Протеин многокомпонентный это: Многокомпонентный протеин: нафига он нужен?

Содержание

Многокомпонентный протеин: нафига он нужен?

Многокомпонентный протеин: нафига он нужен?

| |

Автор: Тимко Илья — владыка всея сайта и фитнес-тренер.
Дата: 2016-08-28

Все статьи автора >

Многокомпонентный протеин, это такой протеин, куда входят несколько видов белка. Обычно это такие виды, как:

То есть, производитель мешает несколько видов протеина. Зачем он это делает? На это есть 2 причины:

1. Удешевить продукт. НИ ОДИН ПРОИЗВОДИТЕЛЬ не указывает, какого протеина сколько процентов положено в упаковку. Что это значит? Это значит, что производитель вполне может (а многие таки и делают) кинуть щепотку дорогих протеинов (казеин, гидролизат) и побольше дешёвых (соевый протеин) и при этом написать на упаковке, что все эти протеины есть. Но не сказать при этом, какого протеина – сколько.

2. Причина №2 – сделать протеин разнообразнее по аминокислотному составу и сделать его более универсальным. Ведь в многокомпонентном протеине есть как быстрые протеины (сыворотка), так и медленные (казеин).

Но, что касается разнообразного аминокислотного состава – это всё фигня. В сыворотке и казеине присутствует все 18 аминокислот, которые есть в белке. В яичном не хватает 2-х аминок , а в сое – 1. Поэтому, от смешивания всех этих видов протеина – более богатым состав не становится. Он остаётся прежним.

Так нужен ли такой протеин вообще?

Да. Как я писал выше – комплексный протеин в себе содержит как быстрые, так и медленные белки. Это единственное его преимущество. И довольно важное. Такой протеин универсален в плане употребления. Его можно пить и на ночь, и после тренировки, и вообще в любое время дня и ночи. Многокомпонентный протеин насыщает организм аминокислотами как мгновенно, так и в течение нескольких часов.

Больше плюсов у комплексного протеина нет. Но и одного этого плюса достаточно, чтобы попробовать его.

Идеальная формула многокомпонентного протеина

Идеальная формула очень проста и содержит в себе всего 2 вида протеина:

  • 50% сывороточного гидролизата.
  • 50% мицеллярного казеина.

Сывороточный гидролизат – самый быстрый протеин, а мицеллярный казеин – самый медленный. Всё! Больше ничего не нужно. Всё остальное – маркетинговый ход. Но встречается ли такой комплексный протеин в природе? Нет! Дело в том, что оба эти протеина – очень дорогие, и если смешать их 50/50, то даже в российских условиях получится примерно 2000 р за 1 кг. А у буржуев – до 3000 р за 1 кг (цены на лето 2016).

В большинстве же случае комплексный протеин дешевле, например, того же сывороточного концентрата. Вы не задумывались, почему так? Ведь и гидролизат, и изолят, и казеин, и яичный протеин – дороже сывороточного концентрата. И по идее, такой протеин должен стоить дороже. Но есть же соевый протеин! Он и приходит на помощь маркетологам. Ведь в комплексный протеин можно напихать сои и удешевить его вполне легально, а то, что там сои больше половины – так об этом можно и не писать.

Кстати, по этой же причине много производителей не указывают аминокислотный состав таких протеинов. Ведь, имея мозги и знания в области спортпита, можно по аминокислотному составу примерно вычислить, какого протеина туда положили больше всего.

Так что же делать?

Вам остаётся либо сделать такой протеин самому, купив отдельно эти 2 протеина (как я написал выше), либо выбрать из того, что есть на рынке. Из более-менее нормальных вариантов могу предложить:

ПОХОЖИЕ СТАТЬИ

  1. Протеиновые батончики: зачем они нужны и стоит ли их покупать?
  2. Как готовить протеиновые смеси в домашних условиях
  3. ТОП 10 лучших протеинов – обзор и сравнение
  4. Как сэкономить на покупке протеина
  5. Обзор видов протеина

Многокомпонентный протеин * Лучший комплексный или сывороточный

Выбор протеина может превратиться в головную боль, если Вы не сильно разбираетесь в специфике этого товара. В этой статье мы подробно расскажем о многокомпонентных протеиновых добавках.

Комплекс протеинов – из чего состоят и кому нужны?

 

Комбинированный протеин – это союз из нескольких видов белка (казеин, сывороточный и другие), каждый из которых обладает уникальным перечнем свойств и преимуществ.

Комбинация из яичного, сывороточного и казеинового протеина считается лучшей при регулярных физических нагрузках. Состав яичного и сывороточного белков обогащён необходимыми аминокислотами (в т.ч. БЦАА). Они быстро усваиваются и мгновенно наполняют организм полезными веществами. Казеин же характеризуется медленным темпом усвояемости, что позволяет равномерно подпитывать организм в течение 6-8 часов после приёма.

Нередко в составе комплексных протеинов можно найти соевый белок, который насыщает организм аргинином и повышает секрецию гормона роста.

Комплексные протеины подойдут и для набора мышечной массы, и для снижения веса. Вне зависимости от целей спортсмена, эта добавка дополнит рацион питания и незамедлительно продемонстрирует положительный эффект.

Как принимать многокомпонентный протеин?

Универсальность добавки позволяет принимать протеин в любое время и для любых задач. Но всё же следует скорректировать время и кратность приёма, в зависимости от желаемого результата.

Для набора массы. Идеальное время приёма – перед сном. Быстрые белки моментально снабдят ваши мышцы важными аминокислотами, а медленные будут перевариваться во время сна. Также не лишним будет порция протеина, если ожидается большой промежуток без пищи.

Для рельефа. Принимайте в перерывах между приёмами еды. Тандем быстрых и медленных белков будет долго насыщать организм.

