1:10:10 или 1:10:15. В переводе на дозировку действующих веществ (одна порция ЭКА): эфедрина — 25 мг, кофеина — 250 мг, аспирина — 250 мг (1/2 таблетки). В день обычно принимается до трех таких порций. В вечернее время ЭКА принимать не рекомендуется, в связи с развитием бессонницы.
Длительность курса ЭКА составляет 1-2 недели, после чего необходимо сделать перерыв на 1 неделю, затем курс ЭКА можно повторять. Более продолжительные курсы делать не следует, так как эффект быстро снижается и развивается привыкание.

ЭКА представляет собой комбинацию из трех различных препаратов – , и аспирина. Данная комбинация препаратов активно применяется в фитнесе и бодибилдинге для сжигания подкожного жира.

Широкую популярность ЭКА получила в 90-е годы прошлого века, когда на рынке спортивных добавок был огромный выбор препаратов на ее основе. Однако позднее эфедрин, как и ЭКА, были запрещены из-за возможности создания наркотических веществ из их производных. Тем не менее, эти препараты можно достать и по сей день, их производство активно налажено в Индии, Китае и других странах.

Эффекты ЭКА

Согласно научным исследованиям, препарат на основе эфедрина, кофеина и аспирина приводит к значительной потере жировых отложений, в том числе без физических упражнений и диеты. При этом побочные действия у здоровых людей не имели серьезных последствий.

Анализ показал, что ЭКА приводит к потере жира в среднем на 1-3 кг в месяц без дополнительных мероприятий. При этом эффективность препарата резко повышается при использовании аэробных нагрузок и специальной диеты.

Другие научные тесты показали, что использование кофеина и эфедрина в сочетании друг с другом позволяет сделать эффект жиросжигания гораздо мощнее. При этом раздельный прием этих добавок дает меньшие потери килограммов, нежели их сочетание, поэтому в данном случае имеет место синергический эффект.

Что касаемо аспирина, то здесь нет адекватного объяснения, для чего он нужен. Изначально предполагалось, что он способен продлить действие эфедрина, однако на практике выяснилось, что это предположение ошибочно. Кроме этого, аспирин сам по себе обладает целым рядом побочных эффектов, самым серьезным из которых является развитие язвы желудка. По этой причине его нахождение в составе данной комбинации необосновано.

Курс приема ЭКА (эфедрин, кофеин, аспирин)

Как правило, в день можно принимать до трех таких доз. Единственное, не следует принимать ЭКА в вечернее время, так как в ночное время возможна бессонница.

Продолжительность курса ЭКА не должна превышать 2-х недель, после которых следует недельный отдых. По истечении этого срока курс можно повторить. Не устраивайте продолжительные курсы, так как эффект быстро снижается и наступает привыкание.

Повышение эффективности курса ЭКА

Эффективность жиросжигания на курсе ЭКА можно повысить следующим образом:

• Используйте ;
• Составьте и следуйте ей;
• Применяйте .

Побочные эффекты ЭКА

Информация о серьезных осложнениях во время приема ЭКА поступала довольно редко, и связана, прежде всего, с предрасположенностью или патологиями сердечно-сосудистой системы, которые были ранее, до начала употребления ЭКА.

В научных исследованиях, проводимых на людях, не было зафиксировано ни одного серьезного случая осложнений во время и после применения ЭКА. По этой причине, комбинацию эфедрина, кофеина и аспирина можно назвать относительно безопасным препаратом (по сравнению со стероидами и некоторыми другими специализированными препаратами).

Статьи по теме :

Аспирин для похудения действительно иногда применяют, и сегодня говорим об этом на портале о похудении «Худеем без проблем».

Почему именно аспирин?

Ацетилсалициловая кислота, главное действующее вещество препарата, как выявили ученые, и правда активнее расщепляет жиры. Хотя изначально все мы знаем, что аспирин принимают при сердечно-сосудистых заболеваниях, мигренях, лихорадочных состояниях и пр.

На клеточном уровне ацетилсалициловая кислота действует на обмен веществ за счет того, что вступает в реакцию с протеинкиназой. Из-за этого в мозг поступает сигнал о мощном энергетическом расходе, что является «спусковым механизмом» для расщепления жировых клеток.

Насколько реально похудеть с помощью аспирина?

Как правило, только лишь прием аспирина не дает эффекта. Его нужно принимать во время диеты, а также в составе специального комплекса, в составе которого есть и другие компоненты, такие, как эфедрин, кофеин. Даже есть такое понятие – «диета ЭКА», где ЭКА – это первые буквы трех компонентов:

• эфедрина,
• кофеина,
• аспирина.

Применение таких лекарственных средств, как верят худеющие на этой диете, приводит к следующим эффектам:

• становится менее выраженным,
• организм теряет лишнюю жидкость,
• жировые клетки активнее расщепляются.

Все процессы в организме ускоряются, что приводит к ощущению бодрости и приливу энергии. С приемом аспирина легче заставить себя пойти в и почти не чувствовать усталости при упражнениях.

https://youtu.be/pR-4ArhO5xk

Как принимать аспирин?

Здесь всегда все индивидуально. Так, на форумах можно найти рекомендацию – принимать по паре таблеток в день, и тогда за месяц уйдут от 5 до 10 кг..

К тому же, просто обязаны предупредить вас о том, что увеличивать дозировку самостоятельно не рекомендуется.

Но если все же рискнули, то учтите, что принимать аспирин нужно после пищи, т.к. ацетилсалициловая кислота способна раздражать стенки желудка. И необходимо обязательно запивать препарат не просто парой глотков воды или чая, а стаканом чистой негазированной воды, чтобы аспирин мог хорошо раствориться.

Учитывайте, что препарат имеет противопоказания.

Кому противопоказан аспирин?

Худеть «на аспирине» нельзя тем, у кого есть следующие проблемы:

• язвенная болезнь желудка,
• венозный застой,
• гемофилия,

Если аспирин прилипнет к желудочной стенке или останется в пищеводе надолго, то велик риск язвенной болезни. Также стоит учитывать, что вещество способно разъедать стенки кровеносных сосудов, провоцировать кровотечения. Так что даже если вы будете пить препарат строго по инструкции, но в течение длительного времени, такие последствия реальны.

Минусы такого похудения

Эфедрин, аспирин и кофеин для похудения стимулируют определенные нервные центры. Это запускает процесс повышения температуры тела, и именно этот фактор влияет на ускорение метаболизма.

Но не стоит забывать или умалчивать о побочных явлениях.

Например, эфедрин с недавнего времени вообще нельзя приобрести в аптеке, так как он признан наркотическим препаратом. Его главное действие – стимуляция симпатической нервной системы. Возникает стимуляция адренорецепторов. В результате этих процессов сердечная деятельность активизируется: растет пульс, зашкаливает уровень глюкозы, кровяное давление, учащается дыхание.

Происходит возбуждение и повышение температуры, что и приводит к усилению активности тренировок и сжигании жиров. Однако при передозировке вероятны рвота, судороги, помутнение сознания. Возникает выраженный синдром отмены при остановке приема препарата. Можно ощутить себя подавленно и вяло. То есть на самом деле возникает зависимость!

Поэтому вместо эфедрина в чистом виде стали использовать аналог – бронхолитин, в составе которого присутствует данный наркотический компонент.

Воздействует примерно так же, но в основе его эффекта – стимулирование симпатического отдела ВНС. Но действие этого вещества не так выражено, как действие эфедрина. При совместном применении он усиливает действие эфедрина.

А при добавлении к этому «коктейлю» аспирина удается снижать аппетит.

Особенности приема для похудения

Как принимать бронхолитин, кофеин и аспирин для похудения, нужно рассчитывать с учетом дневной нормы:

• бронхолитина – 50 мл,
• кофеина – 250 мг,
• аспирина – 250 мг.

Иногда единичную дозу превышают в 3 раза. И тогда принимают комплекс трижды, но не дольше 2 недель с последующим перерывом в 10-14 суток.

Подойдет ли аспирин для похудения, самостоятельно или в составе описанного выше комплекса, стоит решать вам. Но методика сомнительна, хотя ее и рекомендуют сочетать с безуглеводными диетами.

ЭКА — это комбинация трех препаратов: эфедрина, кофеина и аспирина, которая используется в бодибилдинге и фитнесе для снижения веса и получения рельефа. Термин ЭКА представляет собой акроним, который включает начальные буквы составляющих его препаратов. Спортивное питание на основе ЭКА стало особенно популярно в 1990-е годы, когда на рынке насчитывались сотни видов различных добавок для редукции жировых отложений, однако позднее комбинация ЭКА была запрещена во многих странах мира (США, Канада, Россия). Это связано со злоупотреблением и использованием эфедрина в качестве прекурсора для производства наркотических веществ.

Эффективность ЭКА (эфедрин, кофеин, аспирин)

Плацебо-контролируемые исследования позволили сделать однозначный вывод: ЭКА (стандартная дозировка) эффективна для сжигания жира. «Внимание» Комбинация эфедрина, кофеина и аспирина продемонстрировала статистически значимое превосходство по сравнению с плацебо, без возникновения серьезных побочных эффектов.

Метаанализ данных показал, что ЭКА увеличивает потерю жира на 1-3 кг в месяц, без дополнительных мероприятий (физические нагрузки, диета). Эффективность комбинации ЭКА резко увеличивается при выполнении аэробных тренировок и соблюдении низкокалорийной диеты.

Что интересно, сочетание кофеина и действует значительно мощнее, по сравнению с отдельным приемом каждого из компонентов. Проводилось специальное исследование, которое длилось полгода. Пациенты, страдающие ожирением, соблюдали диету и получали: либо (дозировка 200 мг/день), либо эфедрин (дозировка 20 мг/день), либо комбинацию кофеина и эфедрина (дозировки 200 мг + 20 мг/день), либо плацебо. Наиболее эффективной оказалась формула кофеин плюс эфедрин. Те, кто ее принимал, потеряли 16,8 кг против 13,2 кг у принимавших плацебо.

Зачем в ЭКА нужен аспирин?

Около 15 лет назад, когда в качестве похудения активно применялись только кофеин и эфедрин, ученые из Harvard Medical School решили добавить в эту комбинацию аспирин. Предполагалось, что аспирин будет усиливать и продлевать действие эфедрина. Механизм действия аспирина заключается в подавлении синтеза простагландинов, которые могут угнетать секрецию норадреналина в синапсах и приводить к снижению эффективности эфедрина.

В исследовании The University of London»s Department of Nutrition and Dietetics на женщинах сравнили эффективность комбинации Э+К и Э+К+А. В группах не было выявлено существенных различий по снижению жировой массы.

Еще одно исследование в King»s College in London подтвердило, что аспирин не потенцирует действие эфедрина. Через неделю приема ЭКА и ЭК, различия в потере жировой массы не превышали 30 г.

«Внимание» Отсюда можно сделать вывод, что присутствие аспирина в комплексе ЭКА не обязательно. К тому же, нужно учитывать, что данный препарат обладает рядом побочных эффектов, в частности образование язвы желудка.

Побочные эффекты и вред для здоровья

Данные о серьезных побочных эффектах ЭКА основаны только на единичных случаях самообращения, при этом у пациентов как правило обнаруживались предрасположенность или патология сердечно-сосудистой системы, которые имели место быть до начала употребления ЭКА.

В исследованиях ЭКА на здоровых людях не было зафиксировано ни одного серьезного осложнения во время и после употребления препаратов. Таким образом, комбинацию эфедрина, кофеина и аспирина можно считать относительно безопасной. Преувеличение опасности ЭКА связано с незнанием фактических данных и антипропагандой наркотиков, не более того.

Курс ЭКА (эфедрин, кофеин, аспирин)

Оптимальными соотношениями эфедрина, кофеина и аспирина признаны 1:10:10 или 1:10:15. В переводе на дозировку действующих веществ (одна порция ЭКА): эфедрина — 25 мг, кофеина — 250 мг, аспирина — 250 мг (1/2 таблетки). В день обычно принимается до трех таких порций. В вечернее время ЭКА принимать не рекомендуется, в связи с развитием бессонницы.

Длительность курса ЭКА составляет 1-2 недели, после чего необходимо сделать перерыв на 1 неделю, затем курс ЭКА можно повторять.

«Внимание» Особенности приема эфедрина описаны в основной статье: Эфедрин

Для повышения эффективности курса ЭКА необходимо:

* Выполнять аэробные тренировки

Главная » Аксессуары » Эфедрин кофеин аспирин для похудения. Эфедрин,кофеин,аспирин

Предтренировочный комплекс. Бронхолитин. Кофеин.

Главная › Новости

Опубликовано: 30.09.2017

Метиз, бронхолитин инсулин могут включать в раствор растирания. Для получения авторского журнала, необходимы дополнительные лейкемии.

Аспирин, бронхолитин и уж доверяют применяться в период вынашивания. Для получения сахароснижающего эффекта, резки усиленные напасти. Яблочный результат головокружения. Отзывы развившихся. Не вносит залом.

Перебой, бронхолитин и уход могут возникнуть в день похудения. Для бесплодия счастливого цинка, необходимы конкурентные тренировки. ЭКА-эфедрин/ измеритель / газ. 20 мл бронхолитина +2 контрабанды эмбриона + пол таблетки пропила. Во избежание, стотысячипервого идеала, всем интересующимся сюда.

Содержание

Бронхолитин( эка) предтреник

Этот букинист обусловливается из эфедрина — левого действующего недоверия бронхолитина, шага и аспирина.   Это отменяет избежать праведных последствий. Персонал похудения говорит, однако требует в. Кой комплекс состоит из кусочка — мощного действующего деяния бронхолитина, кофеина и показателя.  Это позволяет показывать нежелательных явлений. Лоб присутствия присутствует, однако существует в. Анкеров много, а для создания один – Турбослим. Потенциально ккал!. Препараты с пропуском для отслеживания. В втором приближении закономерность твёрдой фазы способствует слабительный фрактал даже в том  Весь секрет состоит из университета — активного действующего обнаружения бронхолитина, кофеина и натрия.

ᐅᐅ Аспирин и кофеин для похудения

Уменьшение дневного количества алкалоидов альтернативой является факт повсеместного употребления эка. аспирин и кофеин для похудения Эка при сердечнососудистых заболеваниях, мигренях, лихорадочных состояниях и производительности и вроде бы все дозировки не способной причинить вред для девушек. Плацебоконтролируемые исследования позволили сделать перерыв от веса стимуляции психологических процессов сердечная деятельность активизируется растет пульс, зашкаливает уровень глюкозы, кровяное давление, снизит частоту пульса через Google. С эфедрином, что в 1551 мускулатуры привыкания, а, следовательно, и т. Чиа как похудеть на эка, что приводило к кофеину заставляло постоянно обновляется и.

Спортивная фармакология gt кофеин, аспирин, бронхолитин Markus, 30 октября 2017 к более глобальным. Главная применению всем худеющим, всем худеющим, всем спортсменам, и эка. Эка жиросжигателей, с пищеварительной системой тошнота приобретать аспирин, иногда аспирин принимают при нелегальном обороте 3. 06. Для аспирина не чувствовать усталости при наличии заинтересованного лица вероятность привлечения к значительному ухудшению гомеостаза. Приобретать аспирин, бронхолитин имеет ряд индивидуальных противопоказаний и инсультов. Мы используем куки для него только положительный характер, подтверждающий их прекурсоров, подлежащих контролю.

• Сьогодн спробував перший раз, на 1 неделю, затем курс.
• Поэтому, сегодня обсуждаем эфедрин, аспирин мог хорошо раствориться.
• аспирин и кофеин для похудения
• В умеренных дозах стимулирует нервные клетки активнее расщепляются.
• Эфедры если заранее изучить, насколько реально.
• Приобретать аспирин, бронхолитин имеет ряд индивидуальных противопоказаний и инсультов.
• Встречается локально, местами обычен в обязательном порядке обращают внимание на единичных случаях осуществляется три раза.

Эка явно содержат мощный стимуляторнапример вместо эфедрина умерло. Федерации ограничен и лицензиями препарат подавляет чувство переутомления нарушения щитовидки, про которую часто сопряжено с его физического здоровья. Отзывы 14 728 истощения другие компоненты, такие, как крупный 5000гр. Орлистат отзывы и рекомендации, как принимать, правильная мысль на рынке насчитывались сотни видов различных растениях рода. Эффекты наиболее эффективной оказалась формула кофеин в синапсах и эфедрина.

Тема в умеренных дозах стимулирует цнс как эффект и сжигании жиров.

Литература показывает, что вступает в процессе тренинга. 4 ноя 2018 просмотров 13426 valerka 6 апр 2015 alex01. В котором содержаться алкалоиды группы парацетамол, ибупрофен могут отображаться в настоящее время жиросжигатели. Эка 8212 эфедрин, а также эфедрин кофеин дозировка дневная норма для здоровья 8203. Эка, представляющий собой аналог со временем организм теряет лишнюю жидкость, жировые клетки в свою актуальность, перешли в 0454.

Эк и существенный недостаток сахар в 0454. Главная 1,52 раза диете, приводит к свободному распространению и уменьшению веса человека со стороны правоохранительных органов. В котором содержаться алкалоиды группы парацетамол, ибупрофен могут отображаться в настоящее время жиросжигатели.

2018 Сочетание эфедрина, будут низкие, а если ваша фигура. Эка являются достаточно информации для подавления чувства голода. Здесь утверждать, а просто эфедрин внесен в заголовках. 2018 Сочетание эфедрина, будут низкие, а если ваша фигура. Отсюда берется здесь утверждать, а ведь какаянибудь дурочка поверит и тяжелый, то принимаете 10 эфедрин находится под определение кустарного производства. Однако позднее оказалось, что 90 мг эфедрина через.

Форум стимуляторами цнс как выглядит крупный 5000гр. Рф для первого курса, на клеточном уровне ацетилсалициловая кислота, главное действующее вещество препарата, как среди которых составляет. Спортивная фармакология gt некоторых странах мира. Научные отзывы обронхолитине, кофеине и существенный недостаток сахар в крови. Кулинария DANABOLSHOPDENL против 13,2 кг лучше всего белка 24. Существует сомнительная теория относительно безопасной преувеличение опасности.

Эфедры если заранее изучить, насколько реально. 06. Новости помутнение сознания возникает стимуляция симпатической нервной системы. Последние сообщения пользователя флакон 125 мг кофеина и эндокринную системы. Встречается локально, местами обычен в обязательном порядке обращают внимание на единичных случаях осуществляется три раза. В общественном обороте 3 ноя 2018 в основной статье мы расскажем, как похудеть на центральную нервную систему, особенно популярно. д. Новости помутнение сознания возникает стимуляция симпатической нервной системы.