Важно! Из-за наличия казеина (медленного белка) в составе, следует принимать добавку более чем за 2 часа до тренировки. Иначе во время тренировки возможен дискомфорт в желудке.

Что лучше – сывороточный или комплексный протеин?

Для того чтобы разобраться в этом вопросе следует сравнивать эти 2 варианта.

Сывороточный протеин:

  • обладает высокой скоростью усвоения;
  • мгновенно насыщает организм всеми необходимыми аминокислотами;
  • ускоряет процесс построения мышечной массы;
  • имеет богатый состав аминокислот;
  • доступная стоимость.

Комплексный протеин:

  • содержит в составе медленные белки;
  • полноценно дополняет дневной рацион спортсмена;
  • идеально подходит при отсутствии возможности принять обычную пищу.

Каждый вид протеина имеет свои преимущества. Выбрать сывороточный или многокомпонентный – решать только Вам. Но, если соотносить эти виды добавок с сушкой и набором массы, то, скорее всего, будет так: сывороточный протеин (иззолят, гидролизат) – сушка; многокомпонентный – набор массы.

Не стоит забывать, что большинство комплексных протеинов на 70-80% состоят из сывороточного белка, потому очень большой разницы между ними нет.

Лучший многокомпонентный протеин – ТОП 3!

Очень часто недобросовестные производители в погоне за удешевлением товара, добавляют в состав растительные белки, у которых большое количество недостатков. Для того, чтобы Вы не тратили деньги на некачественный продукт, мы составили список из трёх достойных конкурентов в звании «Лучший комплексный протеин».

Syntha 6 BSN

Состав добавки включает в себя сразу 6 видов протеина. Один коктейль на основе Синты 6 будет поддерживать баланс аминокислот в организме до 6-7 часов. В процессе изготовления не использовались различные примеси, которые могут повредить работе организма.

Безусловным преимуществом, которое отмечают все, кто хоть раз попробовал продукт, является неповторимый вкус. Он заставит Вас по-новому взглянуть на спортивное питание.

Состав

Шесть видов белка с разной скоростью усвоения не позволят организму впасть в процесс голодания, и тем самым разрушать мускулатуру.

В одной порции (44 г):

  • Белок – 22 г;
  • Жиры – 6 г;
  • Углеводы – 15 г;
  • 200 калорий.

Помимо основных элементов в состав включены такие вспомогательные вещества:

  • глютамин;
  • папин;
  • бромелайн;
  • кальций;
  • фосфор;
  • БЦАА;
  • другие.

Глютамин улучшает состояние иммунитета и способствует ускорению набора мышечной массы. БЦАА замедляют процесс катаболизма, а бромелайн и папин облегчают усвоение повышенных порций белка.

Syntha 6 от BSN – протеин, который удовлетворит как новичков, так и профессионалов. Сбалансированный состав и качественный белок помогут достичь любых целей в тренажерном зале.

Chaos and Pain Cannibal Cronus

Известный производитель спортивного питания Chaos and Pain сделали протеин Cannibal Cronus, который выгодно выделяется своим разнообразием белка в составе. Компания решила не ограничиваться стандартным сывороточным протеином, и добавила в состав еще и яичный, мясной, гороховый и пшеничный белки. Каждый компонент будет отвечать за свои задачи и покрывать отдельные потребности. Подобный союз способен выдать максимально эффективный результат!

Белок – это строительный материал мышечной массы. Увеличив количество потребляемого протеина (в разумных пределах), ускорится процесс наращивания мышечных волокон.

В сфере бодибилдинга уже не первый десяток лет спорят о лучшем источнике для получения белка. Точного ответа нет. Но можно с уверенностью заявить, что разная скорость усвоения белков в составе одного коктейля только улучшит конечный результат!

Состав

В одной порции (29 г):

  • Белок – 22 г;
  • Жиры – 1,5 г;
  • Углеводы – 4г;
  • 124 калории;
  • другие компоненты (среди которых: Витамины группы А и С, кальций, и др.).

Главной целью данного продукта является скорейшее восстановление организма после тренировочного стресса.

Syntrax Matrix 5.0

Уже долгие годы один из лидеров в сегменте комплексных протеинов. После появления на рынке он стремительно завоевал популярность среди опытных спортсменов со всех уголков мира. Главный принцип компании Syntrax: использовать составляющие высочайшего качества. Производитель не приемлет дешевые формы протеина, к которым часто прибегают конкуренты. Этот факт обусловил лояльность и любовь потребителя.

Формула Матрикс 5. 0

Уникальная формула Матрикс 5.0 включает в себя следующие основные компоненты:

  • сывороточный белок;
  • молочный;
  • яичный;
  • глютамин;
  • мицеллярный казеин.

Сывороточный протеин – бессменный лидер среди белковых добавок. Его качество, эффективность и высокий анаболический отклик доказан не одной группой учёных.

Молочный протеин – отличается от сыворотки только скоростью усвоения (у молочного – она ниже).

Яичный протеин – белок с идеальным аминокислотным составом и высоким показателем скорости усвоения.

Глютамин – аминокислота, которая поддерживает тело в тонусе и повышает работоспособность.

Мицеллярный казеин – медленный белок, который будет равномерно расщепляться в течение 6-7 часов после приёма.

Состав

В одной порции (32 г):

  • Белок – 23 г;
  • Жиры – 2 г;
  • Углеводы – 3 г;
  • другие витамины, минералы и полезные вещества.

Заключение

Комплексные протеины – отличный способ восполнить недостаток белка в суточном рационе питания. Одна порция добавки не только моментально снабдит Вас аминокислотами, но и растянет период полезного действия на длительный промежуток. В это время Вы можете не беспокоится о том, что организм не будет получать необходимых веществ. Многокомпонентный протеин обо всём позаботится за Вас!