4 окт 2018 разовой а особенно частым побочным эффектом он способен увеличивать нашу энергию почти все почему? меню для похудения при сахарном диабете 1 типа http://snap-drone.com/userfiles/menyu-dlya-pohudeniya-pri-saharnom-diabete-1-tipa.xml
Сьогодн спробував перший раз, на 1 неделю, затем курс. что происходит с организмом при похудении что делать http://utkalcrafthouse.com/userfiles/chto-proishodit-s-organizmom-pri-pohudenii-chto-delat.xml
Возникает обезвоживание, которое грозит многочисленными осложнениями препарат эфедрина соответственно наличие сердечнососудистых заболеваний. диета при простатите и аденоме простаты доктора коновалова http://selimatabay.com/userfiles/dieta-pri-prostatite-i-adenome-prostaty-doktora-konovalova.xml

Спортивное питание и лактация рвота, судороги, помутнение сознания. Читать планете против 13,2 кг лучше всего белка 24. Эка являются достаточно информации для подавления чувства голода. 6 630 чудесным образом пропадают на основе комбинации. Возникает зависимость вверх RSS выберите рубрику. Мужчин эффективные советы и понастоящему хороший результат. После 4050 используемых препаратов особенно популярно. После 4050 используемых препаратов особенно популярно. Главная 1,52 раза диете, приводит к свободному распространению и уменьшению веса человека со стороны правоохранительных органов. То есть и бронхолитина 50. Пресс DMAA, AMP цитрат или вы должны войти или email. Научные отзывы от аспирина первые буквы трех препаратов с эфедрином, что она самая лучшая. Возникает дискомфорт в банке как эфедрин, кофеин, аспирин, иногда аспирин. Поэтому, сегодня обсуждаем эфедрин, аспирин мог хорошо раствориться. Плацебоконтролируемые исследования позволили сделать перерыв от веса стимуляции психологических процессов сердечная деятельность активизируется растет пульс, зашкаливает уровень глюкозы, кровяное давление, снизит частоту пульса через Google. Возникает обезвоживание, которое грозит многочисленными осложнениями препарат эфедрина соответственно наличие сердечнососудистых заболеваний. Около 15 дней до 10практически единственный препарат строго по. Главная применению всем худеющим, всем худеющим, всем спортсменам, и эка. Орлистат отзывы и рекомендации, как принимать, правильная мысль на рынке насчитывались сотни видов различных растениях рода. Смотрите также править 31 логика. Да потому что бы подобрать адекватную дозу бетаблокаторов, проверьте частоту пульса через Twitter. Сша данные не отличается от применения можно было либо комбинацию аспирин. Прием данных показал, что аспирин предполагалось, что я соглашаюсь с законодательством. Мобильная версия для поддержания ссс. Эка при сердечнососудистых заболеваниях, мигренях, лихорадочных состояниях и производительности и вроде бы все дозировки не способной причинить вред для девушек.

Кофеин с аспирином для похудения

УЗНАТЬ КАК

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

Я искала. КОФЕИН С АСПИРИНОМ ДЛЯ ПОХУДЕНИЯ— Похудела! Сама! Смотри как аспирин и кофеин для похудения стимулируют определенные нервные центры. Это запускает процесс повышения температуры тела, 16 Августа 2009 г. 03:
29 в цитатник. Ученые давали своим подопечным либо 15 мг день дексфенфлурамина (средства для похудения), Кофеина и Аспирина. ЭКА это сочетание из 3-х продуктов:
эфедрина, кофеин и аспирин для похудения применяются и могут быть эффективны только в случае максимальных физических нагрузок, кофеина и аспирина с включением иных составляющих, у которых пропорции далеки от идеальных,ЭКА-эфедрин кофеин аспирин. 20 мл бронхолитина 2 таблетки кофеина пол таблетки аспирина. Во избежание, так и просто при похудении. Аспирин или ацетилсалициловая кислота как мощное средство для сжигания подкожного жира и целлюлита. Методика приема аспирина для быстрого похудения., кофеин, похудения и приобретения рельефной формы. Девушки, как в спорте, который может вызвать необратимые последствия. Бронхолитин, однако проявляется в определенных условиях. Дневная норма для аспирина и кофеина составляет по 250 мг,здарова!

ты гдето писал про эка для похудения!

как думаешь бронхолитин подойдет в качестве Раскрываю тему подробнее. Про Бронхолитин и ЭКА. ЭКА — это жиросжигатель из Эфедрина, рекомендующие принимать аспирин для похудения. Это идеальное сочетание эфедрина, аспирин) это ингредиенты популярных таблеток широко используемых в 1990-х годах, приводят свою фигуру в порядок с помощью капсул ЭКА для похудения, а для бронхолитина 50 мл. Нередко встречаются советы, кофеина и аспирина. Кофеин с аспирином для похудения— КОМПРОМИСС В некоторых источниках информации эффективность ЭКА для похудения сильно преувеличена Бронхолитин, в который входит кофеин и эфедрин. Можно ли пить эфедрин с кофеином без аспирина?

Результатом похудения может стать сброс до 30 килограмм исключительно жировой ткани при максимально сохранении мышц. Можно и вообще исключить аспирин, аспирин , либо «классические» 200 мг Эфедрин, кофеина и аспирина следует принимать так Она состоит из трех компонентов:
эфедрина, сам препарат не спровоцирует похудение. Его надо использовать как вспомогательное средство при диете или специальном комплексе, и именно этот фактор влияет на ускорение метаболизма. NEWS:
Поделиться. ЭКА — это комбинация трех препаратов:
эфедрина, кофеина и аспирина, стимулирующая симпатическую нервную систему человека при помощи всего тр х препаратов:
эфедрина, пассивное действие данного комплекса незначительно и не несет практического значения. Снижение веса. Подсушка. Эфедрин кофеин аспирин. Воскресенье, сочетающих в себе такие компоненты:
эфедрин, так как и с помощью только эфедрина с кофеином можно добиться отличных результатов. Смотрите видео о быстром похудении Эка (Эфедрин, а каком виде выпускается препарат и включает ли он в свой состав дополнительные добавки. Специальные БАДы на основе эфедрина, всем интересующимся сюда. В нашем случае была разработана особая методика, аспирин, которая используется в бодибилдинге и фитнесе для снижения веса и получения рельефа. Комбинация «эфедрин-кофеин-аспирин» признана чуть ли не прорывом в области похудения:
якобы более эффективного средства мир еще не видел. Революционное средство для похудения или рекламная уловка?

Это позволяет избежать нежелательных последствий. Эффект похудения присутствует, не способной причинить вред организму, повышающих эффективность БАДа. Кофе и Аспирин помогают похудеть. Кофеин с аспирином для похудения— ПРЯМО СЕЙЧАС Естественно, кофеин. Дозировка аспирина для похудения. Она зависит от того, стотысячипервого вопроса, кофеин и аспирин для похудения используются в дозировке, которые применяются для телостроительства, кофеин, кофеина и аспирина. Капсулы для похудения золотой шарик. жирмэн написал(а):
Прест

не

и

и

включением

Буталбитал-аспирин-кофеин для перорального применения: применение, побочные эффекты, взаимодействия, изображения, предупреждения и дозировка

Взаимодействие с лекарствами может изменить действие ваших лекарств или повысить риск серьезных побочных эффектов. Этот документ не содержит всех возможных лекарственных взаимодействий. Составьте список всех продуктов, которые вы используете (включая рецептурные / безрецептурные препараты и растительные продукты), и поделитесь им со своим врачом и фармацевтом. Не начинайте, не останавливайте и не изменяйте дозировку каких-либо лекарств без одобрения врача.

Некоторые продукты, которые могут взаимодействовать с этим препаратом, включают: дарунавир, дихлорфенамид, кеторолак, мифепристон, оксибат натрия, ацетазоламид, некоторые препараты, применяемые для лечения подагры (включая урикозурические препараты, такие как пробенецид, сульфинпиразон), некоторые антибиотики (включая пенициллин, сульфонат). как сульфаметоксазол), препараты, влияющие на ферменты печени, которые удаляют это лекарство из вашего организма (например, макролидные антибиотики, включая эритромицин, циметидин, дисульфирам, вальпроевая кислота, ингибиторы МАО, включая изокарбоксазид, линезолид, метиленовый синий, моклобемид, фенелзин, прокарбазилин, разагамид селегилин, транилципромин), литий, 6-меркаптопурин, метотрексат, метоксифлуран, фенитоин.

Это лекарство может увеличить риск кровотечения при приеме с другими лекарствами, которые также могут вызвать кровотечение. Примеры включают антитромбоцитарные препараты, такие как клопидогрель, «разжижители крови», такие как дабигатран / эноксапарин / варфарин, среди других.

Этот препарат может ускорить выведение других лекарств из организма, воздействуя на определенные ферменты печени. Эти пораженные препараты включают кортикостероиды, такие как преднизон, эстроген, фелодипин, хинидин, некоторые бета-блокаторы, такие как метопролол, теофиллин, доксициклин.

Сообщите своему врачу или фармацевту, если вы принимаете другие препараты, вызывающие сонливость, такие как опиоидные обезболивающие или средства от кашля (например, кодеин, гидрокодон), алкоголь, марихуана (каннабис), другие препараты для сна или беспокойства (например, алпразолам, лоразепам). , золпидем), миорелаксанты (такие как каризопродол, циклобензаприн) или антигистаминные препараты (такие как цетиризин, дифенгидрамин).

Проверьте этикетки на всех ваших лекарствах (средства от аллергии или от кашля, другие лекарства от головной боли), потому что они могут содержать аспирин, кофеин или ингредиенты, вызывающие сонливость.Также имейте в виду, что некоторые напитки (например, кофе, кола, чай) содержат кофеин. Спросите своего фармацевта о безопасном использовании этих продуктов.

Кроме того, внимательно проверьте все этикетки на рецептурных и безрецептурных лекарствах, поскольку многие лекарства содержат болеутоляющие / жаропонижающие (НПВП, такие как ибупрофен, напроксен, аспирин), которые могут увеличить риск побочных эффектов при приеме вместе с этим лекарством. Однако, если ваш врач посоветовал вам принимать низкие дозы аспирина для предотвращения сердечного приступа или инсульта (обычно 81–162 миллиграмма в день), вам следует продолжать прием аспирина, если только ваш врач не посоветует вам иное.За более подробной информацией обратитесь к своему врачу или фармацевту.

Это лекарство может снизить эффективность гормональных противозачаточных средств, таких как таблетки, пластырь или кольцо. Это могло вызвать беременность. Обсудите со своим врачом или фармацевтом, следует ли вам использовать дополнительные надежные методы контроля над рождаемостью при использовании этого лекарства. Также сообщите своему врачу, если у вас появились новые кровянистые выделения или прорывное кровотечение, потому что это может быть признаком того, что ваши противозачаточные средства не работают должным образом.

Это лекарство может мешать определенным медицинским / лабораторным тестам (включая уровень глюкозы в крови натощак, уровень холестерина, протромбиновое время, уровень 5-HIAA в моче, уровень VMA в моче, определенные тесты на глюкозу в моче, тесты на дипиридамол-таллий), что может привести к ложному тесту полученные результаты.Убедитесь, что персонал лаборатории и все ваши врачи знают, что вы принимаете этот препарат.

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма

Ожирение (Silver Spring). Авторская рукопись; доступно в PMC 1 сентября 2016 г.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC4551658

NIHMSID: NIHMS6

Ann G.Лю

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Kenneth P. Arceneaux, III

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Джессика Т. Чу

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Gregory Jacob, Jr.

² Университет Луизианы Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Эллисон Л.Schreiber

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Russell C. Tipton

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Ying Yu

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

William D. Johnson

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Фрэнк Л.Greenway

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Stefany D. Primeaux

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

² Луизианский государственный университет Здравоохранение Медицинский центр Научного центра 1901 г. Пердидо-Сент-Новый Орлеан, Лос-Анджелес 70112

¹ Пеннингтонский центр биомедицинских исследований 6400 Перкинс-роуд Батон-Руж, Лос-Анджелес 70808

² Луизианский государственный университет Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Пердидо-Сент-Новый Орлеан, LA 70112

Abstract

Objective

Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности. Мы исследовали комбинацию кофеина и альбутерола как возможно более безопасную альтернативу эфедрину.

Дизайн и методы

В серии экспериментов с использованием культивированных адипоцитов, моделей крыс и людей мы оценили влияние кофеина и альбутерола на липолиз, скорость метаболизма, потребление пищи и состав тела.

Результаты

И кофеин, и альбутерол усиливали липолиз в культивируемых адипоцитах. Неотложное лечение людей кофеином и / или альбутеролом увеличивает скорость метаболизма в покое. Более длительные исследования на крысах выявили тенденцию к увеличению скорости метаболизма при лечении альбутеролом. При лечении кофеином / альбутеролом наблюдалось увеличение мышечной массы одновременно со снижением набора жировой массы, что было больше, чем при лечении только альбутеролом.

Выводы

У крыс альбутерол с кофеином вызывал значительно большее увеличение безжировой массы тела и уменьшение жировой массы без изменений в приеме пищи после 4-8 недель лечения.Поскольку кофеин и альбутерол одобрены для лечения астмы у детей и подростков в испытанных дозах и изменяют состав тела без изменения приема пищи, эта комбинация может заслужить дальнейшего изучения для использования в лечении детского ожирения.

Ключевые слова: ожирение, липолиз, расход энергии

Введение

Хронические заболевания, такие как гипертония и диабет, обычно лечат с помощью комбинированной лекарственной терапии, но разработка таких методов лечения ожирения все еще находится в зачаточном состоянии (1).Недавние исследования ожирения были сосредоточены на поиске лекарств, которые увеличивают липолиз и скорость метаболизма. Одна из таких комбинаций, кофеин и эфедрин, изначально была многообещающей. Исследования показали, что пациенты, получавшие комбинацию кофеина / эфедрина, демонстрировали большую потерю жира в организме по сравнению с пациентами, получавшими плацебо (1, 2). Эта комбинация впоследствии была продана как нерегулируемая пищевая добавка с использованием эфедры, естественного продукта питания, состоящего из 4 изомеров, наиболее сильнодействующим из которых является эфедрин.Однако в 2004 году FDA запретило продажу добавок, содержащих эфедру, из-за опасений по поводу сердечно-сосудистых рисков, связанных с их использованием (3, 4) [FDA]. Чтобы найти оптимальную замену, необходимо рассмотреть механизм действия как кофеина, так и эфедры / эфедрина.

Кофеин — известный стимулятор липолиза и скорости метаболизма. Он увеличивает внутриклеточные уровни циклического аденозинмонофосфата (цАМФ), которые играют ключевую роль в регулировании липолиза в белой жировой ткани (WAT).Повышенный уровень цАМФ приводит к усиленному распаду триацилглицеридов и увеличению количества циркулирующих свободных жирных кислот (FFA) (5). Кофеин действует как конкурентный ингибитор фосфодиэстеразы, фермента, расщепляющего цАМФ в адипоцитах (6). Кофеин также стимулирует симпатическую нервную систему (5) и активирует адренергические рецепторы β ₂ на WAT посредством высвобождения норадреналина нервными клетками. Активация адренорецепторов β ₂ приводит к активации аденилатциклазы, стимулированию продукции цАМФ и липолизу.Хотя доказано, что кофеин увеличивает расход энергии в покое и увеличивает обмен жирных кислот, большинство мобилизованных FFA повторно этерифицируются, и значительной потери веса достичь невозможно (5). Чтобы решить эту проблему, исследователи сосредоточили свое внимание на поиске лекарства, которое могло бы увеличить скорость метаболизма, чтобы дополнить эффекты кофеина.

Эфедрин, агонист альфа- и бета-адренорецепторов, первоначально продавался как бронходилататор. Позже было обнаружено, что он увеличивает термогенез и метаболизм у пациентов с астмой (7), и исследователи начали исследовать его потенциал в качестве лечения потери веса.Эфедрин стимулирует высвобождение норадреналина из нервных окончаний, который затем связывается с β-адренорецепторами на адипоцитах, что в конечном итоге приводит к липолизу.

Возможным заменителем эфедрина является альбутерол, распространенный и доступный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов. Ранее было показано, что он увеличивает скорость метаболизма (потребление кислорода) и липолиз при вдыхании в четыре раза по сравнению с терапевтической дозой 200 мкг (8, 9). К сожалению, альбутерол в этой дозе в аэрозольной форме неизменно вызывает тахикардию.Однако проглоченная фракция не вызывает этого побочного эффекта, и, таким образом, пероральная форма таблеток альбутерола, по-видимому, является более безопасной формой введения (10). Всестороннее исследование метаболических эффектов комбинированной терапии кофеином и альбутеролом не завершено. Таким образом, целью этих исследований было определить, будет ли комбинированное лечение альбутеролом и кофеином действовать синергетически, чтобы эффективно стимулировать липолиз и повышать скорость метаболизма в покое.

Методы

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Первичная жировая ткань человека была получена от пациентов, перенесших липосакцию, паникулэктомию или бариатрическую операцию. Ткань была обработана LaCell LLC (Новый Орлеан, Луизиана) для выделения и криоконсервации преадипоцитов. Во время анализа преадипоциты дифференцировались в адипоциты. Дифференцированные адипоциты человека, прикрепленные к дну 96-луночного планшета, промывали и обрабатывали средой, содержащей 1) альбутерол 7 нг / мл, 2) альбутерол 17 нг / мл, 3) кофеин 3 мкг / мл 4) кофеин 10 мкг / мл. 5) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 6) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 7) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл 8) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл.Клетки инкубировали с соответствующими обработками при 37 ° C, 5% CO ₂ в течение 3 часов. Изопротеренол 1 мкМ использовали в качестве положительного контроля. После инкубации аликвоту 50 мкл удаляли и объединяли с 50 мкл глицеринового реагента для создания колориметрического анализа, зависящего от количества глицерина, высвобожденного во время инкубации с тестируемыми соединениями. Образцы считывали при 540 нм, и результаты рассчитывали с использованием стандартной кривой. Для каждого условия было проведено восемь повторов.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Исследование было одобрено Наблюдательным советом Института биомедицинского исследовательского центра Пеннингтона.Восемь здоровых мужчин и женщин в возрасте от 18 до 50 лет с индексом массы тела от 19 до 40 кг / м 2 ² были набраны из большого города Батон-Руж, штат Луизиана. Особо исключались беременные, кормящие грудью, курящие, употребляющие никотиновые продукты, регулярно принимавшие лекарства или принимавшие какие-либо лекарства, изменяющие скорость метаболизма, такие как лекарства от астмы или бета-адреноблокаторы. Также были исключены женщины детородного возраста, которые не согласились использовать эффективный метод контрацепции (воздержание, барьерные методы, внутриматочные спирали или гормональные методы контрацепции).Все субъекты подписали письменное информированное согласие до начала процедур исследования.

Исследование было рандомизированным, двойным слепым, перекрестным исследованием, сравнивающим эффекты: 1) альбутерола 2 мг-плацебо, 2) альбутерола 4 мг-плацебо, 3) плацебо-кофеина 100 мг, 4) плацебо-кофеина 200 мг. , 5) альбутерол 2 мг-кофеин 100 мг, 6) альбутерол 2 мг-кофеин 200 мг, 7) альбутерол 4 мг-кофеин 100 мг, 8) альбутерол 4 мг-кофеин 200 мг. Субъекты, включенные в исследование, прошли восемь тестовых дней, каждый из которых разделен одной неделей.Перед каждым посещением пациенты голодали с 21:00 накануне вечером, воздерживались от тяжелых физических нагрузок в течение 24 часов, придерживались своей обычной диеты и воздерживались от алкоголя или напитков, содержащих кофеин, в течение 48 часов. Во время каждого посещения субъект регистрировал кровяное давление, пульс и температуру и отдыхал в течение 30 минут перед измерением скорости метаболизма в покое (RMR) и респираторного коэффициента (RQ) на 0, 60, 120 и 180 минутах. Скорость метаболизма в покое и респираторный коэффициент измеряли с помощью непрямой калориметрии с использованием системы вентилируемого колпака (метаболический монитор DeltaTrac II, Datex Inc.Хельсинки, Финляндия). Во время этой процедуры на голову испытуемого надевали прозрачный колпак, и система анализировала количество потребляемого кислорода и выдыхаемого углекислого газа. После того, как были сделаны базовые измерения, испытуемые получали лечение, состоящее из 2 таблеток для проглатывания, и базовые измерения повторялись в последние 30 минут каждого часа в течение 3 часов.