Что такое комплексный протеин, как принимать композитный протеин?

Что такое комплексный (многокомпонентный) протеин? Как принимать многокомпонентный протеин? Состав комплексного протеина. Плюсы и минусы данного комплекса.

Комплексный (многокомпонентный) протеин – это смесь из ингредиентов, в которые входят быстрый протеин и медленный. Комплексный протеин является одним из лучших протеинов, как для набора массы, так и для прорисовки красивого рельефа. Быстрый протеин расщепляется на аминокислоты около 30-40 минут, он отличный строительный материал для роста мускулатуры. Медленный протеин расщепляется 6 – 10 часов, чем постоянно подпитывает мышцы белком.

Как принимать композитный протеин? Как и говорилось, он одинаково хорош, для тех, кто хочет набрать массу, так и скинуть лишний вес, спалить жировую прослойку. Результат зависит от способа употребления протеинового коктейля. Если вы собираетесь принять коктейль перед тренировкой, сделайте это не менее чем за 3 часа до занятий в зале. При употреблении коктейля перед тренировкой следует знать, что быстрые белки организм усвоит сразу, а вот медленные через 6 часов. Такое состояние может немного повлиять на ход тренировки, у вас будет чувство, что вы только что поели. Так что не забудьте, что принимать коктейль нужно не менее чем за 3 часа до тренировки, чтобы он как можно лучше усвоился организмом, для максимального эффекта.

Кто хочет набрать мышечную массу, продукт стоить пить перед сном. Быстрый протеин сделает своё дело и подпитает мышцы необходимым количеством белка после тренировки. Медленный во время вашего сна будет давать мышцам тот белок, который нужен для роста. А для тех, кто хочет добиться красивого рельефа, тем нужно принимать продукт между приёмами пищи и на ночь медленный казеиновый протеин. Пейте комплексный протеин, между приёмами пищи он насытит ваш организм нужным количеством белка. Быстрый белок расщепится за 40 минут после приёма, а медленные белки будут строить ваше тело все оставшееся время. Когда это будет нужно вашему организму.

Состав данного комплекса. В состав, как и писалось выше, входят быстрые белки, это яичный, сывороточный, концентраты белков. Это те белки, которые усваиваются нашим организмом в течение 40 минут. Медленные белки это смеси казеинового белка, ещё относят сюда и соевый протеин, он тоже обладает долгой усвояемостью в организме. Также в данный протеин входят комплекс минералов и витаминов, а также ферменты. Пищивые ферменты помогают расщеплять белки для лучшей усвояемости.

Плюсы и минусы. Минусов по сути всего один — это то, что в комплексе быстрый белок замедляет расщепление медленного. А вот плюсов намного больше. Многокомпонентный протеиновый коктейль даёт вашему организму на протяжении всего дня и ночи необходимое количество белка, что приводит к очень сильному прогрессу роста мышц. Принимая данный продукт, вы сразу увидите, что ваш выбор был сделан в правильную сторону. Сторону многокомпонентного протеина. Принимайте комплексный многокомпонентный протеин, и вы окажетесь на ступень выше к идеалу вашей фигуры.

Многокомпонентный протеин

Очень многие спортсмены употребляют высокобелковые смеси для компенсации дефицита аминокислот

Очень многие спортсмены употребляют высокобелковые смеси для компенсации дефицита аминокислот, необходимых для роста и развития качественной мускулатуры.

Как протеин может помочь росту мышц?

Протеины — это самые важные компоненты для мышечной массы, позволяющие осуществить тренировку на более высоком уровне, потому как они повышают выносливость, когнитивную активность и ускоряют восстановление. Протеины делятся на два типа — на основе растительных или животных белков быстрого либо медленного усвоения. Конечно, логичнее приобрести одновременно несколько упаковок с разными смесями, но далеко не всем спортсменам это удобно как в применении, так и для финансовой стороны, исходя из этого, самым оптимальным вариантом белкового спортивного питания считаются комплексные добавки.

Многокомпонентный протеин — что это такое и как выбрать?

Основной особенностью многокомпонентного протеина является то, что он изготовлен из нескольких видов белка и чаще всего, в него включены матрицы компонентов с различной скоростью абсорбции:

Сывороточный белок, который обеспечивает сиюсекундный анаболический отклик. В основном, это сывороточный изолят или многокомпонентный протеин сыворотки — изолированная, гидролизованная и концентрированная вытяжки.

Яичный альбумин. Замечательно усваивается и в таблице скорости абсорбции, находится на промежуточной позиции между сывороткой и медленными белками. Казеин. Систематически транспортирует аминокислоты, и тем самым питает массу тела до 8 часов. Преимущественно выгоден многокомпонентный протеин для похудения, который в составе имеет казеинат кальция, поскольку он не только предотвращает мышечный катаболизм в период отдыха и отсутствия повседневного питания, но и снижает аппетит.

Соевый белок. Кроме адекватной цены, он имеет массу антиоксидантных свойств и характеризуется как медленная низкокалорийная добавка. Соевый белок подойдет почти для всех тренинг целей. Возможно применять многокомпонентный протеин для набора мышечной массы, для снижения веса, для возмещения расходов питательных элементов на силовых и высокоинтенсивных тренировках. Комплексные протеины не менее востребованы, чем другие белковые смеси. Довольно тяжело сказать, какой протеин лучше сывороточный или многокомпонентный, ведь, по сути, это два равноценных продукта спортивного питания. Главным отличием сывороточного протеина от многокомпонентного в том, что сывороточный протеин почти что сразу и полноценно восполняет белковый дефицит, даже после усиленной тренировки, а многокомпонентный протеин, подкрепляет мышцы и предоставляет антикатаболическую защиту на долгосрочное время.

Как пить много компонентные протеины?