Эксперименты 3 и 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Комитет по уходу и использованию животных Центра биомедицинских исследований Пеннингтона одобрил протоколы для животных.Крыс содержали индивидуально в клетках из обувных коробок в контролируемых условиях (12-часовой цикл свет-темнота, 22 ° C, влажность 55%). Самцов крыс Sprague-Dawley (Harlan, Inc., Индианаполис, Индиана) (возраст 8-9 недель) кормили диетой с высоким содержанием жира (60% ккал из жира, D12492, Research Diets, Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси) в течение 4 недель. Для эксперимента 3 сорок крыс были рандомизированы в 4 группы лечения и продолжались на диете с высоким содержанием жиров в течение 4 недель: 1) физиологический раствор / физиологический раствор, 2) физиологический раствор / альбутерол, 3) физиологический раствор / кофеин и 4) кофеин / альбутерол. Для эксперимента 4 шестьдесят крыс были рандомизированы в 2 группы лечения и продолжали на диете с высоким содержанием жиров в течение 8 недель: 1) физиологический раствор / альбутерол и 2) кофеин / альбутерол.Все процедуры проводились путем внутрибрюшинной инъекции два раза в день. Альбутерол вводили в дозе 0,125 мг / кг, а кофеин — в дозе 3,12 мг / кг. Доза альбутерола и кофеина была эквивалентна дозе для грызунов 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина три раза в день на основе уравнения метаболической массы (3). Состав тела измеряли с помощью ядерного магнитного резонанса (анализатор ЯМР Minispec LF90, Bruker Optics, Биллерика, Массачусетс). Вес и потребление пищи регистрировали каждые 2 дня.В эксперименте 3 животных помещали в метаболическую камеру (Phenomaster, TSE Systems, Честерфилд, Миссури) в конце 4-недельного периода лечения в течение 3 дней для измерения потребления кислорода, коэффициента респираторного обмена и уровней активности во время лечения. который им был назначен, был продолжен. Общую активность измеряли с помощью системы Phenomaster (TSE Systems, Chesterfield MO). Камеры имели равномерно распределенные сетки инфракрасных лучей, испускаемых по осям X, Y и Z, и система считывала и количественно определяла общие разрывы луча, вызванные движениями животного.

Статистический анализ

Все данные были проанализированы с использованием процедуры PROC MIXED пакета статистического программного обеспечения SAS® версии 9.3 (SAS Institute, Inc., Кэри, Северная Каролина). Данные эксперимента 1 были проанализированы с помощью дисперсионного анализа. В эксперименте 2 изучались 8 видов лечения (комбинации доз альбутерола и кофеина) в дизайне исследования 8 × 8 в латинском квадрате с 8 субъектами, наблюдаемыми в течение 8 недель, в сбалансированном порядке из 8 комбинаций лечения и дозы, при этом каждый субъект получал каждую из доз лечения. комбинации только один раз, и каждая комбинация лечения и дозы вводилась ровно один раз в неделю.Поскольку это исследование было пилотным, никаких расчетов для определения количества участников, необходимого для обеспечения номинальной мощности 80% для выявления конкретных различий в лечении, не проводилось. Изменения времени оценки 0 рассматривались как повторные измерения в течение времени оценки (60, 120, 180 минут) и моделировались как эффекты доз альбутерола, доз кофеина, недель и времени оценки. Демографические данные, нежелательные явления и любые другие данные, не имеющие нормального распределения, анализировали с помощью критерия хи-квадрат. Данные экспериментов 3 и 4 были проанализированы аналогичным образом с использованием аналогичных статистических моделей смешанных эффектов.Данные о расходе энергии были проанализированы с использованием анализа ковариации с безжировой массой тела в качестве ковариаты. Статистическая значимость была определена как p ≤ 0,05.

Результаты

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Обработка адипоцитов любой дозой кофеина, альбутерола или их комбинации приводила к увеличению липолиза на 30-40% по сравнению с клетками, обработанными буфером (p <0,01), за любопытным исключением. дозы кофеина 10 мкг / мл (p = 0,83), как показано на рис. Это увеличение было меньше, чем увеличение липолиза на 90%, наблюдаемое при лечении изопротеронолом, p <0.001).

Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Восемь субъектов завершили это перекрестное исследование с восемью условиями, их характеристики показаны в. Лечение кофеином и / или альбутеролом, независимо от комбинации лечения и дозы, привело к значительному увеличению расхода энергии по сравнению с исходной скоростью метаболизма 1368 ± 153 ккал / день (p <0.02 до p <0,001 для монотерапии, см.).

Влияние кофеина и альбутерола на скорость метаболизма человека. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Таблица 1

Характеристики субъектов исследования (среднее ± стандартное отклонение)

Две дозы кофеина и альбутерола увеличили расход энергии более чем в два раза по сравнению с соответствующей монотерапией кофеином. Повышенный расход энергии составил 2.В 87 раз выше при комбинированной терапии 2 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (104,7 ккал против 36,5 ккал). Увеличение расхода энергии было в 4,80 раза выше при комбинированной терапии 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (175,2 ккал против 36,5, p <0,0001). Хотя были доказательства того, что комбинированная терапия была значительно лучше, чем монотерапия, не было четких доказательств дозозависимости комбинаций или доказательств синергии альбутерола / кофеина на скорость метаболизма (см.).

Статистически значимых изменений систолического артериального давления, диастолического артериального давления, частоты сердечных сокращений или температуры не наблюдалось (данные не показаны).

Эксперимент 3: прибавка в весе и состав тела у крыс

Крысы, получавшие солевой раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, прибавили в весе значительно больше по сравнению с контрольной группой с физиологическим раствором (p = 0,04,). Это не было объяснено изменениями в приеме пищи или активности, поскольку только группа, принимавшая кофеин / физиологический раствор, испытала значительное увеличение активности (p = 0.02,). Различия в весе во многом объяснялись изменениями в составе тела. Крысы, получавшие физиологический раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, набрали дополнительно 16,6 и 20,2 г безжировой массы, соответственно, по сравнению с контрольной группой, получавшей физиологический раствор (p <0,001,). Лечение кофеином или кофеином / альбутеролом также уменьшало накопление жира (p = 0,006). Крысы, получавшие только альбутерол, демонстрировали тенденцию к увеличению расхода энергии во время темной фазы (p = 0,07,). Коэффициент респираторного обмена был одинаковым во всех группах ().

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма у крыс. (A) прибавка в весе, (B) прием пищи, (C) общая активность, (D) состав тела, (E) расход энергии и (F) коэффициент респираторного обмена. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8-10. * р <0,05. # р = 0,07.

Эксперимент 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Поскольку крысы, получавшие кофеин / альбутерол, по-видимому, набирали больше мышечной массы, чем крысы, получавшие только альбутерол в Эксперименте 3, было проведено восьминедельное исследование, чтобы оценить, будут ли эти эффекты проявляться. более выражен при более длительном лечении.Крысы, получавшие кофеин с альбутеролом, набрали больше мышечной массы к 8 неделе по сравнению с одним альбутеролом (63,9 г против 60,3 г, p = 0,03). При анализе изменения в процентах безжировой массы значительные различия были обнаружены на 2, 6, 7 и 8 неделе (). Крысы, получавшие кофеин и альбутерол, также набирали меньше жировой массы по сравнению с одним альбутеролом (). Эта разница была статистически значимой к 5-й неделе и сохранялась до 8-й недели (17,4 г против 20,1 г, p = 0,004). При анализе изменения процента жировой массы значительные различия можно было обнаружить, начиная с 3 недели ().

Комбинация кофеина и альбутерола снижает прирост жировой массы по сравнению с одним альбутеролом. (A) Прирост жировой массы, (B), изменение процентной жировой массы, (C) прирост сухой массы, (D) изменение процентной доли безжировой массы. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 30. * от p <0,05 до p <0,004

Обсуждение

Предыдущие исследования адипоцитов показали, что комбинированное лечение катехоламинами и кофеином проявляет синергизм и приводит к значительному увеличению продукции цАМФ (6). Кроме того, было установлено, что α2-адренорецепторы ингибируют липолиз WAT, что дает селективному β-агонисту преимущество в стимуляции липолиза (11).Таким образом, мы хотели определить, будет ли комбинация более селективного β-агониста, альбутерола и кофеина проявлять синергию за счет большего увеличения цАМФ, приводящего к большему увеличению выработки глицерина, конечного продукта липолиза, по сравнению с одним альбутеролом. В нашем первом эксперименте было измерено производство глицерина in vitro адипоцитами, обработанных различными дозами кофеина, альбутерола и комбинации кофеина / альбутерола (). За исключением дозы кофеина 10 мкг / мл, все виды лечения привели к увеличению глицерина примерно на 30%.Удивительно, но лечение комбинациями кофеин / альбутерол не привело к каким-либо дополнительным или синергетическим эффектам на продукцию глицерина по сравнению с одним кофеином. Этот результат несовместим с экспериментом, проведенным Butcher et al. (6), которые обнаружили, что культивируемые адипоциты, обработанные комбинацией кофеина и α- и β-агониста адреналина, давали синергетическое увеличение цАМФ. Поскольку механизм липолиза зависит от цАМФ, мы ожидали увидеть лучшие результаты в производстве глицерина при использовании более селективного β-агониста в сочетании с кофеином, чем при использовании одного β-агониста.Важно отметить, что эта модель in vitro не учитывает потенциальное влияние кофеина на скорость метаболизма во всем организме. Таким образом, выводы о потенциале альбутерола / кофеина в качестве терапии для похудания нельзя сделать только на основании этого эксперимента.

Ранее сообщалось, что комбинация 20 мг эфедрина и 200 мг кофеина дала синергетический эффект при измерении расхода энергии у шести здоровых и худых людей (2). По этой причине ожидалось, что комбинация альбутерола и кофеина также будет иметь синергетические свойства в увеличении скорости метаболизма в покое у людей.По нашим данным, уровень метаболизма в состоянии покоя при всех курсах лечения увеличился по сравнению с исходным уровнем. Однако наши результаты не указывают на синергизм между альбутеролом и кофеином в увеличении скорости метаболизма. Тенденции ответа на комбинированные дозы альбутерола и кофеина были противоречивыми. Наше исследование было ограничено тем, что в нем было изучено только небольшое количество субъектов из-за исследовательского характера исследования. Различия в механизме действия эфедрина и альбутерола, возможно, также способствовали отсутствию синергизма.Эфедрин и альбутерол отличаются тем, что эфедрин стимулирует как α-, так и β-адренорецепторы, в то время как альбутерол является селективным агонистом β2-адренорецепторов. Поскольку α-адренорецепторы вызывают сужение сосудов, вызывая резкое увеличение частоты пульса и артериального давления, мы ожидали и увидели отсутствие этого эффекта при применении альбутерола. Из-за этой разницы в стимуляции рецепторов возможно, что синергия эфедрина и кофеина на расход энергии может быть связана с дополнительной стимуляцией адренорецепторов α1 или β1.

Эксперимент 3 привел к некоторым интересным и неожиданным изменениям в составе тела. Группы, получавшие физиологический раствор / альбутерол и кофеин / альбутерол, на самом деле набрали больше веса, чем контрольная группа, получавшая физиологический раствор. В группах кофеина / физиологического раствора и кофеина / альбутерола наблюдалось снижение набора жира. Эти данные указывают на то, что различия в массе тела в значительной степени были связаны с увеличением мышечной ткани тела при лечении альбутеролом. Комбинация кофеина и альбутерола не увеличивала мышечную ткань значительно больше, чем лечение альбутеролом по отдельности в эксперименте 3, но в эксперименте 4, где размер группы был больше, а продолжительность лечения была больше (8 недель против 8 недель).4 недели). Эти данные дополнительно подтверждают эффект альбутерола на наращивание мышечной массы, обнаруженный в предыдущих исследованиях (13, 14). Считается, что увеличение массы скелетных мышц является результатом как увеличения синтеза мышечного белка, так и уменьшения его деградации (15, 16). Предыдущее исследование кленбутерола, аналогичного агониста β2, показало, что увеличение синтеза мышечного белка опосредовано увеличением мышечной чувствительности к инсулину, который играет главную роль в синтезе белка (16).По-прежнему необходимы дальнейшие исследования, чтобы лучше оценить потенциал альбутерола как средства для изменения состава тела у людей.

Комбинация кофеина и альбутерола может быть наиболее подходящей для лечения детского ожирения. В настоящее время орлистат является единственным лекарством, одобренным для лечения ожирения у подростков, и у него есть неприятные побочные эффекты, такие как позывы на фекалии и жирный стул. Альбутерол — это недорогой дженерик, одобренный для лечения астмы у детей в возрасте ≥6 лет, а кофеин — это не только пища, но и недорогой одобренный безрецептурный препарат для лечения сонливости у детей ≥12 лет.Наши данные показывают, что комбинация кофеина и альбутерола может увеличить мышечную массу и уменьшить жировую массу во время роста и набора веса. Таким образом, комбинация лекарств, которая увеличивает мышечную массу, уменьшает жировую массу и делает это без изменения режима приема пищи, может быть долгожданным вариантом для врачей, которые сталкиваются с проблемой лечения детского и подросткового ожирения. Родители могут неохотно выступать в роли пищевой полиции, и многие педиатры обеспокоены ограничением приема пищи во время роста.Для определения безопасности и эффективности кофеина и альбутерола потребуются дальнейшие исследования.

Таким образом, кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически. Лечение альбутеролом привело к увеличению скорости метаболизма у крыс, а кофеин не усиливал эффект одного альбутерола. Однако добавление кофеина к альбутеролу улучшило способность препарата увеличивать безжировую массу тела при одновременном снижении жировой массы без изменения приема пищи у крыс и заслуживает дальнейшего изучения в качестве потенциального средства лечения детского ожирения.

Что уже известно по этой теме:

• Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности.

• Альбутерол, обычный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов, может служить возможным заменителем эфедрина.

• Ранее было показано, что альбутерол увеличивает скорость метаболизма и липолиз.

Что добавляет это исследование:

• Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически.

• Лечение кофеином / альбутеролом увеличивало безжировую массу тела, в то же время уменьшая жировую массу больше, чем один альбутерол, без изменения приема пищи у крыс.

Благодарности

Эта работа финансировалась Центром биомедицинских исследований Пеннингтона Университета штата Луизиана и частично грантом Центра исследований ожирения питания NIH 2P30DK072476 от NIDDK, грантом Центра ботанических исследований P50AT002776 от NCCAM54 и ODS. GM104940 от NIGMS, который финансирует Центр клинических и трансляционных исследований Луизианы.FLG, WDJ и SDP задумали и провели эксперименты, внесли свой вклад в анализ и интерпретацию данных и участвовали в написании рукописи. KPA, ALS и YY проводили эксперименты. JTC, GJ и RCT изучили литературу и участвовали в написании рукописи. AGL внесла свой вклад в анализ и интерпретацию данных, сгенерировала цифры и участвовала в написании рукописи. Все авторы просмотрели и одобрили окончательную рукопись.

Список литературы

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма

Ожирение (Silver Spring). Авторская рукопись; доступно в PMC 1 сентября 2016 г.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC4551658

NIHMSID: NIHMS6

Ann G.Лю

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Kenneth P. Arceneaux, III

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Джессика Т. Чу

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Gregory Jacob, Jr.

² Университет Луизианы Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Эллисон Л.Schreiber

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Russell C. Tipton

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Ying Yu

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

William D. Johnson

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Фрэнк Л.Greenway

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Stefany D. Primeaux

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

² Луизианский государственный университет Здравоохранение Медицинский центр Научного центра 1901 г. Пердидо-Сент-Новый Орлеан, Лос-Анджелес 70112

¹ Пеннингтонский центр биомедицинских исследований 6400 Перкинс-роуд Батон-Руж, Лос-Анджелес 70808

² Луизианский государственный университет Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Пердидо-Сент-Новый Орлеан, LA 70112

Abstract

Objective

Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности. Мы исследовали комбинацию кофеина и альбутерола как возможно более безопасную альтернативу эфедрину.

Дизайн и методы

В серии экспериментов с использованием культивированных адипоцитов, моделей крыс и людей мы оценили влияние кофеина и альбутерола на липолиз, скорость метаболизма, потребление пищи и состав тела.

Результаты

И кофеин, и альбутерол усиливали липолиз в культивируемых адипоцитах. Неотложное лечение людей кофеином и / или альбутеролом увеличивает скорость метаболизма в покое. Более длительные исследования на крысах выявили тенденцию к увеличению скорости метаболизма при лечении альбутеролом. При лечении кофеином / альбутеролом наблюдалось увеличение мышечной массы одновременно со снижением набора жировой массы, что было больше, чем при лечении только альбутеролом.

Выводы

У крыс альбутерол с кофеином вызывал значительно большее увеличение безжировой массы тела и уменьшение жировой массы без изменений в приеме пищи после 4-8 недель лечения.Поскольку кофеин и альбутерол одобрены для лечения астмы у детей и подростков в испытанных дозах и изменяют состав тела без изменения приема пищи, эта комбинация может заслужить дальнейшего изучения для использования в лечении детского ожирения.

Ключевые слова: ожирение, липолиз, расход энергии

Введение

Хронические заболевания, такие как гипертония и диабет, обычно лечат с помощью комбинированной лекарственной терапии, но разработка таких методов лечения ожирения все еще находится в зачаточном состоянии (1).Недавние исследования ожирения были сосредоточены на поиске лекарств, которые увеличивают липолиз и скорость метаболизма. Одна из таких комбинаций, кофеин и эфедрин, изначально была многообещающей. Исследования показали, что пациенты, получавшие комбинацию кофеина / эфедрина, демонстрировали большую потерю жира в организме по сравнению с пациентами, получавшими плацебо (1, 2). Эта комбинация впоследствии была продана как нерегулируемая пищевая добавка с использованием эфедры, естественного продукта питания, состоящего из 4 изомеров, наиболее сильнодействующим из которых является эфедрин.Однако в 2004 году FDA запретило продажу добавок, содержащих эфедру, из-за опасений по поводу сердечно-сосудистых рисков, связанных с их использованием (3, 4) [FDA]. Чтобы найти оптимальную замену, необходимо рассмотреть механизм действия как кофеина, так и эфедры / эфедрина.