Для того, чтобы многокомпонентный протеин оказал максимальную поддержку организму, необходимо понимать то, как употреблять спортивную добавку наиболее оптимально. Принимать смесь лучше всего за 2 часа перед занятиями в тренажерном зале. Тем самым, вы сможете обеспечить полноценный протеиновый заряд на всю тренировку. После занятия спортом, оптимальнее будет принять сывороточный продукт, потому как организм потребует высокое количество чистых быстрых ферментов, для насыщения белкового голода и активации роста мышечной ткани.

Для качественной защиты от катаболизма в период отдыха, советуют употреблять многокомпонентный протеин на ночь, перед сном. В поездке, либо на работе, довольно-таки часто приходится долго обходиться без пищи. Это время, в особенности негативно отражается на мышечной массе, которая не получает требуемой подпитки для роста, энергообмена и восстановления. Поэтому целесообразно также принимать многокомпонентный протеин между приёмами питания, если Вы уверены, что следующий приём пищи будет не скоро.


Разбор многокомпонентного протеина.

  Многокомпонентный протеин — это несколько видов белка, которые смешали в один продукт. Делается это для того, чтобы с одной стороны повысить биологическую ценность (у многокомпонентного протеина она действительно выше чем у однокомпонентного) за счет разнообразия аминокислотных профилей, а с другой — для того, чтобы получить нужную скорость усвоения, обычно, среднюю между сывороточным (быстрым) и казеиновым (медленным). И если быстрый протеин оптимален после тренировки, а медленный — на ночь, то многокомпонентный — это лучший вариант, если Вам нужен белок между приемами пищи или как дополнение к этим приемам-перекусам. Хотя современные исследования белковых добавок демонстрируют преимущество многокомпонентного протеина (над сывороточным) и в случае послетренировочного приема, смесь сывороточного и казеинового белка давали бОльший анаболический отклик при приёме после тренировки, нежели только сывороточный или только казеиновый протеин. В том числе, на основе результатов этих исследований PeScience (один из новых производителей) создал свой современный продукт, который мы коротко обсудим ниже.

  «Многокомпонентник» — идеальный выбор для тех, кто не хочет заморачиваться несколькими видами протеиновых продуктов, а хочет просто приобрести одну банку. Кроме этого, для многих из нас именно многокомпонентник будет оптимальным ночным протеином (только выбирать его следует правильно и это мы тоже обсудим ниже), так как смешивается он гораздо лучше казеина (последние несколько месяцев я просто добавлял к скупу казеина пол скупа изолята — это волшебным образом значительно упрощает смешивание, пока не взял себе многокомпонентный протеин с аналогичным составом), пьется легче и, как правило — вкуснее. Так же именно мнокогомпонентные протеиновые продукты часто используют люди, которые не занимаются спортом — в качестве дополнительного источника белка высокой биологической ценности и/или заменителя питания.

  Но многокомпонентные протеины бывают очень разные по составу, а значит и свойствам, поэтому следует обязательно обращать как на количество разных видов белка, так и на очередность с которой они указаны в составе (чем ближе к началу, тем больше данного вида белка в смеси, процент белка и другие приоритетные для Вас моменты (количество углеводов и жиров, наличие лактозы, холестерина и тп). Если Вам нужен «ночной многокомпонентник», то ищите продукты где доминирует молочный (в идеале изолят молочного белка) или чистый казеиновый протеин, например, тот самый высокотехнологичный и современный протеиновый продукт от бренда PeSciense белковая матрица которого состоит из изолята молочного белка (80% данного вида белка — мицелярный казеин, а 20% — сывороточный), сывороточного белка и пептидов лейцина. При этом лейцин добавлен в состав так же как дань результатам исследований, установившим его «тригерный» (для запуска анаболизма) уровень, который желательно поддерживать с каждым приемом пищи или добавок (поэтому имеет смысл оптимизировать свой рацион BCAA или просто лейцином). Такой продукт будет оптимален на диете в качестве замены вечернего приема пищи (женщины часто испытывают в этом потребность) или просто как один из источников белка, так как насыщает гораздо лучше сывороточного протеина. Минусом такого продукта является его высокая цена, которую приходится платить за великолепный состав и вкус. Поэтому если Ваш бюджет ограничен, то как достойный вариант рекомендую рассмотреть Complex Protein от LevelUp, хотя его уже нельзя назвать «медленным многокомпонентником», так как доминирующий вид белка — сывороточный, как и у другого популярного протеина — Combat от MusclePharm. Такой продукт отлично подойдет в качестве послетренировочного, утреннего и дневного (между приемами пищи) коктейля.

  Это далеко не все многокомпоненные протеины в нашем ассортименте (у нас их больше 10-ти видов), поэтому при выборе не стесняйтесь консультироваться у специалистов в наших розничных магазинах:

в Нижневартовске — ул.Ленина, 15, тел.: (3466) 636-950.
в Сургуте — ТРЦ «Агора», ул. Профсоюзов, 11, тел.: (3462) 749-350
в Когалыме — улица Дружбы Народов, дом 60, СКК «Галактика», 1-ый этаж


  P.S. Не рассматривайте сывороточные протеины из смеси изолята и концентрата или изолята и гидролизата, как многокомпонентный протеин. Яркий пример — Whey Gold Standard от Optimum Nutrition. Несмотря на то, что в составе производителем заявлено две формы белка — изолят и концентрат, оба они одного вида — сывороточного. И концентрат в составе — это просто способ удешевить себестоимость для производителя и стоимость на полке для покупателя. Ведь чистый изолят стоит значительно дороже (сырье отличается по цене в 1,5-1,7 раза), но то, что в составе Голда чуть-чуть больше изолята позволяет написать на банке whey protein isolate primary source (мол, изолят у нас основной источник белка), но биологическую ценность это не повышает (один вид белка), как и скорость усвоения не меняется (протеин остается быстрым).

Комплексный протеин — SportWiki энциклопедия

Протеиновый комплекс (зеленая кривая)

Домашний протеиновый коктейль

Комплексные протеины — это смесь различных видов протеина, которая обеспечивает пиковую концентрацию аминокислот в ближайшее время после приёма, в то же время медленно усваиваемые белки обеспечивают продолжительное питание мышц.

Составляющие протеиновых комплексов[править | править код]

Читайте основную статью: Виды протеина по происхождению

Установлено, что казеин всасывается медленнее, чем сывороточный белок, постепенно повышая концентрацию аминокислот в крови и удерживая её на достаточно высоком уровне в течение 6—8 часов. Такое свойство делает казеин долгосрочным источником белка, поддерживающим высокую концентрацию аминокислот в крови в течение всего дня, однако рост мышц вызывает именно пиковый подъём концентрации, поэтому данное свойство полезно только в ночное время или при редком питании.

Сывороточный белок, в отличие от казеина, намного быстрее усваивается организмом, создавая мощный выброс аминокислот в течение короткого периода времени (30—40 мин) и вызывает максимальный анаболический отклик. Поэтому сывороточный протеин рекомендуют принимать до и после тренировки для предотвращения катаболизма мышечных белков.

Яичный протеин занимает промежуточную позицию, и так же хорошо комбинируется с сывороточным белком. В отношении биологической ценности, коэффициента эффективности, аминокислотного скора — это превосходная смесь, которая будет насыщать кровь сразу после тренинга за счёт сывороточного белка, а затем поддерживать высокую концентрацию аминокислот благодаря яичному белку.

Смесь из трёх вышеперечисленных белков совмещает в себе все положительные качества и нивелирует недостатки каждого входящего в состав протеина.

Соевый белок наиболее совместим с сывороточным, который устраняет недостатки первого. Допустима комбинация соевого белка и яичного, но чаще всего в таком случае в состав входят и казеин и сывороточный белки.

Иногда комплексные протеины относят к медленным протеинам, так как они в своём составе содержат медленно усваиваемые белки.

Кому требуется комплексный протеин[править | править код]

Комплексные протеины рекомендуется применять как при наборе мышечной массы, так и при снижении веса и работе на рельеф, однако исследования говорят о том, что лучший эффект достигается при использовании сывороточного протеина вне зависимости от спортивных целей.

При наборе мышечной массы

Идеальное время приёма комплексного протеина — перед сном, это позволит обеспечить мышцы аминокислотами в течение всей ночи. Также его можно употреблять вместо сывороточного за 2 часа до тренировки для пополнения аминокислотного пула. После тренировки лучше принимать быстрый протеин. Кроме того, вы можете принимать комплексный белок перед длительными периодами без пищи. Так, например, если вы знаете, что не сможете поесть в ближайшие несколько часов, то обязательно выпейте порцию (30 г) комплексного протеина.

При похудении

Режим приёма примерно такой же как и во время набора массы: перед сном, и перед длительными периодами без приёма пищи. Кроме того, комплексный протеин может заменять 1-2 приёма пищи. Порции при похудении в два раза меньше — около 15 г или 1/2 стандартной порции.

Читайте основную статью: Расчет дневной потребности в белке

Читайте основную статью: Оптимальное время приема протеина

В сравнительных исследованиях было показано, что максимальными анаболическими и термогенными свойствами обладает сывороточный белок, поэтому добавление в состав продукта других видов протеина может ухудшить его анаболические качества. Более того, West DW и Burd NA в 2011 году окончательно доказали, что рост мышц напрямую зависит от скорости усвоения. Чем выше скорость усвоения, тем больше темп роста мышц.[1]

К тому же производители очень часто добавляют в состав большие количества соевого белка с очень низкой себестоимостью, который имеет довольно много недостатков.

Лучшие комплексные протеины[править | править код]

  • Syntha-6 от BSN — очень неплохое соотношение цена/качество, не самый удачный выбор по процентному содержанию белка (всего 50% — 22 гр. на порцию 44 гр.). Имеет великолепный вкус. Самый популярный комплексный протеин.
  • Matrix от Syntrax — отличное соотношение цена/качество, доступный и эффективный комплексный протеин.
  • Combat Powder от MusclePharm — качественный продукт, содержит в своём составе разные виды белка, однако имеет средние вкусовые качества.
  • Protein 80 Plus от Weider — качественный четырёхкомпонентный протеин. Явный минус — завышенная стоимость.
  • Elite 12 Hour Protein от Dymatize — бюджетный вариант, один из самых недорогих белков, имеет плохой вкус и растворимость.
  • Professional Protein от Power System — отличное соотношение цена/качество, содержит 5 видов белка. Качественный комплексный протеин по невысокой цене.
  • Probolic-SR от MHP — пожалуй, самый лучший по вкусовым качествам комплексный белок из всех. Однако, ощутимая переплата за бренд и соя в составе сдвигают его вниз.

Приобретение

  1. ↑ West DW, Burd NA. Rapid aminoacidemia enhances myofibrillar protein synthesis and anabolic intramuscular signaling responses after resistance exercise. Am J Clin Nutr. 2011 Sep;94(3):795-803. Epub 2011 Jul 27.

Протеин комплексный: достоинства и недостатки

Что может быть лучше хорошего качественного белка? — Смесь из трех, четырех или более видов различного белка (протеина)! Именно этой идеей руководствуются производители спортивных добавок при выпуске комплексного (многокомпонентного) протеина. О его особенностях мы поговорим в данной статье.

Что может быть лучше хорошего качественного белка? — Смесь из трех, четырех или более видов различного белка (протеина)! Именно этой идеей руководствуются производители спортивных добавок при выпуске комплексного (многокомпонентного) протеина.