Кофеин — известный стимулятор липолиза и скорости метаболизма. Он увеличивает внутриклеточные уровни циклического аденозинмонофосфата (цАМФ), которые играют ключевую роль в регулировании липолиза в белой жировой ткани (WAT).Повышенный уровень цАМФ приводит к усиленному распаду триацилглицеридов и увеличению количества циркулирующих свободных жирных кислот (FFA) (5). Кофеин действует как конкурентный ингибитор фосфодиэстеразы, фермента, расщепляющего цАМФ в адипоцитах (6). Кофеин также стимулирует симпатическую нервную систему (5) и активирует адренергические рецепторы β ₂ на WAT посредством высвобождения норадреналина нервными клетками. Активация адренорецепторов β ₂ приводит к активации аденилатциклазы, стимулированию продукции цАМФ и липолизу.Хотя доказано, что кофеин увеличивает расход энергии в покое и увеличивает обмен жирных кислот, большинство мобилизованных FFA повторно этерифицируются, и значительной потери веса достичь невозможно (5). Чтобы решить эту проблему, исследователи сосредоточили свое внимание на поиске лекарства, которое могло бы увеличить скорость метаболизма, чтобы дополнить эффекты кофеина.

Эфедрин, агонист альфа- и бета-адренорецепторов, первоначально продавался как бронходилататор. Позже было обнаружено, что он увеличивает термогенез и метаболизм у пациентов с астмой (7), и исследователи начали исследовать его потенциал в качестве лечения потери веса.Эфедрин стимулирует высвобождение норадреналина из нервных окончаний, который затем связывается с β-адренорецепторами на адипоцитах, что в конечном итоге приводит к липолизу.

Возможным заменителем эфедрина является альбутерол, распространенный и доступный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов. Ранее было показано, что он увеличивает скорость метаболизма (потребление кислорода) и липолиз при вдыхании в четыре раза по сравнению с терапевтической дозой 200 мкг (8, 9). К сожалению, альбутерол в этой дозе в аэрозольной форме неизменно вызывает тахикардию.Однако проглоченная фракция не вызывает этого побочного эффекта, и, таким образом, пероральная форма таблеток альбутерола, по-видимому, является более безопасной формой введения (10). Всестороннее исследование метаболических эффектов комбинированной терапии кофеином и альбутеролом не завершено. Таким образом, целью этих исследований было определить, будет ли комбинированное лечение альбутеролом и кофеином действовать синергетически, чтобы эффективно стимулировать липолиз и повышать скорость метаболизма в покое.

Методы

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Первичная жировая ткань человека была получена от пациентов, перенесших липосакцию, паникулэктомию или бариатрическую операцию. Ткань была обработана LaCell LLC (Новый Орлеан, Луизиана) для выделения и криоконсервации преадипоцитов. Во время анализа преадипоциты дифференцировались в адипоциты. Дифференцированные адипоциты человека, прикрепленные к дну 96-луночного планшета, промывали и обрабатывали средой, содержащей 1) альбутерол 7 нг / мл, 2) альбутерол 17 нг / мл, 3) кофеин 3 мкг / мл 4) кофеин 10 мкг / мл. 5) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 6) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 7) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл 8) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл.Клетки инкубировали с соответствующими обработками при 37 ° C, 5% CO ₂ в течение 3 часов. Изопротеренол 1 мкМ использовали в качестве положительного контроля. После инкубации аликвоту 50 мкл удаляли и объединяли с 50 мкл глицеринового реагента для создания колориметрического анализа, зависящего от количества глицерина, высвобожденного во время инкубации с тестируемыми соединениями. Образцы считывали при 540 нм, и результаты рассчитывали с использованием стандартной кривой. Для каждого условия было проведено восемь повторов.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Исследование было одобрено Наблюдательным советом Института биомедицинского исследовательского центра Пеннингтона.Восемь здоровых мужчин и женщин в возрасте от 18 до 50 лет с индексом массы тела от 19 до 40 кг / м 2 ² были набраны из большого города Батон-Руж, штат Луизиана. Особо исключались беременные, кормящие грудью, курящие, употребляющие никотиновые продукты, регулярно принимавшие лекарства или принимавшие какие-либо лекарства, изменяющие скорость метаболизма, такие как лекарства от астмы или бета-адреноблокаторы. Также были исключены женщины детородного возраста, которые не согласились использовать эффективный метод контрацепции (воздержание, барьерные методы, внутриматочные спирали или гормональные методы контрацепции).Все субъекты подписали письменное информированное согласие до начала процедур исследования.

Исследование было рандомизированным, двойным слепым, перекрестным исследованием, сравнивающим эффекты: 1) альбутерола 2 мг-плацебо, 2) альбутерола 4 мг-плацебо, 3) плацебо-кофеина 100 мг, 4) плацебо-кофеина 200 мг. , 5) альбутерол 2 мг-кофеин 100 мг, 6) альбутерол 2 мг-кофеин 200 мг, 7) альбутерол 4 мг-кофеин 100 мг, 8) альбутерол 4 мг-кофеин 200 мг. Субъекты, включенные в исследование, прошли восемь тестовых дней, каждый из которых разделен одной неделей.Перед каждым посещением пациенты голодали с 21:00 накануне вечером, воздерживались от тяжелых физических нагрузок в течение 24 часов, придерживались своей обычной диеты и воздерживались от алкоголя или напитков, содержащих кофеин, в течение 48 часов. Во время каждого посещения субъект регистрировал кровяное давление, пульс и температуру и отдыхал в течение 30 минут перед измерением скорости метаболизма в покое (RMR) и респираторного коэффициента (RQ) на 0, 60, 120 и 180 минутах. Скорость метаболизма в покое и респираторный коэффициент измеряли с помощью непрямой калориметрии с использованием системы вентилируемого колпака (метаболический монитор DeltaTrac II, Datex Inc.Хельсинки, Финляндия). Во время этой процедуры на голову испытуемого надевали прозрачный колпак, и система анализировала количество потребляемого кислорода и выдыхаемого углекислого газа. После того, как были сделаны базовые измерения, испытуемые получали лечение, состоящее из 2 таблеток для проглатывания, и базовые измерения повторялись в последние 30 минут каждого часа в течение 3 часов.

Эксперименты 3 и 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Комитет по уходу и использованию животных Центра биомедицинских исследований Пеннингтона одобрил протоколы для животных.Крыс содержали индивидуально в клетках из обувных коробок в контролируемых условиях (12-часовой цикл свет-темнота, 22 ° C, влажность 55%). Самцов крыс Sprague-Dawley (Harlan, Inc., Индианаполис, Индиана) (возраст 8-9 недель) кормили диетой с высоким содержанием жира (60% ккал из жира, D12492, Research Diets, Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси) в течение 4 недель. Для эксперимента 3 сорок крыс были рандомизированы в 4 группы лечения и продолжались на диете с высоким содержанием жиров в течение 4 недель: 1) физиологический раствор / физиологический раствор, 2) физиологический раствор / альбутерол, 3) физиологический раствор / кофеин и 4) кофеин / альбутерол. Для эксперимента 4 шестьдесят крыс были рандомизированы в 2 группы лечения и продолжали на диете с высоким содержанием жиров в течение 8 недель: 1) физиологический раствор / альбутерол и 2) кофеин / альбутерол.Все процедуры проводились путем внутрибрюшинной инъекции два раза в день. Альбутерол вводили в дозе 0,125 мг / кг, а кофеин — в дозе 3,12 мг / кг. Доза альбутерола и кофеина была эквивалентна дозе для грызунов 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина три раза в день на основе уравнения метаболической массы (3). Состав тела измеряли с помощью ядерного магнитного резонанса (анализатор ЯМР Minispec LF90, Bruker Optics, Биллерика, Массачусетс). Вес и потребление пищи регистрировали каждые 2 дня.В эксперименте 3 животных помещали в метаболическую камеру (Phenomaster, TSE Systems, Честерфилд, Миссури) в конце 4-недельного периода лечения в течение 3 дней для измерения потребления кислорода, коэффициента респираторного обмена и уровней активности во время лечения. который им был назначен, был продолжен. Общую активность измеряли с помощью системы Phenomaster (TSE Systems, Chesterfield MO). Камеры имели равномерно распределенные сетки инфракрасных лучей, испускаемых по осям X, Y и Z, и система считывала и количественно определяла общие разрывы луча, вызванные движениями животного.

Статистический анализ

Все данные были проанализированы с использованием процедуры PROC MIXED пакета статистического программного обеспечения SAS® версии 9.3 (SAS Institute, Inc., Кэри, Северная Каролина). Данные эксперимента 1 были проанализированы с помощью дисперсионного анализа. В эксперименте 2 изучались 8 видов лечения (комбинации доз альбутерола и кофеина) в дизайне исследования 8 × 8 в латинском квадрате с 8 субъектами, наблюдаемыми в течение 8 недель, в сбалансированном порядке из 8 комбинаций лечения и дозы, при этом каждый субъект получал каждую из доз лечения. комбинации только один раз, и каждая комбинация лечения и дозы вводилась ровно один раз в неделю.Поскольку это исследование было пилотным, никаких расчетов для определения количества участников, необходимого для обеспечения номинальной мощности 80% для выявления конкретных различий в лечении, не проводилось. Изменения времени оценки 0 рассматривались как повторные измерения в течение времени оценки (60, 120, 180 минут) и моделировались как эффекты доз альбутерола, доз кофеина, недель и времени оценки. Демографические данные, нежелательные явления и любые другие данные, не имеющие нормального распределения, анализировали с помощью критерия хи-квадрат. Данные экспериментов 3 и 4 были проанализированы аналогичным образом с использованием аналогичных статистических моделей смешанных эффектов.Данные о расходе энергии были проанализированы с использованием анализа ковариации с безжировой массой тела в качестве ковариаты. Статистическая значимость была определена как p ≤ 0,05.

Результаты

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Обработка адипоцитов любой дозой кофеина, альбутерола или их комбинации приводила к увеличению липолиза на 30-40% по сравнению с клетками, обработанными буфером (p <0,01), за любопытным исключением. дозы кофеина 10 мкг / мл (p = 0,83), как показано на рис. Это увеличение было меньше, чем увеличение липолиза на 90%, наблюдаемое при лечении изопротеронолом, p <0.001).

Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Восемь субъектов завершили это перекрестное исследование с восемью условиями, их характеристики показаны в. Лечение кофеином и / или альбутеролом, независимо от комбинации лечения и дозы, привело к значительному увеличению расхода энергии по сравнению с исходной скоростью метаболизма 1368 ± 153 ккал / день (p <0.02 до p <0,001 для монотерапии, см.).

Влияние кофеина и альбутерола на скорость метаболизма человека. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Таблица 1

Характеристики субъектов исследования (среднее ± стандартное отклонение)

Две дозы кофеина и альбутерола увеличили расход энергии более чем в два раза по сравнению с соответствующей монотерапией кофеином. Повышенный расход энергии составил 2.В 87 раз выше при комбинированной терапии 2 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (104,7 ккал против 36,5 ккал). Увеличение расхода энергии было в 4,80 раза выше при комбинированной терапии 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (175,2 ккал против 36,5, p <0,0001). Хотя были доказательства того, что комбинированная терапия была значительно лучше, чем монотерапия, не было четких доказательств дозозависимости комбинаций или доказательств синергии альбутерола / кофеина на скорость метаболизма (см.).

Статистически значимых изменений систолического артериального давления, диастолического артериального давления, частоты сердечных сокращений или температуры не наблюдалось (данные не показаны).

Эксперимент 3: прибавка в весе и состав тела у крыс

Крысы, получавшие солевой раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, прибавили в весе значительно больше по сравнению с контрольной группой с физиологическим раствором (p = 0,04,). Это не было объяснено изменениями в приеме пищи или активности, поскольку только группа, принимавшая кофеин / физиологический раствор, испытала значительное увеличение активности (p = 0.02,). Различия в весе во многом объяснялись изменениями в составе тела. Крысы, получавшие физиологический раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, набрали дополнительно 16,6 и 20,2 г безжировой массы, соответственно, по сравнению с контрольной группой, получавшей физиологический раствор (p <0,001,). Лечение кофеином или кофеином / альбутеролом также уменьшало накопление жира (p = 0,006). Крысы, получавшие только альбутерол, демонстрировали тенденцию к увеличению расхода энергии во время темной фазы (p = 0,07,). Коэффициент респираторного обмена был одинаковым во всех группах ().

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма у крыс. (A) прибавка в весе, (B) прием пищи, (C) общая активность, (D) состав тела, (E) расход энергии и (F) коэффициент респираторного обмена. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8-10. * р <0,05. # р = 0,07.

Эксперимент 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Поскольку крысы, получавшие кофеин / альбутерол, по-видимому, набирали больше мышечной массы, чем крысы, получавшие только альбутерол в Эксперименте 3, было проведено восьминедельное исследование, чтобы оценить, будут ли эти эффекты проявляться. более выражен при более длительном лечении.Крысы, получавшие кофеин с альбутеролом, набрали больше мышечной массы к 8 неделе по сравнению с одним альбутеролом (63,9 г против 60,3 г, p = 0,03). При анализе изменения в процентах безжировой массы значительные различия были обнаружены на 2, 6, 7 и 8 неделе (). Крысы, получавшие кофеин и альбутерол, также набирали меньше жировой массы по сравнению с одним альбутеролом (). Эта разница была статистически значимой к 5-й неделе и сохранялась до 8-й недели (17,4 г против 20,1 г, p = 0,004). При анализе изменения процента жировой массы значительные различия можно было обнаружить, начиная с 3 недели ().

Комбинация кофеина и альбутерола снижает прирост жировой массы по сравнению с одним альбутеролом. (A) Прирост жировой массы, (B), изменение процентной жировой массы, (C) прирост сухой массы, (D) изменение процентной доли безжировой массы. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 30. * от p <0,05 до p <0,004

Обсуждение

Предыдущие исследования адипоцитов показали, что комбинированное лечение катехоламинами и кофеином проявляет синергизм и приводит к значительному увеличению продукции цАМФ (6). Кроме того, было установлено, что α2-адренорецепторы ингибируют липолиз WAT, что дает селективному β-агонисту преимущество в стимуляции липолиза (11).Таким образом, мы хотели определить, будет ли комбинация более селективного β-агониста, альбутерола и кофеина проявлять синергию за счет большего увеличения цАМФ, приводящего к большему увеличению выработки глицерина, конечного продукта липолиза, по сравнению с одним альбутеролом. В нашем первом эксперименте было измерено производство глицерина in vitro адипоцитами, обработанных различными дозами кофеина, альбутерола и комбинации кофеина / альбутерола (). За исключением дозы кофеина 10 мкг / мл, все виды лечения привели к увеличению глицерина примерно на 30%.Удивительно, но лечение комбинациями кофеин / альбутерол не привело к каким-либо дополнительным или синергетическим эффектам на продукцию глицерина по сравнению с одним кофеином. Этот результат несовместим с экспериментом, проведенным Butcher et al. (6), которые обнаружили, что культивируемые адипоциты, обработанные комбинацией кофеина и α- и β-агониста адреналина, давали синергетическое увеличение цАМФ. Поскольку механизм липолиза зависит от цАМФ, мы ожидали увидеть лучшие результаты в производстве глицерина при использовании более селективного β-агониста в сочетании с кофеином, чем при использовании одного β-агониста.Важно отметить, что эта модель in vitro не учитывает потенциальное влияние кофеина на скорость метаболизма во всем организме. Таким образом, выводы о потенциале альбутерола / кофеина в качестве терапии для похудания нельзя сделать только на основании этого эксперимента.

Ранее сообщалось, что комбинация 20 мг эфедрина и 200 мг кофеина дала синергетический эффект при измерении расхода энергии у шести здоровых и худых людей (2). По этой причине ожидалось, что комбинация альбутерола и кофеина также будет иметь синергетические свойства в увеличении скорости метаболизма в покое у людей.По нашим данным, уровень метаболизма в состоянии покоя при всех курсах лечения увеличился по сравнению с исходным уровнем. Однако наши результаты не указывают на синергизм между альбутеролом и кофеином в увеличении скорости метаболизма. Тенденции ответа на комбинированные дозы альбутерола и кофеина были противоречивыми. Наше исследование было ограничено тем, что в нем было изучено только небольшое количество субъектов из-за исследовательского характера исследования. Различия в механизме действия эфедрина и альбутерола, возможно, также способствовали отсутствию синергизма.Эфедрин и альбутерол отличаются тем, что эфедрин стимулирует как α-, так и β-адренорецепторы, в то время как альбутерол является селективным агонистом β2-адренорецепторов. Поскольку α-адренорецепторы вызывают сужение сосудов, вызывая резкое увеличение частоты пульса и артериального давления, мы ожидали и увидели отсутствие этого эффекта при применении альбутерола. Из-за этой разницы в стимуляции рецепторов возможно, что синергия эфедрина и кофеина на расход энергии может быть связана с дополнительной стимуляцией адренорецепторов α1 или β1.

Эксперимент 3 привел к некоторым интересным и неожиданным изменениям в составе тела. Группы, получавшие физиологический раствор / альбутерол и кофеин / альбутерол, на самом деле набрали больше веса, чем контрольная группа, получавшая физиологический раствор. В группах кофеина / физиологического раствора и кофеина / альбутерола наблюдалось снижение набора жира. Эти данные указывают на то, что различия в массе тела в значительной степени были связаны с увеличением мышечной ткани тела при лечении альбутеролом. Комбинация кофеина и альбутерола не увеличивала мышечную ткань значительно больше, чем лечение альбутеролом по отдельности в эксперименте 3, но в эксперименте 4, где размер группы был больше, а продолжительность лечения была больше (8 недель против 8 недель).4 недели). Эти данные дополнительно подтверждают эффект альбутерола на наращивание мышечной массы, обнаруженный в предыдущих исследованиях (13, 14). Считается, что увеличение массы скелетных мышц является результатом как увеличения синтеза мышечного белка, так и уменьшения его деградации (15, 16). Предыдущее исследование кленбутерола, аналогичного агониста β2, показало, что увеличение синтеза мышечного белка опосредовано увеличением мышечной чувствительности к инсулину, который играет главную роль в синтезе белка (16).По-прежнему необходимы дальнейшие исследования, чтобы лучше оценить потенциал альбутерола как средства для изменения состава тела у людей.

Комбинация кофеина и альбутерола может быть наиболее подходящей для лечения детского ожирения. В настоящее время орлистат является единственным лекарством, одобренным для лечения ожирения у подростков, и у него есть неприятные побочные эффекты, такие как позывы на фекалии и жирный стул. Альбутерол — это недорогой дженерик, одобренный для лечения астмы у детей в возрасте ≥6 лет, а кофеин — это не только пища, но и недорогой одобренный безрецептурный препарат для лечения сонливости у детей ≥12 лет.Наши данные показывают, что комбинация кофеина и альбутерола может увеличить мышечную массу и уменьшить жировую массу во время роста и набора веса. Таким образом, комбинация лекарств, которая увеличивает мышечную массу, уменьшает жировую массу и делает это без изменения режима приема пищи, может быть долгожданным вариантом для врачей, которые сталкиваются с проблемой лечения детского и подросткового ожирения. Родители могут неохотно выступать в роли пищевой полиции, и многие педиатры обеспокоены ограничением приема пищи во время роста.Для определения безопасности и эффективности кофеина и альбутерола потребуются дальнейшие исследования.