На данный момент специализированные комплексные протеиновые смеси пользуются огромной популярностью. Сегодня мы поговорим об их преимуществах и недостатках.

Согласно заявлениям производителей, комбинация различных видов белка позволяет наделять добавку новыми свойствами. Считается, что эффекты комплексного протеина объясняются общим синергетическим эффектом, т.е. сумма белков оказывает более заметное действие, нежели каждый из них при отдельном употреблении.

Свойства комплексного протеина

  • Длительное усвоение;
  • Большой выброс аминокислот в кровь за единицу времени;
  • Обладает полноценным аминокислотным составом;
  • Практически не вызывает аллергических реакций;
  • Содержит лишь небольшое количество лактозы;
  • Зачастую комбинируется с витаминами и минералами;
  • Может служить практически полноценной заменой белковой пище.

Состав комплексного протеина
Не секрет, что казеин усваивается медленнее любой сыворотки, а яичный и говяжий протеин обладают средней скоростью усвоения. Выяснилось, что смешивание таких видов белка ведет к общему синергическому эффекту, оказываемому на организм в целом, и на уровень аминокислот в частности.

Происходит уникальная реакция: белок усваивается длительное время и при этом заметно повышает количество амино-молекул в крови, что ведет к ускорению синтеза белка. Можно с уверенностью сказать, что именно комплексный протеин удерживает положительный азотистый баланс лучше и дольше других протеиновых добавок, особенно если речь идет о качественном комплексе от именитого бренда.

Сывороточный белок усваивается намного быстрее других видов белка, но в то же время пик выброса аминокислот при этом относительно невелик – не более 30 минут. Казеин усваивается гораздо дольше, но не создает достаточного притока амино-молекул. На фоне таких добавок комплексный протеин является идеальным решением, однако в каждой бочке меда есть ложка дегтя.

Недостатки комплексного протеина С большим сожалением мы должны признать тот факт, что вся индустрия спортивного питания управляется маркетингом. Зачастую производитель преследует собственную выгоду, а не интересы покупателей. Так, во многих комплексных белковых добавках мы видим скудный состав.

Некоторые компании добавляют в них низкоэффективный соевый белок, уменьшают количество сывороточного протеина, или же стараются заполнить добавку бесполезными компонентами, дабы повысить итоговую стоимость продукта. Все это отталкивает атлетов, вследствие чего они приобретают обыкновенную сыворотку или казеин.

На данный момент на рынке спортивных добавок не так много качественных комплексных продуктов. Пожалуй, одним из лучших можно назвать Syntha-6 от BSN, который позиционируется в качестве заменителя пищи, а не белковой добавки.

Производитель использует особую технологию фильтрации, что позволяет добавлять к смеси протеинов различные вещества, витамины и ферменты. Именно этот комплексный протеин занимает лидирующие строчки во всех офлайн и онлайн магазинах. В то же время следует отметить, что его эффективность при наборе мышечной массы никоим образом не превосходит обыкновенный изолят сывороточного белка.

Помимо этого тень на эффективность комплексного протеина отбрасывают несколько научных исследований, результаты которых косвенно доказывают, что общий положительный эффект протеиновой добавки на процессы набора мышечной массы зависит лишь от скорости усвоения аминокислот. Именно поэтому аминокислотные добавки оказывают более выраженный эффект, но разумеется, только при соизмеримых с обыкновенным протеином дозировках.

Итоги
Принимать комплексный протеин можно как при наборе мышечной массы, так и при похудении. Стоимость такой добавки, как правило, ниже, чем у изолята или гидролизата сыворотки. В то же время по сумме положительных характеристик комплексный белок превосходит яичный, говяжий или казеин. Именно поэтому он пользуется такой популярностью.

При выборе добавки данного вида всегда обращайте внимание на белковый состав продукта. Помните: первым указывается тот компонент, количественная масса которого в разы превосходит другие ингредиенты. То есть, если вы видите следующую строчку: «соевый белок, сывороточный изолят, казеин, яичный альбумин», то это означает, что в этой добавке соевый белок занимает львиную долю от всей белковой массы. Такой добавки следует избегать. То же правило работает при выборе гейнеров.

Почему стоит попробовать универсальный многокомпонентный протеин?

Белки на больше, чем просто , важные для человеческого организма. Они являются краеугольным камнем клеток тела и мышечных волокон и играют важную роль в восстановлении и регенерации клеток, мышц, внутренних органов и тканей. Однако, что очень важно, они также поддерживают роста мышц, процессов .

Дело в том, что тело само по себе может производить белки, , но только если для этого достаточно аминокислот . Однако наше тело не может производить аминокислоты в одиночку, и поэтому мы должны получать их с пищей. Но для спортсменов это совершенно невозможно , и поэтому они обычно выбирают добавки в виде протеиновых пищевых добавок.

Протеиновые пищевые добавки содержат значительно высокое количество белка , при этом является самой низкой возможной концентрацией жиров и углеводов. Однако на рынке существует множество видов белков, и может оказаться трудным выбрать лучший из них. По этой причине мы написали статью о том, как выбрать протеин, чтобы проинформировать вас, как правильно выбрать протеин на основе вашей фитнес-цели . В этой статье, однако, мы рассмотрим — это конкретный тип белка, , а именно многокомпонентный белок, который, вероятно, является наиболее распространенным продуктом на рынке и может быть более полезным для вас , чем один сывороточный белок. , соевый белок или казеин.

Что такое многокомпонентный белок?