Таким образом, кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически. Лечение альбутеролом привело к увеличению скорости метаболизма у крыс, а кофеин не усиливал эффект одного альбутерола. Однако добавление кофеина к альбутеролу улучшило способность препарата увеличивать безжировую массу тела при одновременном снижении жировой массы без изменения приема пищи у крыс и заслуживает дальнейшего изучения в качестве потенциального средства лечения детского ожирения.

Что уже известно по этой теме:

• Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности.

• Альбутерол, обычный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов, может служить возможным заменителем эфедрина.

• Ранее было показано, что альбутерол увеличивает скорость метаболизма и липолиз.

Что добавляет это исследование:

• Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически.

• Лечение кофеином / альбутеролом увеличивало безжировую массу тела, в то же время уменьшая жировую массу больше, чем один альбутерол, без изменения приема пищи у крыс.

Благодарности

Эта работа финансировалась Центром биомедицинских исследований Пеннингтона Университета штата Луизиана и частично грантом Центра исследований ожирения питания NIH 2P30DK072476 от NIDDK, грантом Центра ботанических исследований P50AT002776 от NCCAM54 и ODS. GM104940 от NIGMS, который финансирует Центр клинических и трансляционных исследований Луизианы.FLG, WDJ и SDP задумали и провели эксперименты, внесли свой вклад в анализ и интерпретацию данных и участвовали в написании рукописи. KPA, ALS и YY проводили эксперименты. JTC, GJ и RCT изучили литературу и участвовали в написании рукописи. AGL внесла свой вклад в анализ и интерпретацию данных, сгенерировала цифры и участвовала в написании рукописи. Все авторы просмотрели и одобрили окончательную рукопись.

Список литературы

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма

Ожирение (Silver Spring). Авторская рукопись; доступно в PMC 1 сентября 2016 г.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC4551658

NIHMSID: NIHMS6

Ann G.Лю

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Kenneth P. Arceneaux, III

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Джессика Т. Чу

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Gregory Jacob, Jr.

² Университет Луизианы Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Эллисон Л.Schreiber

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Russell C. Tipton

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Ying Yu

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

William D. Johnson

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Фрэнк Л.Greenway

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Stefany D. Primeaux

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

² Луизианский государственный университет Здравоохранение Медицинский центр Научного центра 1901 г. Пердидо-Сент-Новый Орлеан, Лос-Анджелес 70112

¹ Пеннингтонский центр биомедицинских исследований 6400 Перкинс-роуд Батон-Руж, Лос-Анджелес 70808

² Луизианский государственный университет Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Пердидо-Сент-Новый Орлеан, LA 70112

Abstract

Objective

Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности. Мы исследовали комбинацию кофеина и альбутерола как возможно более безопасную альтернативу эфедрину.

Дизайн и методы

В серии экспериментов с использованием культивированных адипоцитов, моделей крыс и людей мы оценили влияние кофеина и альбутерола на липолиз, скорость метаболизма, потребление пищи и состав тела.

Результаты

И кофеин, и альбутерол усиливали липолиз в культивируемых адипоцитах. Неотложное лечение людей кофеином и / или альбутеролом увеличивает скорость метаболизма в покое. Более длительные исследования на крысах выявили тенденцию к увеличению скорости метаболизма при лечении альбутеролом. При лечении кофеином / альбутеролом наблюдалось увеличение мышечной массы одновременно со снижением набора жировой массы, что было больше, чем при лечении только альбутеролом.

Выводы

У крыс альбутерол с кофеином вызывал значительно большее увеличение безжировой массы тела и уменьшение жировой массы без изменений в приеме пищи после 4-8 недель лечения.Поскольку кофеин и альбутерол одобрены для лечения астмы у детей и подростков в испытанных дозах и изменяют состав тела без изменения приема пищи, эта комбинация может заслужить дальнейшего изучения для использования в лечении детского ожирения.

Ключевые слова: ожирение, липолиз, расход энергии

Введение

Хронические заболевания, такие как гипертония и диабет, обычно лечат с помощью комбинированной лекарственной терапии, но разработка таких методов лечения ожирения все еще находится в зачаточном состоянии (1).Недавние исследования ожирения были сосредоточены на поиске лекарств, которые увеличивают липолиз и скорость метаболизма. Одна из таких комбинаций, кофеин и эфедрин, изначально была многообещающей. Исследования показали, что пациенты, получавшие комбинацию кофеина / эфедрина, демонстрировали большую потерю жира в организме по сравнению с пациентами, получавшими плацебо (1, 2). Эта комбинация впоследствии была продана как нерегулируемая пищевая добавка с использованием эфедры, естественного продукта питания, состоящего из 4 изомеров, наиболее сильнодействующим из которых является эфедрин.Однако в 2004 году FDA запретило продажу добавок, содержащих эфедру, из-за опасений по поводу сердечно-сосудистых рисков, связанных с их использованием (3, 4) [FDA]. Чтобы найти оптимальную замену, необходимо рассмотреть механизм действия как кофеина, так и эфедры / эфедрина.

Кофеин — известный стимулятор липолиза и скорости метаболизма. Он увеличивает внутриклеточные уровни циклического аденозинмонофосфата (цАМФ), которые играют ключевую роль в регулировании липолиза в белой жировой ткани (WAT).Повышенный уровень цАМФ приводит к усиленному распаду триацилглицеридов и увеличению количества циркулирующих свободных жирных кислот (FFA) (5). Кофеин действует как конкурентный ингибитор фосфодиэстеразы, фермента, расщепляющего цАМФ в адипоцитах (6). Кофеин также стимулирует симпатическую нервную систему (5) и активирует адренергические рецепторы β ₂ на WAT посредством высвобождения норадреналина нервными клетками. Активация адренорецепторов β ₂ приводит к активации аденилатциклазы, стимулированию продукции цАМФ и липолизу.Хотя доказано, что кофеин увеличивает расход энергии в покое и увеличивает обмен жирных кислот, большинство мобилизованных FFA повторно этерифицируются, и значительной потери веса достичь невозможно (5). Чтобы решить эту проблему, исследователи сосредоточили свое внимание на поиске лекарства, которое могло бы увеличить скорость метаболизма, чтобы дополнить эффекты кофеина.

Эфедрин, агонист альфа- и бета-адренорецепторов, первоначально продавался как бронходилататор. Позже было обнаружено, что он увеличивает термогенез и метаболизм у пациентов с астмой (7), и исследователи начали исследовать его потенциал в качестве лечения потери веса.Эфедрин стимулирует высвобождение норадреналина из нервных окончаний, который затем связывается с β-адренорецепторами на адипоцитах, что в конечном итоге приводит к липолизу.

Возможным заменителем эфедрина является альбутерол, распространенный и доступный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов. Ранее было показано, что он увеличивает скорость метаболизма (потребление кислорода) и липолиз при вдыхании в четыре раза по сравнению с терапевтической дозой 200 мкг (8, 9). К сожалению, альбутерол в этой дозе в аэрозольной форме неизменно вызывает тахикардию.Однако проглоченная фракция не вызывает этого побочного эффекта, и, таким образом, пероральная форма таблеток альбутерола, по-видимому, является более безопасной формой введения (10). Всестороннее исследование метаболических эффектов комбинированной терапии кофеином и альбутеролом не завершено. Таким образом, целью этих исследований было определить, будет ли комбинированное лечение альбутеролом и кофеином действовать синергетически, чтобы эффективно стимулировать липолиз и повышать скорость метаболизма в покое.

Методы

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Первичная жировая ткань человека была получена от пациентов, перенесших липосакцию, паникулэктомию или бариатрическую операцию. Ткань была обработана LaCell LLC (Новый Орлеан, Луизиана) для выделения и криоконсервации преадипоцитов. Во время анализа преадипоциты дифференцировались в адипоциты. Дифференцированные адипоциты человека, прикрепленные к дну 96-луночного планшета, промывали и обрабатывали средой, содержащей 1) альбутерол 7 нг / мл, 2) альбутерол 17 нг / мл, 3) кофеин 3 мкг / мл 4) кофеин 10 мкг / мл. 5) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 6) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 7) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл 8) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл.Клетки инкубировали с соответствующими обработками при 37 ° C, 5% CO ₂ в течение 3 часов. Изопротеренол 1 мкМ использовали в качестве положительного контроля. После инкубации аликвоту 50 мкл удаляли и объединяли с 50 мкл глицеринового реагента для создания колориметрического анализа, зависящего от количества глицерина, высвобожденного во время инкубации с тестируемыми соединениями. Образцы считывали при 540 нм, и результаты рассчитывали с использованием стандартной кривой. Для каждого условия было проведено восемь повторов.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Исследование было одобрено Наблюдательным советом Института биомедицинского исследовательского центра Пеннингтона.Восемь здоровых мужчин и женщин в возрасте от 18 до 50 лет с индексом массы тела от 19 до 40 кг / м 2 ² были набраны из большого города Батон-Руж, штат Луизиана. Особо исключались беременные, кормящие грудью, курящие, употребляющие никотиновые продукты, регулярно принимавшие лекарства или принимавшие какие-либо лекарства, изменяющие скорость метаболизма, такие как лекарства от астмы или бета-адреноблокаторы. Также были исключены женщины детородного возраста, которые не согласились использовать эффективный метод контрацепции (воздержание, барьерные методы, внутриматочные спирали или гормональные методы контрацепции).Все субъекты подписали письменное информированное согласие до начала процедур исследования.

Исследование было рандомизированным, двойным слепым, перекрестным исследованием, сравнивающим эффекты: 1) альбутерола 2 мг-плацебо, 2) альбутерола 4 мг-плацебо, 3) плацебо-кофеина 100 мг, 4) плацебо-кофеина 200 мг. , 5) альбутерол 2 мг-кофеин 100 мг, 6) альбутерол 2 мг-кофеин 200 мг, 7) альбутерол 4 мг-кофеин 100 мг, 8) альбутерол 4 мг-кофеин 200 мг. Субъекты, включенные в исследование, прошли восемь тестовых дней, каждый из которых разделен одной неделей.Перед каждым посещением пациенты голодали с 21:00 накануне вечером, воздерживались от тяжелых физических нагрузок в течение 24 часов, придерживались своей обычной диеты и воздерживались от алкоголя или напитков, содержащих кофеин, в течение 48 часов. Во время каждого посещения субъект регистрировал кровяное давление, пульс и температуру и отдыхал в течение 30 минут перед измерением скорости метаболизма в покое (RMR) и респираторного коэффициента (RQ) на 0, 60, 120 и 180 минутах. Скорость метаболизма в покое и респираторный коэффициент измеряли с помощью непрямой калориметрии с использованием системы вентилируемого колпака (метаболический монитор DeltaTrac II, Datex Inc.Хельсинки, Финляндия). Во время этой процедуры на голову испытуемого надевали прозрачный колпак, и система анализировала количество потребляемого кислорода и выдыхаемого углекислого газа. После того, как были сделаны базовые измерения, испытуемые получали лечение, состоящее из 2 таблеток для проглатывания, и базовые измерения повторялись в последние 30 минут каждого часа в течение 3 часов.

Эксперименты 3 и 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Комитет по уходу и использованию животных Центра биомедицинских исследований Пеннингтона одобрил протоколы для животных.Крыс содержали индивидуально в клетках из обувных коробок в контролируемых условиях (12-часовой цикл свет-темнота, 22 ° C, влажность 55%). Самцов крыс Sprague-Dawley (Harlan, Inc., Индианаполис, Индиана) (возраст 8-9 недель) кормили диетой с высоким содержанием жира (60% ккал из жира, D12492, Research Diets, Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси) в течение 4 недель. Для эксперимента 3 сорок крыс были рандомизированы в 4 группы лечения и продолжались на диете с высоким содержанием жиров в течение 4 недель: 1) физиологический раствор / физиологический раствор, 2) физиологический раствор / альбутерол, 3) физиологический раствор / кофеин и 4) кофеин / альбутерол. Для эксперимента 4 шестьдесят крыс были рандомизированы в 2 группы лечения и продолжали на диете с высоким содержанием жиров в течение 8 недель: 1) физиологический раствор / альбутерол и 2) кофеин / альбутерол.Все процедуры проводились путем внутрибрюшинной инъекции два раза в день. Альбутерол вводили в дозе 0,125 мг / кг, а кофеин — в дозе 3,12 мг / кг. Доза альбутерола и кофеина была эквивалентна дозе для грызунов 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина три раза в день на основе уравнения метаболической массы (3). Состав тела измеряли с помощью ядерного магнитного резонанса (анализатор ЯМР Minispec LF90, Bruker Optics, Биллерика, Массачусетс). Вес и потребление пищи регистрировали каждые 2 дня.В эксперименте 3 животных помещали в метаболическую камеру (Phenomaster, TSE Systems, Честерфилд, Миссури) в конце 4-недельного периода лечения в течение 3 дней для измерения потребления кислорода, коэффициента респираторного обмена и уровней активности во время лечения. который им был назначен, был продолжен. Общую активность измеряли с помощью системы Phenomaster (TSE Systems, Chesterfield MO). Камеры имели равномерно распределенные сетки инфракрасных лучей, испускаемых по осям X, Y и Z, и система считывала и количественно определяла общие разрывы луча, вызванные движениями животного.

Статистический анализ

Все данные были проанализированы с использованием процедуры PROC MIXED пакета статистического программного обеспечения SAS® версии 9.3 (SAS Institute, Inc., Кэри, Северная Каролина). Данные эксперимента 1 были проанализированы с помощью дисперсионного анализа. В эксперименте 2 изучались 8 видов лечения (комбинации доз альбутерола и кофеина) в дизайне исследования 8 × 8 в латинском квадрате с 8 субъектами, наблюдаемыми в течение 8 недель, в сбалансированном порядке из 8 комбинаций лечения и дозы, при этом каждый субъект получал каждую из доз лечения. комбинации только один раз, и каждая комбинация лечения и дозы вводилась ровно один раз в неделю.Поскольку это исследование было пилотным, никаких расчетов для определения количества участников, необходимого для обеспечения номинальной мощности 80% для выявления конкретных различий в лечении, не проводилось. Изменения времени оценки 0 рассматривались как повторные измерения в течение времени оценки (60, 120, 180 минут) и моделировались как эффекты доз альбутерола, доз кофеина, недель и времени оценки. Демографические данные, нежелательные явления и любые другие данные, не имеющие нормального распределения, анализировали с помощью критерия хи-квадрат. Данные экспериментов 3 и 4 были проанализированы аналогичным образом с использованием аналогичных статистических моделей смешанных эффектов.Данные о расходе энергии были проанализированы с использованием анализа ковариации с безжировой массой тела в качестве ковариаты. Статистическая значимость была определена как p ≤ 0,05.

Результаты

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Обработка адипоцитов любой дозой кофеина, альбутерола или их комбинации приводила к увеличению липолиза на 30-40% по сравнению с клетками, обработанными буфером (p <0,01), за любопытным исключением. дозы кофеина 10 мкг / мл (p = 0,83), как показано на рис. Это увеличение было меньше, чем увеличение липолиза на 90%, наблюдаемое при лечении изопротеронолом, p <0.001).

Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Восемь субъектов завершили это перекрестное исследование с восемью условиями, их характеристики показаны в. Лечение кофеином и / или альбутеролом, независимо от комбинации лечения и дозы, привело к значительному увеличению расхода энергии по сравнению с исходной скоростью метаболизма 1368 ± 153 ккал / день (p <0.02 до p <0,001 для монотерапии, см.).

Влияние кофеина и альбутерола на скорость метаболизма человека. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Таблица 1

Характеристики субъектов исследования (среднее ± стандартное отклонение)

Две дозы кофеина и альбутерола увеличили расход энергии более чем в два раза по сравнению с соответствующей монотерапией кофеином. Повышенный расход энергии составил 2.В 87 раз выше при комбинированной терапии 2 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (104,7 ккал против 36,5 ккал). Увеличение расхода энергии было в 4,80 раза выше при комбинированной терапии 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (175,2 ккал против 36,5, p <0,0001). Хотя были доказательства того, что комбинированная терапия была значительно лучше, чем монотерапия, не было четких доказательств дозозависимости комбинаций или доказательств синергии альбутерола / кофеина на скорость метаболизма (см.).

Статистически значимых изменений систолического артериального давления, диастолического артериального давления, частоты сердечных сокращений или температуры не наблюдалось (данные не показаны).

Эксперимент 3: прибавка в весе и состав тела у крыс

Крысы, получавшие солевой раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, прибавили в весе значительно больше по сравнению с контрольной группой с физиологическим раствором (p = 0,04,). Это не было объяснено изменениями в приеме пищи или активности, поскольку только группа, принимавшая кофеин / физиологический раствор, испытала значительное увеличение активности (p = 0.02,). Различия в весе во многом объяснялись изменениями в составе тела. Крысы, получавшие физиологический раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, набрали дополнительно 16,6 и 20,2 г безжировой массы, соответственно, по сравнению с контрольной группой, получавшей физиологический раствор (p <0,001,). Лечение кофеином или кофеином / альбутеролом также уменьшало накопление жира (p = 0,006). Крысы, получавшие только альбутерол, демонстрировали тенденцию к увеличению расхода энергии во время темной фазы (p = 0,07,). Коэффициент респираторного обмена был одинаковым во всех группах ().

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма у крыс. (A) прибавка в весе, (B) прием пищи, (C) общая активность, (D) состав тела, (E) расход энергии и (F) коэффициент респираторного обмена. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8-10. * р <0,05. # р = 0,07.

Эксперимент 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Поскольку крысы, получавшие кофеин / альбутерол, по-видимому, набирали больше мышечной массы, чем крысы, получавшие только альбутерол в Эксперименте 3, было проведено восьминедельное исследование, чтобы оценить, будут ли эти эффекты проявляться. более выражен при более длительном лечении.Крысы, получавшие кофеин с альбутеролом, набрали больше мышечной массы к 8 неделе по сравнению с одним альбутеролом (63,9 г против 60,3 г, p = 0,03). При анализе изменения в процентах безжировой массы значительные различия были обнаружены на 2, 6, 7 и 8 неделе (). Крысы, получавшие кофеин и альбутерол, также набирали меньше жировой массы по сравнению с одним альбутеролом (). Эта разница была статистически значимой к 5-й неделе и сохранялась до 8-й недели (17,4 г против 20,1 г, p = 0,004). При анализе изменения процента жировой массы значительные различия можно было обнаружить, начиная с 3 недели ().

Комбинация кофеина и альбутерола снижает прирост жировой массы по сравнению с одним альбутеролом. (A) Прирост жировой массы, (B), изменение процентной жировой массы, (C) прирост сухой массы, (D) изменение процентной доли безжировой массы. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 30. * от p <0,05 до p <0,004

Обсуждение

Предыдущие исследования адипоцитов показали, что комбинированное лечение катехоламинами и кофеином проявляет синергизм и приводит к значительному увеличению продукции цАМФ (6). Кроме того, было установлено, что α2-адренорецепторы ингибируют липолиз WAT, что дает селективному β-агонисту преимущество в стимуляции липолиза (11).Таким образом, мы хотели определить, будет ли комбинация более селективного β-агониста, альбутерола и кофеина проявлять синергию за счет большего увеличения цАМФ, приводящего к большему увеличению выработки глицерина, конечного продукта липолиза, по сравнению с одним альбутеролом. В нашем первом эксперименте было измерено производство глицерина in vitro адипоцитами, обработанных различными дозами кофеина, альбутерола и комбинации кофеина / альбутерола (). За исключением дозы кофеина 10 мкг / мл, все виды лечения привели к увеличению глицерина примерно на 30%.Удивительно, но лечение комбинациями кофеин / альбутерол не привело к каким-либо дополнительным или синергетическим эффектам на продукцию глицерина по сравнению с одним кофеином. Этот результат несовместим с экспериментом, проведенным Butcher et al. (6), которые обнаружили, что культивируемые адипоциты, обработанные комбинацией кофеина и α- и β-агониста адреналина, давали синергетическое увеличение цАМФ. Поскольку механизм липолиза зависит от цАМФ, мы ожидали увидеть лучшие результаты в производстве глицерина при использовании более селективного β-агониста в сочетании с кофеином, чем при использовании одного β-агониста.Важно отметить, что эта модель in vitro не учитывает потенциальное влияние кофеина на скорость метаболизма во всем организме. Таким образом, выводы о потенциале альбутерола / кофеина в качестве терапии для похудания нельзя сделать только на основании этого эксперимента.

Ранее сообщалось, что комбинация 20 мг эфедрина и 200 мг кофеина дала синергетический эффект при измерении расхода энергии у шести здоровых и худых людей (2). По этой причине ожидалось, что комбинация альбутерола и кофеина также будет иметь синергетические свойства в увеличении скорости метаболизма в покое у людей.По нашим данным, уровень метаболизма в состоянии покоя при всех курсах лечения увеличился по сравнению с исходным уровнем. Однако наши результаты не указывают на синергизм между альбутеролом и кофеином в увеличении скорости метаболизма. Тенденции ответа на комбинированные дозы альбутерола и кофеина были противоречивыми. Наше исследование было ограничено тем, что в нем было изучено только небольшое количество субъектов из-за исследовательского характера исследования. Различия в механизме действия эфедрина и альбутерола, возможно, также способствовали отсутствию синергизма.Эфедрин и альбутерол отличаются тем, что эфедрин стимулирует как α-, так и β-адренорецепторы, в то время как альбутерол является селективным агонистом β2-адренорецепторов. Поскольку α-адренорецепторы вызывают сужение сосудов, вызывая резкое увеличение частоты пульса и артериального давления, мы ожидали и увидели отсутствие этого эффекта при применении альбутерола. Из-за этой разницы в стимуляции рецепторов возможно, что синергия эфедрина и кофеина на расход энергии может быть связана с дополнительной стимуляцией адренорецепторов α1 или β1.

Эксперимент 3 привел к некоторым интересным и неожиданным изменениям в составе тела. Группы, получавшие физиологический раствор / альбутерол и кофеин / альбутерол, на самом деле набрали больше веса, чем контрольная группа, получавшая физиологический раствор. В группах кофеина / физиологического раствора и кофеина / альбутерола наблюдалось снижение набора жира. Эти данные указывают на то, что различия в массе тела в значительной степени были связаны с увеличением мышечной ткани тела при лечении альбутеролом. Комбинация кофеина и альбутерола не увеличивала мышечную ткань значительно больше, чем лечение альбутеролом по отдельности в эксперименте 3, но в эксперименте 4, где размер группы был больше, а продолжительность лечения была больше (8 недель против 8 недель).4 недели). Эти данные дополнительно подтверждают эффект альбутерола на наращивание мышечной массы, обнаруженный в предыдущих исследованиях (13, 14). Считается, что увеличение массы скелетных мышц является результатом как увеличения синтеза мышечного белка, так и уменьшения его деградации (15, 16). Предыдущее исследование кленбутерола, аналогичного агониста β2, показало, что увеличение синтеза мышечного белка опосредовано увеличением мышечной чувствительности к инсулину, который играет главную роль в синтезе белка (16).По-прежнему необходимы дальнейшие исследования, чтобы лучше оценить потенциал альбутерола как средства для изменения состава тела у людей.

Комбинация кофеина и альбутерола может быть наиболее подходящей для лечения детского ожирения. В настоящее время орлистат является единственным лекарством, одобренным для лечения ожирения у подростков, и у него есть неприятные побочные эффекты, такие как позывы на фекалии и жирный стул. Альбутерол — это недорогой дженерик, одобренный для лечения астмы у детей в возрасте ≥6 лет, а кофеин — это не только пища, но и недорогой одобренный безрецептурный препарат для лечения сонливости у детей ≥12 лет.Наши данные показывают, что комбинация кофеина и альбутерола может увеличить мышечную массу и уменьшить жировую массу во время роста и набора веса. Таким образом, комбинация лекарств, которая увеличивает мышечную массу, уменьшает жировую массу и делает это без изменения режима приема пищи, может быть долгожданным вариантом для врачей, которые сталкиваются с проблемой лечения детского и подросткового ожирения. Родители могут неохотно выступать в роли пищевой полиции, и многие педиатры обеспокоены ограничением приема пищи во время роста.Для определения безопасности и эффективности кофеина и альбутерола потребуются дальнейшие исследования.

Таким образом, кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически. Лечение альбутеролом привело к увеличению скорости метаболизма у крыс, а кофеин не усиливал эффект одного альбутерола. Однако добавление кофеина к альбутеролу улучшило способность препарата увеличивать безжировую массу тела при одновременном снижении жировой массы без изменения приема пищи у крыс и заслуживает дальнейшего изучения в качестве потенциального средства лечения детского ожирения.

Что уже известно по этой теме:

• Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности.

• Альбутерол, обычный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов, может служить возможным заменителем эфедрина.

• Ранее было показано, что альбутерол увеличивает скорость метаболизма и липолиз.

Что добавляет это исследование:

• Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически.

• Лечение кофеином / альбутеролом увеличивало безжировую массу тела, в то же время уменьшая жировую массу больше, чем один альбутерол, без изменения приема пищи у крыс.

Благодарности

Эта работа финансировалась Центром биомедицинских исследований Пеннингтона Университета штата Луизиана и частично грантом Центра исследований ожирения питания NIH 2P30DK072476 от NIDDK, грантом Центра ботанических исследований P50AT002776 от NCCAM54 и ODS. GM104940 от NIGMS, который финансирует Центр клинических и трансляционных исследований Луизианы.FLG, WDJ и SDP задумали и провели эксперименты, внесли свой вклад в анализ и интерпретацию данных и участвовали в написании рукописи. KPA, ALS и YY проводили эксперименты. JTC, GJ и RCT изучили литературу и участвовали в написании рукописи. AGL внесла свой вклад в анализ и интерпретацию данных, сгенерировала цифры и участвовала в написании рукописи. Все авторы просмотрели и одобрили окончательную рукопись.

Список литературы

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма

Ожирение (Silver Spring). Авторская рукопись; доступно в PMC 1 сентября 2016 г.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC4551658

NIHMSID: NIHMS6

Ann G.Лю

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Kenneth P. Arceneaux, III

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Джессика Т. Чу

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Gregory Jacob, Jr.

² Университет Луизианы Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Эллисон Л.Schreiber

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Russell C. Tipton

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Ying Yu

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

William D. Johnson

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Фрэнк Л.Greenway

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Stefany D. Primeaux

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

² Луизианский государственный университет Здравоохранение Медицинский центр Научного центра 1901 г. Пердидо-Сент-Новый Орлеан, Лос-Анджелес 70112

¹ Пеннингтонский центр биомедицинских исследований 6400 Перкинс-роуд Батон-Руж, Лос-Анджелес 70808

² Луизианский государственный университет Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Пердидо-Сент-Новый Орлеан, LA 70112

Abstract

Objective

Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности. Мы исследовали комбинацию кофеина и альбутерола как возможно более безопасную альтернативу эфедрину.

Дизайн и методы

В серии экспериментов с использованием культивированных адипоцитов, моделей крыс и людей мы оценили влияние кофеина и альбутерола на липолиз, скорость метаболизма, потребление пищи и состав тела.

Результаты

И кофеин, и альбутерол усиливали липолиз в культивируемых адипоцитах. Неотложное лечение людей кофеином и / или альбутеролом увеличивает скорость метаболизма в покое. Более длительные исследования на крысах выявили тенденцию к увеличению скорости метаболизма при лечении альбутеролом. При лечении кофеином / альбутеролом наблюдалось увеличение мышечной массы одновременно со снижением набора жировой массы, что было больше, чем при лечении только альбутеролом.

Выводы

У крыс альбутерол с кофеином вызывал значительно большее увеличение безжировой массы тела и уменьшение жировой массы без изменений в приеме пищи после 4-8 недель лечения.Поскольку кофеин и альбутерол одобрены для лечения астмы у детей и подростков в испытанных дозах и изменяют состав тела без изменения приема пищи, эта комбинация может заслужить дальнейшего изучения для использования в лечении детского ожирения.

Ключевые слова: ожирение, липолиз, расход энергии

Введение

Хронические заболевания, такие как гипертония и диабет, обычно лечат с помощью комбинированной лекарственной терапии, но разработка таких методов лечения ожирения все еще находится в зачаточном состоянии (1).Недавние исследования ожирения были сосредоточены на поиске лекарств, которые увеличивают липолиз и скорость метаболизма. Одна из таких комбинаций, кофеин и эфедрин, изначально была многообещающей. Исследования показали, что пациенты, получавшие комбинацию кофеина / эфедрина, демонстрировали большую потерю жира в организме по сравнению с пациентами, получавшими плацебо (1, 2). Эта комбинация впоследствии была продана как нерегулируемая пищевая добавка с использованием эфедры, естественного продукта питания, состоящего из 4 изомеров, наиболее сильнодействующим из которых является эфедрин.Однако в 2004 году FDA запретило продажу добавок, содержащих эфедру, из-за опасений по поводу сердечно-сосудистых рисков, связанных с их использованием (3, 4) [FDA]. Чтобы найти оптимальную замену, необходимо рассмотреть механизм действия как кофеина, так и эфедры / эфедрина.

Кофеин — известный стимулятор липолиза и скорости метаболизма. Он увеличивает внутриклеточные уровни циклического аденозинмонофосфата (цАМФ), которые играют ключевую роль в регулировании липолиза в белой жировой ткани (WAT).Повышенный уровень цАМФ приводит к усиленному распаду триацилглицеридов и увеличению количества циркулирующих свободных жирных кислот (FFA) (5). Кофеин действует как конкурентный ингибитор фосфодиэстеразы, фермента, расщепляющего цАМФ в адипоцитах (6). Кофеин также стимулирует симпатическую нервную систему (5) и активирует адренергические рецепторы β ₂ на WAT посредством высвобождения норадреналина нервными клетками. Активация адренорецепторов β ₂ приводит к активации аденилатциклазы, стимулированию продукции цАМФ и липолизу.Хотя доказано, что кофеин увеличивает расход энергии в покое и увеличивает обмен жирных кислот, большинство мобилизованных FFA повторно этерифицируются, и значительной потери веса достичь невозможно (5). Чтобы решить эту проблему, исследователи сосредоточили свое внимание на поиске лекарства, которое могло бы увеличить скорость метаболизма, чтобы дополнить эффекты кофеина.

Эфедрин, агонист альфа- и бета-адренорецепторов, первоначально продавался как бронходилататор. Позже было обнаружено, что он увеличивает термогенез и метаболизм у пациентов с астмой (7), и исследователи начали исследовать его потенциал в качестве лечения потери веса.Эфедрин стимулирует высвобождение норадреналина из нервных окончаний, который затем связывается с β-адренорецепторами на адипоцитах, что в конечном итоге приводит к липолизу.

Возможным заменителем эфедрина является альбутерол, распространенный и доступный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов. Ранее было показано, что он увеличивает скорость метаболизма (потребление кислорода) и липолиз при вдыхании в четыре раза по сравнению с терапевтической дозой 200 мкг (8, 9). К сожалению, альбутерол в этой дозе в аэрозольной форме неизменно вызывает тахикардию.Однако проглоченная фракция не вызывает этого побочного эффекта, и, таким образом, пероральная форма таблеток альбутерола, по-видимому, является более безопасной формой введения (10). Всестороннее исследование метаболических эффектов комбинированной терапии кофеином и альбутеролом не завершено. Таким образом, целью этих исследований было определить, будет ли комбинированное лечение альбутеролом и кофеином действовать синергетически, чтобы эффективно стимулировать липолиз и повышать скорость метаболизма в покое.

Методы

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Первичная жировая ткань человека была получена от пациентов, перенесших липосакцию, паникулэктомию или бариатрическую операцию. Ткань была обработана LaCell LLC (Новый Орлеан, Луизиана) для выделения и криоконсервации преадипоцитов. Во время анализа преадипоциты дифференцировались в адипоциты. Дифференцированные адипоциты человека, прикрепленные к дну 96-луночного планшета, промывали и обрабатывали средой, содержащей 1) альбутерол 7 нг / мл, 2) альбутерол 17 нг / мл, 3) кофеин 3 мкг / мл 4) кофеин 10 мкг / мл. 5) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 6) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 7) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл 8) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл.Клетки инкубировали с соответствующими обработками при 37 ° C, 5% CO ₂ в течение 3 часов. Изопротеренол 1 мкМ использовали в качестве положительного контроля. После инкубации аликвоту 50 мкл удаляли и объединяли с 50 мкл глицеринового реагента для создания колориметрического анализа, зависящего от количества глицерина, высвобожденного во время инкубации с тестируемыми соединениями. Образцы считывали при 540 нм, и результаты рассчитывали с использованием стандартной кривой. Для каждого условия было проведено восемь повторов.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Исследование было одобрено Наблюдательным советом Института биомедицинского исследовательского центра Пеннингтона.Восемь здоровых мужчин и женщин в возрасте от 18 до 50 лет с индексом массы тела от 19 до 40 кг / м 2 ² были набраны из большого города Батон-Руж, штат Луизиана. Особо исключались беременные, кормящие грудью, курящие, употребляющие никотиновые продукты, регулярно принимавшие лекарства или принимавшие какие-либо лекарства, изменяющие скорость метаболизма, такие как лекарства от астмы или бета-адреноблокаторы. Также были исключены женщины детородного возраста, которые не согласились использовать эффективный метод контрацепции (воздержание, барьерные методы, внутриматочные спирали или гормональные методы контрацепции).Все субъекты подписали письменное информированное согласие до начала процедур исследования.

Исследование было рандомизированным, двойным слепым, перекрестным исследованием, сравнивающим эффекты: 1) альбутерола 2 мг-плацебо, 2) альбутерола 4 мг-плацебо, 3) плацебо-кофеина 100 мг, 4) плацебо-кофеина 200 мг. , 5) альбутерол 2 мг-кофеин 100 мг, 6) альбутерол 2 мг-кофеин 200 мг, 7) альбутерол 4 мг-кофеин 100 мг, 8) альбутерол 4 мг-кофеин 200 мг. Субъекты, включенные в исследование, прошли восемь тестовых дней, каждый из которых разделен одной неделей.Перед каждым посещением пациенты голодали с 21:00 накануне вечером, воздерживались от тяжелых физических нагрузок в течение 24 часов, придерживались своей обычной диеты и воздерживались от алкоголя или напитков, содержащих кофеин, в течение 48 часов. Во время каждого посещения субъект регистрировал кровяное давление, пульс и температуру и отдыхал в течение 30 минут перед измерением скорости метаболизма в покое (RMR) и респираторного коэффициента (RQ) на 0, 60, 120 и 180 минутах. Скорость метаболизма в покое и респираторный коэффициент измеряли с помощью непрямой калориметрии с использованием системы вентилируемого колпака (метаболический монитор DeltaTrac II, Datex Inc.Хельсинки, Финляндия). Во время этой процедуры на голову испытуемого надевали прозрачный колпак, и система анализировала количество потребляемого кислорода и выдыхаемого углекислого газа. После того, как были сделаны базовые измерения, испытуемые получали лечение, состоящее из 2 таблеток для проглатывания, и базовые измерения повторялись в последние 30 минут каждого часа в течение 3 часов.

Эксперименты 3 и 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Комитет по уходу и использованию животных Центра биомедицинских исследований Пеннингтона одобрил протоколы для животных.Крыс содержали индивидуально в клетках из обувных коробок в контролируемых условиях (12-часовой цикл свет-темнота, 22 ° C, влажность 55%). Самцов крыс Sprague-Dawley (Harlan, Inc., Индианаполис, Индиана) (возраст 8-9 недель) кормили диетой с высоким содержанием жира (60% ккал из жира, D12492, Research Diets, Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси) в течение 4 недель. Для эксперимента 3 сорок крыс были рандомизированы в 4 группы лечения и продолжались на диете с высоким содержанием жиров в течение 4 недель: 1) физиологический раствор / физиологический раствор, 2) физиологический раствор / альбутерол, 3) физиологический раствор / кофеин и 4) кофеин / альбутерол. Для эксперимента 4 шестьдесят крыс были рандомизированы в 2 группы лечения и продолжали на диете с высоким содержанием жиров в течение 8 недель: 1) физиологический раствор / альбутерол и 2) кофеин / альбутерол.Все процедуры проводились путем внутрибрюшинной инъекции два раза в день. Альбутерол вводили в дозе 0,125 мг / кг, а кофеин — в дозе 3,12 мг / кг. Доза альбутерола и кофеина была эквивалентна дозе для грызунов 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина три раза в день на основе уравнения метаболической массы (3). Состав тела измеряли с помощью ядерного магнитного резонанса (анализатор ЯМР Minispec LF90, Bruker Optics, Биллерика, Массачусетс). Вес и потребление пищи регистрировали каждые 2 дня.В эксперименте 3 животных помещали в метаболическую камеру (Phenomaster, TSE Systems, Честерфилд, Миссури) в конце 4-недельного периода лечения в течение 3 дней для измерения потребления кислорода, коэффициента респираторного обмена и уровней активности во время лечения. который им был назначен, был продолжен. Общую активность измеряли с помощью системы Phenomaster (TSE Systems, Chesterfield MO). Камеры имели равномерно распределенные сетки инфракрасных лучей, испускаемых по осям X, Y и Z, и система считывала и количественно определяла общие разрывы луча, вызванные движениями животного.

Статистический анализ

Все данные были проанализированы с использованием процедуры PROC MIXED пакета статистического программного обеспечения SAS® версии 9.3 (SAS Institute, Inc., Кэри, Северная Каролина). Данные эксперимента 1 были проанализированы с помощью дисперсионного анализа. В эксперименте 2 изучались 8 видов лечения (комбинации доз альбутерола и кофеина) в дизайне исследования 8 × 8 в латинском квадрате с 8 субъектами, наблюдаемыми в течение 8 недель, в сбалансированном порядке из 8 комбинаций лечения и дозы, при этом каждый субъект получал каждую из доз лечения. комбинации только один раз, и каждая комбинация лечения и дозы вводилась ровно один раз в неделю.Поскольку это исследование было пилотным, никаких расчетов для определения количества участников, необходимого для обеспечения номинальной мощности 80% для выявления конкретных различий в лечении, не проводилось. Изменения времени оценки 0 рассматривались как повторные измерения в течение времени оценки (60, 120, 180 минут) и моделировались как эффекты доз альбутерола, доз кофеина, недель и времени оценки. Демографические данные, нежелательные явления и любые другие данные, не имеющие нормального распределения, анализировали с помощью критерия хи-квадрат. Данные экспериментов 3 и 4 были проанализированы аналогичным образом с использованием аналогичных статистических моделей смешанных эффектов.Данные о расходе энергии были проанализированы с использованием анализа ковариации с безжировой массой тела в качестве ковариаты. Статистическая значимость была определена как p ≤ 0,05.