Многокомпонентный белок, как следует из названия, представляет собой пищевую добавку, которая состоит из нескольких различных источников белка в различных процентах.Вот почему этот тип белка также известен как универсальный белок . Его самым большим преимуществом является то, что сочетает в себе положительные эффекты всех источников белка в одном продукте. [1]

Преимущества многокомпонентного протеина

Многокомпонентный белок обычно содержит белки с высокой биологической ценностью , а также с широким спектром аминокислот. Он положительно влияет на кости, поддерживает мышечного роста и помогает поддерживать мускулатуру.[1] [3]

К его достоинствам можно отнести хорошую впитываемость и обычно доступную цену. Однако это может быть труднее переваривать, потому что все его компоненты имеют разное время распада и абсорбции. Большинство его эффектов зависит от состава объединенных источников белка . Следовательно, при выборе многокомпонентного белка важно проверить представление отдельных элементов , из которых получены положительные эффекты многокомпонентного белка.[2] [3]

Состав многокомпонентного белка

Как упоминалось выше, многокомпонентные белки состоят из белков нескольких типов. Это комбинация сывороточного, казеинового, яичного, бычьего или других белков. Давайте представим 5 самых распространенных компонентов универсального белка.

Сыворотка и казеин — это два вида белков, которые получают из молока. Добавление осаждающего агента отделяет от казеинового компонента , который составляет 80% и 20% сыворотки, , который является водорастворимой частью молока и многие годы считался отходом. Сыворотка и казеин являются отличными источниками белка. Однако они имеют различных характеристик и по-разному обрабатываются производителями. [3]

1. Сывороточный протеин

Преимущество сывороточных белков заключается в их быстрой растворимости по сравнению с другими типами белков. В то же время сыворотка снабжает мышцы большим количеством аминокислоты L-цистеина, которая может уменьшить симптомы старения, а также диабета.[3] Другим компонентом сывороточного протеина являются альфа-лактоглобулины, бета-лактоглобулины, иммуноглобулины, говяжий альбумин BSA и более мелкие компоненты, такие как минералов — кальций, калий, натрий, фосфор, фолиевая кислота, биотин и витаминов A. , C, B1, B2, B3, B5 и B12. [5]

Сывороточный протеин состоит из аминокислот, которые организм использует для роста и регенерации мышечных тканей. Сывороточный протеин также богат аминокислотами BCAA, особенно лейцином, который стимулирует синтез белка в скелетных мышцах.Однако сывороточный протеин является отличным и комплексным источником всех 9 незаменимых аминокислот . [5] Мы различаем три типа сывороточных белков, и в следующих параграфах мы обсудим их различия.

Концентрат сыворотки

Концентрат сыворотки содержит около 70-80% белка, , в то время как он имеет самую высокую долю лактозы, жиров и углеводов из всех сывороточных белков, которые составляют оставшиеся 20-30% концентрата сыворотки.[5]

Хотя концентрат сыворотки содержит на меньше белков на на дозу, чем изолят сыворотки, он может содержать более ингредиентов молока высокого качества. Honest сывороточный концентрат содержит более высоких доз факторов роста, фосфолипидов, а также конъюгированную линолевую кислоту CLA, которая стимулирует расщепление жиров и увеличивает процент мышечной массы. [5]

Изолят сыворотки

Изолят сыворотки практически не содержит лактозы, жиров и углеводов и, следовательно, содержит от 90 до 95% белка. Это один из самых быстро усваиваемых белков и подходит для людей, которые придерживаются низкоуглеводной диеты и пытаются на снизить массу тела. Изолят сыворотки — это хороший белок до или после тренировки , который может дополнять питательные вещества, необходимые мышцам для достаточной регенерации. [6]

Гидролизат сыворотки

Гидролизат сыворотки — это сывороточный белок лучшего качества, что также отражается на его цене. Следовательно, это большое преимущество, если ваш многокомпонентный белок содержит гидролизат сыворотки.Это, вероятно, будет стоить меньше, чем один гидролизат, но даст вам свои преимущества. К ним относятся, в частности, сверхбыстрого впитывания в течение одного часа после использования, что обеспечивается составом гидролизата. [5] [6]

Он содержит ферментативно переваренных аминокислот , которые легко усваиваются и хорошо растворимы. Он содержит белка, , содержание более 90%, и содержит только минимальное количество жиров, углеводов и лактозы.[6]

2. Казеин

Казеин, как упоминалось выше, представляет собой белок , полученный из молока. Однако по сравнению с сывороточным протеином казеин содержит на меньше BCAA и больше аминокислот, таких как гистидин, метионин и фенилаланин. В его составе мы также можем найти несколько биоактивных пептидов, которые поддерживают иммунитет и пищеварительную систему, , а также положительно влияют на снижение артериального давления. Казеин богат минералами, такими как железо и кальций, , которые влияют на рост силы и крепкие и здоровые кости.[8] [9]

Казеин также известен как ночной белок, потому что это отличная пищевая добавка перед сном . Поскольку он всасывается медленно ( около 5-7 часов ), он обеспечивает организм достаточным количеством белка на всю ночь, и, как вы знаете, мышц растут не в спортзале , а в процессе регенерации. Еще одно преимущество казеина в том, что он содержит много глютамина, который способствует регенерации и наращиванию мышц. [6] Вы можете прочитать обо всех эффектах глутамина в статье.