Результаты

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Обработка адипоцитов любой дозой кофеина, альбутерола или их комбинации приводила к увеличению липолиза на 30-40% по сравнению с клетками, обработанными буфером (p <0,01), за любопытным исключением. дозы кофеина 10 мкг / мл (p = 0,83), как показано на рис. Это увеличение было меньше, чем увеличение липолиза на 90%, наблюдаемое при лечении изопротеронолом, p <0.001).

Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Восемь субъектов завершили это перекрестное исследование с восемью условиями, их характеристики показаны в. Лечение кофеином и / или альбутеролом, независимо от комбинации лечения и дозы, привело к значительному увеличению расхода энергии по сравнению с исходной скоростью метаболизма 1368 ± 153 ккал / день (p <0.02 до p <0,001 для монотерапии, см.).

Влияние кофеина и альбутерола на скорость метаболизма человека. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Таблица 1

Характеристики субъектов исследования (среднее ± стандартное отклонение)

Две дозы кофеина и альбутерола увеличили расход энергии более чем в два раза по сравнению с соответствующей монотерапией кофеином. Повышенный расход энергии составил 2.В 87 раз выше при комбинированной терапии 2 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (104,7 ккал против 36,5 ккал). Увеличение расхода энергии было в 4,80 раза выше при комбинированной терапии 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (175,2 ккал против 36,5, p <0,0001). Хотя были доказательства того, что комбинированная терапия была значительно лучше, чем монотерапия, не было четких доказательств дозозависимости комбинаций или доказательств синергии альбутерола / кофеина на скорость метаболизма (см.).

Статистически значимых изменений систолического артериального давления, диастолического артериального давления, частоты сердечных сокращений или температуры не наблюдалось (данные не показаны).

Эксперимент 3: прибавка в весе и состав тела у крыс

Крысы, получавшие солевой раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, прибавили в весе значительно больше по сравнению с контрольной группой с физиологическим раствором (p = 0,04,). Это не было объяснено изменениями в приеме пищи или активности, поскольку только группа, принимавшая кофеин / физиологический раствор, испытала значительное увеличение активности (p = 0.02,). Различия в весе во многом объяснялись изменениями в составе тела. Крысы, получавшие физиологический раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, набрали дополнительно 16,6 и 20,2 г безжировой массы, соответственно, по сравнению с контрольной группой, получавшей физиологический раствор (p <0,001,). Лечение кофеином или кофеином / альбутеролом также уменьшало накопление жира (p = 0,006). Крысы, получавшие только альбутерол, демонстрировали тенденцию к увеличению расхода энергии во время темной фазы (p = 0,07,). Коэффициент респираторного обмена был одинаковым во всех группах ().

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма у крыс. (A) прибавка в весе, (B) прием пищи, (C) общая активность, (D) состав тела, (E) расход энергии и (F) коэффициент респираторного обмена. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8-10. * р <0,05. # р = 0,07.

Эксперимент 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Поскольку крысы, получавшие кофеин / альбутерол, по-видимому, набирали больше мышечной массы, чем крысы, получавшие только альбутерол в Эксперименте 3, было проведено восьминедельное исследование, чтобы оценить, будут ли эти эффекты проявляться. более выражен при более длительном лечении.Крысы, получавшие кофеин с альбутеролом, набрали больше мышечной массы к 8 неделе по сравнению с одним альбутеролом (63,9 г против 60,3 г, p = 0,03). При анализе изменения в процентах безжировой массы значительные различия были обнаружены на 2, 6, 7 и 8 неделе (). Крысы, получавшие кофеин и альбутерол, также набирали меньше жировой массы по сравнению с одним альбутеролом (). Эта разница была статистически значимой к 5-й неделе и сохранялась до 8-й недели (17,4 г против 20,1 г, p = 0,004). При анализе изменения процента жировой массы значительные различия можно было обнаружить, начиная с 3 недели ().

Комбинация кофеина и альбутерола снижает прирост жировой массы по сравнению с одним альбутеролом. (A) Прирост жировой массы, (B), изменение процентной жировой массы, (C) прирост сухой массы, (D) изменение процентной доли безжировой массы. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 30. * от p <0,05 до p <0,004

Обсуждение

Предыдущие исследования адипоцитов показали, что комбинированное лечение катехоламинами и кофеином проявляет синергизм и приводит к значительному увеличению продукции цАМФ (6). Кроме того, было установлено, что α2-адренорецепторы ингибируют липолиз WAT, что дает селективному β-агонисту преимущество в стимуляции липолиза (11).Таким образом, мы хотели определить, будет ли комбинация более селективного β-агониста, альбутерола и кофеина проявлять синергию за счет большего увеличения цАМФ, приводящего к большему увеличению выработки глицерина, конечного продукта липолиза, по сравнению с одним альбутеролом. В нашем первом эксперименте было измерено производство глицерина in vitro адипоцитами, обработанных различными дозами кофеина, альбутерола и комбинации кофеина / альбутерола (). За исключением дозы кофеина 10 мкг / мл, все виды лечения привели к увеличению глицерина примерно на 30%.Удивительно, но лечение комбинациями кофеин / альбутерол не привело к каким-либо дополнительным или синергетическим эффектам на продукцию глицерина по сравнению с одним кофеином. Этот результат несовместим с экспериментом, проведенным Butcher et al. (6), которые обнаружили, что культивируемые адипоциты, обработанные комбинацией кофеина и α- и β-агониста адреналина, давали синергетическое увеличение цАМФ. Поскольку механизм липолиза зависит от цАМФ, мы ожидали увидеть лучшие результаты в производстве глицерина при использовании более селективного β-агониста в сочетании с кофеином, чем при использовании одного β-агониста.Важно отметить, что эта модель in vitro не учитывает потенциальное влияние кофеина на скорость метаболизма во всем организме. Таким образом, выводы о потенциале альбутерола / кофеина в качестве терапии для похудания нельзя сделать только на основании этого эксперимента.

Ранее сообщалось, что комбинация 20 мг эфедрина и 200 мг кофеина дала синергетический эффект при измерении расхода энергии у шести здоровых и худых людей (2). По этой причине ожидалось, что комбинация альбутерола и кофеина также будет иметь синергетические свойства в увеличении скорости метаболизма в покое у людей.По нашим данным, уровень метаболизма в состоянии покоя при всех курсах лечения увеличился по сравнению с исходным уровнем. Однако наши результаты не указывают на синергизм между альбутеролом и кофеином в увеличении скорости метаболизма. Тенденции ответа на комбинированные дозы альбутерола и кофеина были противоречивыми. Наше исследование было ограничено тем, что в нем было изучено только небольшое количество субъектов из-за исследовательского характера исследования. Различия в механизме действия эфедрина и альбутерола, возможно, также способствовали отсутствию синергизма.Эфедрин и альбутерол отличаются тем, что эфедрин стимулирует как α-, так и β-адренорецепторы, в то время как альбутерол является селективным агонистом β2-адренорецепторов. Поскольку α-адренорецепторы вызывают сужение сосудов, вызывая резкое увеличение частоты пульса и артериального давления, мы ожидали и увидели отсутствие этого эффекта при применении альбутерола. Из-за этой разницы в стимуляции рецепторов возможно, что синергия эфедрина и кофеина на расход энергии может быть связана с дополнительной стимуляцией адренорецепторов α1 или β1.

Эксперимент 3 привел к некоторым интересным и неожиданным изменениям в составе тела. Группы, получавшие физиологический раствор / альбутерол и кофеин / альбутерол, на самом деле набрали больше веса, чем контрольная группа, получавшая физиологический раствор. В группах кофеина / физиологического раствора и кофеина / альбутерола наблюдалось снижение набора жира. Эти данные указывают на то, что различия в массе тела в значительной степени были связаны с увеличением мышечной ткани тела при лечении альбутеролом. Комбинация кофеина и альбутерола не увеличивала мышечную ткань значительно больше, чем лечение альбутеролом по отдельности в эксперименте 3, но в эксперименте 4, где размер группы был больше, а продолжительность лечения была больше (8 недель против 8 недель).4 недели). Эти данные дополнительно подтверждают эффект альбутерола на наращивание мышечной массы, обнаруженный в предыдущих исследованиях (13, 14). Считается, что увеличение массы скелетных мышц является результатом как увеличения синтеза мышечного белка, так и уменьшения его деградации (15, 16). Предыдущее исследование кленбутерола, аналогичного агониста β2, показало, что увеличение синтеза мышечного белка опосредовано увеличением мышечной чувствительности к инсулину, который играет главную роль в синтезе белка (16).По-прежнему необходимы дальнейшие исследования, чтобы лучше оценить потенциал альбутерола как средства для изменения состава тела у людей.

Комбинация кофеина и альбутерола может быть наиболее подходящей для лечения детского ожирения. В настоящее время орлистат является единственным лекарством, одобренным для лечения ожирения у подростков, и у него есть неприятные побочные эффекты, такие как позывы на фекалии и жирный стул. Альбутерол — это недорогой дженерик, одобренный для лечения астмы у детей в возрасте ≥6 лет, а кофеин — это не только пища, но и недорогой одобренный безрецептурный препарат для лечения сонливости у детей ≥12 лет.Наши данные показывают, что комбинация кофеина и альбутерола может увеличить мышечную массу и уменьшить жировую массу во время роста и набора веса. Таким образом, комбинация лекарств, которая увеличивает мышечную массу, уменьшает жировую массу и делает это без изменения режима приема пищи, может быть долгожданным вариантом для врачей, которые сталкиваются с проблемой лечения детского и подросткового ожирения. Родители могут неохотно выступать в роли пищевой полиции, и многие педиатры обеспокоены ограничением приема пищи во время роста.Для определения безопасности и эффективности кофеина и альбутерола потребуются дальнейшие исследования.

Таким образом, кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически. Лечение альбутеролом привело к увеличению скорости метаболизма у крыс, а кофеин не усиливал эффект одного альбутерола. Однако добавление кофеина к альбутеролу улучшило способность препарата увеличивать безжировую массу тела при одновременном снижении жировой массы без изменения приема пищи у крыс и заслуживает дальнейшего изучения в качестве потенциального средства лечения детского ожирения.

Что уже известно по этой теме:

• Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности.

• Альбутерол, обычный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов, может служить возможным заменителем эфедрина.

• Ранее было показано, что альбутерол увеличивает скорость метаболизма и липолиз.

Что добавляет это исследование:

• Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически.

• Лечение кофеином / альбутеролом увеличивало безжировую массу тела, в то же время уменьшая жировую массу больше, чем один альбутерол, без изменения приема пищи у крыс.

Благодарности

Эта работа финансировалась Центром биомедицинских исследований Пеннингтона Университета штата Луизиана и частично грантом Центра исследований ожирения питания NIH 2P30DK072476 от NIDDK, грантом Центра ботанических исследований P50AT002776 от NCCAM54 и ODS. GM104940 от NIGMS, который финансирует Центр клинических и трансляционных исследований Луизианы.FLG, WDJ и SDP задумали и провели эксперименты, внесли свой вклад в анализ и интерпретацию данных и участвовали в написании рукописи. KPA, ALS и YY проводили эксперименты. JTC, GJ и RCT изучили литературу и участвовали в написании рукописи. AGL внесла свой вклад в анализ и интерпретацию данных, сгенерировала цифры и участвовала в написании рукописи. Все авторы просмотрели и одобрили окончательную рукопись.

Список литературы

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма

Ожирение (Silver Spring). Авторская рукопись; доступно в PMC 1 сентября 2016 г.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC4551658

NIHMSID: NIHMS6

Ann G.Лю

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Kenneth P. Arceneaux, III

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Джессика Т. Чу

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Gregory Jacob, Jr.

² Университет Луизианы Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Эллисон Л.Schreiber

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Russell C. Tipton

² Центр медицинских наук Университета Луизианы Школа медицины 1901 Perdido St New Orleans, LA 70112

Ying Yu

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

William D. Johnson

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Фрэнк Л.Greenway

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

Stefany D. Primeaux

¹ Pennington Biomedical Research Center 6400 Perkins Road Baton Rouge, LA 70808

² Луизианский государственный университет Здравоохранение Медицинский центр Научного центра 1901 г. Пердидо-Сент-Новый Орлеан, Лос-Анджелес 70112

¹ Пеннингтонский центр биомедицинских исследований 6400 Перкинс-роуд Батон-Руж, Лос-Анджелес 70808

² Луизианский государственный университет Центр медицинских наук Школа медицины 1901 Пердидо-Сент-Новый Орлеан, LA 70112

Abstract

Objective

Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности. Мы исследовали комбинацию кофеина и альбутерола как возможно более безопасную альтернативу эфедрину.

Дизайн и методы

В серии экспериментов с использованием культивированных адипоцитов, моделей крыс и людей мы оценили влияние кофеина и альбутерола на липолиз, скорость метаболизма, потребление пищи и состав тела.

Результаты

И кофеин, и альбутерол усиливали липолиз в культивируемых адипоцитах. Неотложное лечение людей кофеином и / или альбутеролом увеличивает скорость метаболизма в покое. Более длительные исследования на крысах выявили тенденцию к увеличению скорости метаболизма при лечении альбутеролом. При лечении кофеином / альбутеролом наблюдалось увеличение мышечной массы одновременно со снижением набора жировой массы, что было больше, чем при лечении только альбутеролом.

Выводы

У крыс альбутерол с кофеином вызывал значительно большее увеличение безжировой массы тела и уменьшение жировой массы без изменений в приеме пищи после 4-8 недель лечения.Поскольку кофеин и альбутерол одобрены для лечения астмы у детей и подростков в испытанных дозах и изменяют состав тела без изменения приема пищи, эта комбинация может заслужить дальнейшего изучения для использования в лечении детского ожирения.

Ключевые слова: ожирение, липолиз, расход энергии

Введение

Хронические заболевания, такие как гипертония и диабет, обычно лечат с помощью комбинированной лекарственной терапии, но разработка таких методов лечения ожирения все еще находится в зачаточном состоянии (1).Недавние исследования ожирения были сосредоточены на поиске лекарств, которые увеличивают липолиз и скорость метаболизма. Одна из таких комбинаций, кофеин и эфедрин, изначально была многообещающей. Исследования показали, что пациенты, получавшие комбинацию кофеина / эфедрина, демонстрировали большую потерю жира в организме по сравнению с пациентами, получавшими плацебо (1, 2). Эта комбинация впоследствии была продана как нерегулируемая пищевая добавка с использованием эфедры, естественного продукта питания, состоящего из 4 изомеров, наиболее сильнодействующим из которых является эфедрин.Однако в 2004 году FDA запретило продажу добавок, содержащих эфедру, из-за опасений по поводу сердечно-сосудистых рисков, связанных с их использованием (3, 4) [FDA]. Чтобы найти оптимальную замену, необходимо рассмотреть механизм действия как кофеина, так и эфедры / эфедрина.

Кофеин — известный стимулятор липолиза и скорости метаболизма. Он увеличивает внутриклеточные уровни циклического аденозинмонофосфата (цАМФ), которые играют ключевую роль в регулировании липолиза в белой жировой ткани (WAT).Повышенный уровень цАМФ приводит к усиленному распаду триацилглицеридов и увеличению количества циркулирующих свободных жирных кислот (FFA) (5). Кофеин действует как конкурентный ингибитор фосфодиэстеразы, фермента, расщепляющего цАМФ в адипоцитах (6). Кофеин также стимулирует симпатическую нервную систему (5) и активирует адренергические рецепторы β ₂ на WAT посредством высвобождения норадреналина нервными клетками. Активация адренорецепторов β ₂ приводит к активации аденилатциклазы, стимулированию продукции цАМФ и липолизу.Хотя доказано, что кофеин увеличивает расход энергии в покое и увеличивает обмен жирных кислот, большинство мобилизованных FFA повторно этерифицируются, и значительной потери веса достичь невозможно (5). Чтобы решить эту проблему, исследователи сосредоточили свое внимание на поиске лекарства, которое могло бы увеличить скорость метаболизма, чтобы дополнить эффекты кофеина.

Эфедрин, агонист альфа- и бета-адренорецепторов, первоначально продавался как бронходилататор. Позже было обнаружено, что он увеличивает термогенез и метаболизм у пациентов с астмой (7), и исследователи начали исследовать его потенциал в качестве лечения потери веса.Эфедрин стимулирует высвобождение норадреналина из нервных окончаний, который затем связывается с β-адренорецепторами на адипоцитах, что в конечном итоге приводит к липолизу.

Возможным заменителем эфедрина является альбутерол, распространенный и доступный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов. Ранее было показано, что он увеличивает скорость метаболизма (потребление кислорода) и липолиз при вдыхании в четыре раза по сравнению с терапевтической дозой 200 мкг (8, 9). К сожалению, альбутерол в этой дозе в аэрозольной форме неизменно вызывает тахикардию.Однако проглоченная фракция не вызывает этого побочного эффекта, и, таким образом, пероральная форма таблеток альбутерола, по-видимому, является более безопасной формой введения (10). Всестороннее исследование метаболических эффектов комбинированной терапии кофеином и альбутеролом не завершено. Таким образом, целью этих исследований было определить, будет ли комбинированное лечение альбутеролом и кофеином действовать синергетически, чтобы эффективно стимулировать липолиз и повышать скорость метаболизма в покое.

Методы

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Первичная жировая ткань человека была получена от пациентов, перенесших липосакцию, паникулэктомию или бариатрическую операцию. Ткань была обработана LaCell LLC (Новый Орлеан, Луизиана) для выделения и криоконсервации преадипоцитов. Во время анализа преадипоциты дифференцировались в адипоциты. Дифференцированные адипоциты человека, прикрепленные к дну 96-луночного планшета, промывали и обрабатывали средой, содержащей 1) альбутерол 7 нг / мл, 2) альбутерол 17 нг / мл, 3) кофеин 3 мкг / мл 4) кофеин 10 мкг / мл. 5) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 6) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 3 мкг / мл 7) альбутерол 7 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл 8) альбутерол 17 нг / мл и кофеин 10 мкг / мл.Клетки инкубировали с соответствующими обработками при 37 ° C, 5% CO ₂ в течение 3 часов. Изопротеренол 1 мкМ использовали в качестве положительного контроля. После инкубации аликвоту 50 мкл удаляли и объединяли с 50 мкл глицеринового реагента для создания колориметрического анализа, зависящего от количества глицерина, высвобожденного во время инкубации с тестируемыми соединениями. Образцы считывали при 540 нм, и результаты рассчитывали с использованием стандартной кривой. Для каждого условия было проведено восемь повторов.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Исследование было одобрено Наблюдательным советом Института биомедицинского исследовательского центра Пеннингтона.Восемь здоровых мужчин и женщин в возрасте от 18 до 50 лет с индексом массы тела от 19 до 40 кг / м 2 ² были набраны из большого города Батон-Руж, штат Луизиана. Особо исключались беременные, кормящие грудью, курящие, употребляющие никотиновые продукты, регулярно принимавшие лекарства или принимавшие какие-либо лекарства, изменяющие скорость метаболизма, такие как лекарства от астмы или бета-адреноблокаторы. Также были исключены женщины детородного возраста, которые не согласились использовать эффективный метод контрацепции (воздержание, барьерные методы, внутриматочные спирали или гормональные методы контрацепции).Все субъекты подписали письменное информированное согласие до начала процедур исследования.

Исследование было рандомизированным, двойным слепым, перекрестным исследованием, сравнивающим эффекты: 1) альбутерола 2 мг-плацебо, 2) альбутерола 4 мг-плацебо, 3) плацебо-кофеина 100 мг, 4) плацебо-кофеина 200 мг. , 5) альбутерол 2 мг-кофеин 100 мг, 6) альбутерол 2 мг-кофеин 200 мг, 7) альбутерол 4 мг-кофеин 100 мг, 8) альбутерол 4 мг-кофеин 200 мг. Субъекты, включенные в исследование, прошли восемь тестовых дней, каждый из которых разделен одной неделей.Перед каждым посещением пациенты голодали с 21:00 накануне вечером, воздерживались от тяжелых физических нагрузок в течение 24 часов, придерживались своей обычной диеты и воздерживались от алкоголя или напитков, содержащих кофеин, в течение 48 часов. Во время каждого посещения субъект регистрировал кровяное давление, пульс и температуру и отдыхал в течение 30 минут перед измерением скорости метаболизма в покое (RMR) и респираторного коэффициента (RQ) на 0, 60, 120 и 180 минутах. Скорость метаболизма в покое и респираторный коэффициент измеряли с помощью непрямой калориметрии с использованием системы вентилируемого колпака (метаболический монитор DeltaTrac II, Datex Inc.Хельсинки, Финляндия). Во время этой процедуры на голову испытуемого надевали прозрачный колпак, и система анализировала количество потребляемого кислорода и выдыхаемого углекислого газа. После того, как были сделаны базовые измерения, испытуемые получали лечение, состоящее из 2 таблеток для проглатывания, и базовые измерения повторялись в последние 30 минут каждого часа в течение 3 часов.

Эксперименты 3 и 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Комитет по уходу и использованию животных Центра биомедицинских исследований Пеннингтона одобрил протоколы для животных.Крыс содержали индивидуально в клетках из обувных коробок в контролируемых условиях (12-часовой цикл свет-темнота, 22 ° C, влажность 55%). Самцов крыс Sprague-Dawley (Harlan, Inc., Индианаполис, Индиана) (возраст 8-9 недель) кормили диетой с высоким содержанием жира (60% ккал из жира, D12492, Research Diets, Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси) в течение 4 недель. Для эксперимента 3 сорок крыс были рандомизированы в 4 группы лечения и продолжались на диете с высоким содержанием жиров в течение 4 недель: 1) физиологический раствор / физиологический раствор, 2) физиологический раствор / альбутерол, 3) физиологический раствор / кофеин и 4) кофеин / альбутерол. Для эксперимента 4 шестьдесят крыс были рандомизированы в 2 группы лечения и продолжали на диете с высоким содержанием жиров в течение 8 недель: 1) физиологический раствор / альбутерол и 2) кофеин / альбутерол.Все процедуры проводились путем внутрибрюшинной инъекции два раза в день. Альбутерол вводили в дозе 0,125 мг / кг, а кофеин — в дозе 3,12 мг / кг. Доза альбутерола и кофеина была эквивалентна дозе для грызунов 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина три раза в день на основе уравнения метаболической массы (3). Состав тела измеряли с помощью ядерного магнитного резонанса (анализатор ЯМР Minispec LF90, Bruker Optics, Биллерика, Массачусетс). Вес и потребление пищи регистрировали каждые 2 дня.В эксперименте 3 животных помещали в метаболическую камеру (Phenomaster, TSE Systems, Честерфилд, Миссури) в конце 4-недельного периода лечения в течение 3 дней для измерения потребления кислорода, коэффициента респираторного обмена и уровней активности во время лечения. который им был назначен, был продолжен. Общую активность измеряли с помощью системы Phenomaster (TSE Systems, Chesterfield MO). Камеры имели равномерно распределенные сетки инфракрасных лучей, испускаемых по осям X, Y и Z, и система считывала и количественно определяла общие разрывы луча, вызванные движениями животного.

Статистический анализ

Все данные были проанализированы с использованием процедуры PROC MIXED пакета статистического программного обеспечения SAS® версии 9.3 (SAS Institute, Inc., Кэри, Северная Каролина). Данные эксперимента 1 были проанализированы с помощью дисперсионного анализа. В эксперименте 2 изучались 8 видов лечения (комбинации доз альбутерола и кофеина) в дизайне исследования 8 × 8 в латинском квадрате с 8 субъектами, наблюдаемыми в течение 8 недель, в сбалансированном порядке из 8 комбинаций лечения и дозы, при этом каждый субъект получал каждую из доз лечения. комбинации только один раз, и каждая комбинация лечения и дозы вводилась ровно один раз в неделю.Поскольку это исследование было пилотным, никаких расчетов для определения количества участников, необходимого для обеспечения номинальной мощности 80% для выявления конкретных различий в лечении, не проводилось. Изменения времени оценки 0 рассматривались как повторные измерения в течение времени оценки (60, 120, 180 минут) и моделировались как эффекты доз альбутерола, доз кофеина, недель и времени оценки. Демографические данные, нежелательные явления и любые другие данные, не имеющие нормального распределения, анализировали с помощью критерия хи-квадрат. Данные экспериментов 3 и 4 были проанализированы аналогичным образом с использованием аналогичных статистических моделей смешанных эффектов.Данные о расходе энергии были проанализированы с использованием анализа ковариации с безжировой массой тела в качестве ковариаты. Статистическая значимость была определена как p ≤ 0,05.

Результаты

Эксперимент 1: Анализ липолиза

Обработка адипоцитов любой дозой кофеина, альбутерола или их комбинации приводила к увеличению липолиза на 30-40% по сравнению с клетками, обработанными буфером (p <0,01), за любопытным исключением. дозы кофеина 10 мкг / мл (p = 0,83), как показано на рис. Это увеличение было меньше, чем увеличение липолиза на 90%, наблюдаемое при лечении изопротеронолом, p <0.001).

Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Эксперимент 2: Скорость метаболизма у людей

Восемь субъектов завершили это перекрестное исследование с восемью условиями, их характеристики показаны в. Лечение кофеином и / или альбутеролом, независимо от комбинации лечения и дозы, привело к значительному увеличению расхода энергии по сравнению с исходной скоростью метаболизма 1368 ± 153 ккал / день (p <0.02 до p <0,001 для монотерапии, см.).

Влияние кофеина и альбутерола на скорость метаболизма человека. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8. Статистически разные столбцы (p <0,05) обозначаются другой буквой (a, b или c). Полоски с одной и той же буквой существенно не отличаются.

Таблица 1

Характеристики субъектов исследования (среднее ± стандартное отклонение)

Две дозы кофеина и альбутерола увеличили расход энергии более чем в два раза по сравнению с соответствующей монотерапией кофеином. Повышенный расход энергии составил 2.В 87 раз выше при комбинированной терапии 2 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (104,7 ккал против 36,5 ккал). Увеличение расхода энергии было в 4,80 раза выше при комбинированной терапии 4 мг альбутерола и 100 мг кофеина по сравнению с одним кофеином 100 мг (175,2 ккал против 36,5, p <0,0001). Хотя были доказательства того, что комбинированная терапия была значительно лучше, чем монотерапия, не было четких доказательств дозозависимости комбинаций или доказательств синергии альбутерола / кофеина на скорость метаболизма (см.).

Статистически значимых изменений систолического артериального давления, диастолического артериального давления, частоты сердечных сокращений или температуры не наблюдалось (данные не показаны).

Эксперимент 3: прибавка в весе и состав тела у крыс

Крысы, получавшие солевой раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, прибавили в весе значительно больше по сравнению с контрольной группой с физиологическим раствором (p = 0,04,). Это не было объяснено изменениями в приеме пищи или активности, поскольку только группа, принимавшая кофеин / физиологический раствор, испытала значительное увеличение активности (p = 0.02,). Различия в весе во многом объяснялись изменениями в составе тела. Крысы, получавшие физиологический раствор / альбутерол или кофеин / альбутерол, набрали дополнительно 16,6 и 20,2 г безжировой массы, соответственно, по сравнению с контрольной группой, получавшей физиологический раствор (p <0,001,). Лечение кофеином или кофеином / альбутеролом также уменьшало накопление жира (p = 0,006). Крысы, получавшие только альбутерол, демонстрировали тенденцию к увеличению расхода энергии во время темной фазы (p = 0,07,). Коэффициент респираторного обмена был одинаковым во всех группах ().

Влияние кофеина и альбутерола на состав тела и скорость метаболизма у крыс. (A) прибавка в весе, (B) прием пищи, (C) общая активность, (D) состав тела, (E) расход энергии и (F) коэффициент респираторного обмена. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 8-10. * р <0,05. # р = 0,07.

Эксперимент 4: прибавка в весе и состав тела у крыс

Поскольку крысы, получавшие кофеин / альбутерол, по-видимому, набирали больше мышечной массы, чем крысы, получавшие только альбутерол в Эксперименте 3, было проведено восьминедельное исследование, чтобы оценить, будут ли эти эффекты проявляться. более выражен при более длительном лечении.Крысы, получавшие кофеин с альбутеролом, набрали больше мышечной массы к 8 неделе по сравнению с одним альбутеролом (63,9 г против 60,3 г, p = 0,03). При анализе изменения в процентах безжировой массы значительные различия были обнаружены на 2, 6, 7 и 8 неделе (). Крысы, получавшие кофеин и альбутерол, также набирали меньше жировой массы по сравнению с одним альбутеролом (). Эта разница была статистически значимой к 5-й неделе и сохранялась до 8-й недели (17,4 г против 20,1 г, p = 0,004). При анализе изменения процента жировой массы значительные различия можно было обнаружить, начиная с 3 недели ().

Комбинация кофеина и альбутерола снижает прирост жировой массы по сравнению с одним альбутеролом. (A) Прирост жировой массы, (B), изменение процентной жировой массы, (C) прирост сухой массы, (D) изменение процентной доли безжировой массы. Значения представляют собой средние значения ± 95% доверительный интервал, n = 30. * от p <0,05 до p <0,004

Обсуждение

Предыдущие исследования адипоцитов показали, что комбинированное лечение катехоламинами и кофеином проявляет синергизм и приводит к значительному увеличению продукции цАМФ (6). Кроме того, было установлено, что α2-адренорецепторы ингибируют липолиз WAT, что дает селективному β-агонисту преимущество в стимуляции липолиза (11).Таким образом, мы хотели определить, будет ли комбинация более селективного β-агониста, альбутерола и кофеина проявлять синергию за счет большего увеличения цАМФ, приводящего к большему увеличению выработки глицерина, конечного продукта липолиза, по сравнению с одним альбутеролом. В нашем первом эксперименте было измерено производство глицерина in vitro адипоцитами, обработанных различными дозами кофеина, альбутерола и комбинации кофеина / альбутерола (). За исключением дозы кофеина 10 мкг / мл, все виды лечения привели к увеличению глицерина примерно на 30%.Удивительно, но лечение комбинациями кофеин / альбутерол не привело к каким-либо дополнительным или синергетическим эффектам на продукцию глицерина по сравнению с одним кофеином. Этот результат несовместим с экспериментом, проведенным Butcher et al. (6), которые обнаружили, что культивируемые адипоциты, обработанные комбинацией кофеина и α- и β-агониста адреналина, давали синергетическое увеличение цАМФ. Поскольку механизм липолиза зависит от цАМФ, мы ожидали увидеть лучшие результаты в производстве глицерина при использовании более селективного β-агониста в сочетании с кофеином, чем при использовании одного β-агониста.Важно отметить, что эта модель in vitro не учитывает потенциальное влияние кофеина на скорость метаболизма во всем организме. Таким образом, выводы о потенциале альбутерола / кофеина в качестве терапии для похудания нельзя сделать только на основании этого эксперимента.

Ранее сообщалось, что комбинация 20 мг эфедрина и 200 мг кофеина дала синергетический эффект при измерении расхода энергии у шести здоровых и худых людей (2). По этой причине ожидалось, что комбинация альбутерола и кофеина также будет иметь синергетические свойства в увеличении скорости метаболизма в покое у людей.По нашим данным, уровень метаболизма в состоянии покоя при всех курсах лечения увеличился по сравнению с исходным уровнем. Однако наши результаты не указывают на синергизм между альбутеролом и кофеином в увеличении скорости метаболизма. Тенденции ответа на комбинированные дозы альбутерола и кофеина были противоречивыми. Наше исследование было ограничено тем, что в нем было изучено только небольшое количество субъектов из-за исследовательского характера исследования. Различия в механизме действия эфедрина и альбутерола, возможно, также способствовали отсутствию синергизма.Эфедрин и альбутерол отличаются тем, что эфедрин стимулирует как α-, так и β-адренорецепторы, в то время как альбутерол является селективным агонистом β2-адренорецепторов. Поскольку α-адренорецепторы вызывают сужение сосудов, вызывая резкое увеличение частоты пульса и артериального давления, мы ожидали и увидели отсутствие этого эффекта при применении альбутерола. Из-за этой разницы в стимуляции рецепторов возможно, что синергия эфедрина и кофеина на расход энергии может быть связана с дополнительной стимуляцией адренорецепторов α1 или β1.

Эксперимент 3 привел к некоторым интересным и неожиданным изменениям в составе тела. Группы, получавшие физиологический раствор / альбутерол и кофеин / альбутерол, на самом деле набрали больше веса, чем контрольная группа, получавшая физиологический раствор. В группах кофеина / физиологического раствора и кофеина / альбутерола наблюдалось снижение набора жира. Эти данные указывают на то, что различия в массе тела в значительной степени были связаны с увеличением мышечной ткани тела при лечении альбутеролом. Комбинация кофеина и альбутерола не увеличивала мышечную ткань значительно больше, чем лечение альбутеролом по отдельности в эксперименте 3, но в эксперименте 4, где размер группы был больше, а продолжительность лечения была больше (8 недель против 8 недель).4 недели). Эти данные дополнительно подтверждают эффект альбутерола на наращивание мышечной массы, обнаруженный в предыдущих исследованиях (13, 14). Считается, что увеличение массы скелетных мышц является результатом как увеличения синтеза мышечного белка, так и уменьшения его деградации (15, 16). Предыдущее исследование кленбутерола, аналогичного агониста β2, показало, что увеличение синтеза мышечного белка опосредовано увеличением мышечной чувствительности к инсулину, который играет главную роль в синтезе белка (16).По-прежнему необходимы дальнейшие исследования, чтобы лучше оценить потенциал альбутерола как средства для изменения состава тела у людей.

Комбинация кофеина и альбутерола может быть наиболее подходящей для лечения детского ожирения. В настоящее время орлистат является единственным лекарством, одобренным для лечения ожирения у подростков, и у него есть неприятные побочные эффекты, такие как позывы на фекалии и жирный стул. Альбутерол — это недорогой дженерик, одобренный для лечения астмы у детей в возрасте ≥6 лет, а кофеин — это не только пища, но и недорогой одобренный безрецептурный препарат для лечения сонливости у детей ≥12 лет.Наши данные показывают, что комбинация кофеина и альбутерола может увеличить мышечную массу и уменьшить жировую массу во время роста и набора веса. Таким образом, комбинация лекарств, которая увеличивает мышечную массу, уменьшает жировую массу и делает это без изменения режима приема пищи, может быть долгожданным вариантом для врачей, которые сталкиваются с проблемой лечения детского и подросткового ожирения. Родители могут неохотно выступать в роли пищевой полиции, и многие педиатры обеспокоены ограничением приема пищи во время роста.Для определения безопасности и эффективности кофеина и альбутерола потребуются дальнейшие исследования.

Таким образом, кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически. Лечение альбутеролом привело к увеличению скорости метаболизма у крыс, а кофеин не усиливал эффект одного альбутерола. Однако добавление кофеина к альбутеролу улучшило способность препарата увеличивать безжировую массу тела при одновременном снижении жировой массы без изменения приема пищи у крыс и заслуживает дальнейшего изучения в качестве потенциального средства лечения детского ожирения.

Что уже известно по этой теме:

• Кофеин и эфедрин были эффективной комбинированной терапией для снижения веса до тех пор, пока эфедрин не был удален с рынка из соображений безопасности.

• Альбутерол, обычный бронходилататор, используемый для лечения астмы, и селективный агонист β2-адренорецепторов, может служить возможным заменителем эфедрина.

• Ранее было показано, что альбутерол увеличивает скорость метаболизма и липолиз.

Что добавляет это исследование:

• Кофеин и альбутерол увеличивают липолиз in vitro и скорость метаболизма у людей, но не синергетически.

• Лечение кофеином / альбутеролом увеличивало безжировую массу тела, в то же время уменьшая жировую массу больше, чем один альбутерол, без изменения приема пищи у крыс.

Благодарности

Эта работа финансировалась Центром биомедицинских исследований Пеннингтона Университета штата Луизиана и частично грантом Центра исследований ожирения питания NIH 2P30DK072476 от NIDDK, грантом Центра ботанических исследований P50AT002776 от NCCAM54 и ODS. GM104940 от NIGMS, который финансирует Центр клинических и трансляционных исследований Луизианы.FLG, WDJ и SDP задумали и провели эксперименты, внесли свой вклад в анализ и интерпретацию данных и участвовали в написании рукописи. KPA, ALS и YY проводили эксперименты. JTC, GJ и RCT изучили литературу и участвовали в написании рукописи. AGL внесла свой вклад в анализ и интерпретацию данных, сгенерировала цифры и участвовала в написании рукописи. Все авторы просмотрели и одобрили окончательную рукопись.

Список литературы

альбутерола сульфата перорально и аспирин-кофеин перорально Взаимодействие с лекарствами

НЕВОЗМОЖНО ОТОБРАЗИТЬ ЛЮБЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ

Проверьте дополнительные взаимодействия с помощью средства проверки взаимодействия с наркотиками

Категории лекарственного взаимодействия

Противопоказано

Никогда не используйте эту комбинацию препаратов из-за высокого риска опасного взаимодействия

Серьезный

Возможность серьезного взаимодействия; требуется регулярный контроль со стороны врача или могут потребоваться альтернативные лекарства

Значительное

Возможность значительного взаимодействия (вероятно, потребуется наблюдение со стороны врача)

Незначительный

Взаимодействие маловероятно, незначительно или несущественно

Заявление об ограничении ответственности: Информация, содержащаяся в данном документе, НЕ должна использоваться в качестве замены совета соответственно квалифицированного и лицензированного врача или другого поставщика медицинских услуг.