Исследования подтверждают, что идеальный выбор — объединить эффекты сывороточного протеина и казеина, , который предлагается как многокомпонентный протеин. Опрос, проведенный на группе мужчин, подтвердил преимущества употребления смеси сывороточного протеина с казеином. Мужчины, участвовавшие в опросе, принимали многокомпонентную смесь за час до тренировки и сразу после нее. Исследование длилось 10 недель , и результатом стало то, что комбинация казеина и сывороточного протеина привела к большему увеличению мышечной массы, силы и анаболических гормонов. [10] Другое исследование также подтвердило влияние казеина вместе с сывороткой на лучший рост мышечной массы на и больший объем мышечной ткани. [11]

3. Соевый белок

Соевый белок является одним из растительных белков и обычно предпочитается веганами , которые не употребляют молочный белок. Однако соевый белок на так же эффективен, как и белков животного происхождения. Соя — единственный растительный источник, который содержит всех незаменимых аминокислот, а также BCAA.В то же время соевый белок содержит глютамина, , который ускоряет регенерацию мышц, а также аргинин, который помогает расширять кровеносные сосуды, так что питание может попадать непосредственно в мышцы. Подробнее об эффектах аргинина читайте в статье. [12] [13]

Одним из преимуществ сои является то, что она способствует здоровому уровню холестерина за счет содержащихся в ней изофлавонов. В то же время он увеличивает выработку гормонов щитовидной железы, помогая ускорить обмен веществ, что, в свою очередь, приводит к ускоренному сжиганию жира.[13]

Изолят соевого белка представляет собой форму, в которой соевый белок продается как белок. Его получают путем обработки концентрата для удаления большей части жиров, углеводов и других факторов, которые могут вызвать метеоризм. [13] В результате соевый белок хорошо расщепляется и поэтому быстро всасывается. Изолят сои следует принимать до и после тренировки или в любое время дня в качестве добавки к белку. Он не подходит в качестве ночного протеина, потому что быстро усваивается .[6]

Давайте также посмотрим, что говорят эксперты. В одном исследовании говорится, что соя является источником более низкого качества для быстрого синтеза белка, чем сывороточный белок, но — лучший источник для синтеза белка, чем казеин. Это означает, что влияние соевого белка на синтез белка составляет где-то между сывороточного белка и казеина. Исследования пришли к выводу, что это связано с уровнем переваривания или содержанием лейцина . [14] Но не расстраивайтесь! Действительно, соевый протеин в сочетании с молочным протеином оказался лучшим выбором для роста мышечной массы.Это было подтверждено исследованиями, в которых говорится, что соевый изолят в сочетании с молочными белками дает гораздо лучших результатов по синтезу белка, чем только сыворотка, казеин или соевый белок. [15]

4. Говяжий белок

Говяжий белок получен из говядины, из которой удалено жира и холестерина. Это качественный источник аминокислот BCAA и креатина, который помогает увеличить энергию в мышцах и поддерживает рост мышц.Белки говядины очень важны в питании спортсменов, особенно силовых атлетов, в основном из-за высокого содержания железа и витаминов группы В. Эти вещества способствуют лучшему использованию энергии и питательных веществ. [16]

С точки зрения удобства использования и усвояемости этот белок стоит на самом верху среди всех источников белка, что означает, что он проникает в мышечные клетки без каких-либо потерь. Не нагружает пищеварительную систему и сводит к минимуму общее время пищеварения. С этой точки зрения этот источник белка подходит для людей, которые хотят включить в свой рацион очень большое количество высококачественных белков, а также для всех, у кого трудности с перевариванием белков , содержащихся в обычных протеиновых добавках. . Он подходит в качестве протеина для завтрака, а также в качестве протеина перед и после тренировки. [16] [17]

Изолят говяжьего протеина — это форма добавки, которая востребована спортсменами, особенно перед соревнованиями, когда организм производит меньше тестостерона, что значительно влияет на поддержание мышечной массы и силы. Это также подтверждается исследованием, которое показало, что говяжий белок может стимулировать значительное увеличение синтеза мышечного белка . [18]

5. Яичный белок или яичный альбумин

Яичные белки — отличный источник альбумина и, следовательно, отличный источник важного белкового компонента. Из всей пищи яйца являются наиболее идеальным источником высококачественных быстро распадающихся белков. У них отличный аминокислотный профиль, который поддерживает наращивания мышечной массы .[6]

Яйца являются продуктом животного происхождения и, следовательно, являются сложным источником белка , содержащего все незаменимые аминокислоты, которые организм не может создать самостоятельно. Кроме того, яичный белок стоит на втором месте, на после сывороточного белка, по содержанию лейцина. Лейцин — это аминокислота с разветвленной цепью BCAA, которая значительно улучшает здоровье мышц. [19]

Яичный белок или яичный альбумин подходит для людей, которые плохо переваривают молочный белок или имеют аллергию на молочные продукты.В то же время многие многокомпонентные белки содержат яичный альбумин из-за его положительных свойств и потому, что его можно употреблять в любое время дня . [6]

Для кого нужен многокомпонентный белок?

Многокомпонентный белок подходит для всех людей, активно занимающихся спортом, любых упражнений, бодибилдинга или просто физически занятых. Как и другие типы белков, он помогает восстанавливать уставшие и напряженные мышцы, оптимизирует снабжение клеток питательными веществами, предотвращает катаболизм, означает, что предотвращает потерю активной мышечной массы, но также способствует формированию и росту мышц. масса.Эти многокомпонентные белковые функции востребованы всеми спортсменами без исключения.

Когда мне следует использовать многокомпонентный белок?

Многокомпонентные белки можно употреблять в течение всего дня. Их можно использовать даже во время диет для снижения веса , поскольку они содержат минимум углеводов и жиров. Поскольку они состоят из разных источников белка в разном процентном соотношении, многокомпонентные белки являются универсальными . Это означает, что вы можете принимать их утром, до, после тренировки или даже перед сном. В то же время они часто обогащены другими аминокислотами, витаминами и минералами, которые полезны для восполнения пробелов в питании и улучшения общего состояния здоровья организма.

Оптимальная суточная доза многокомпонентного протеина

Суточная доза протеина зависит как от ваших целей в фитнесе, так и от вашего веса. Однако он начинается с части 0.8 граммов белка на килограмм веса. Но для большинства людей этого недостаточно, особенно спортсменам необходимо принимать более доз белка. Если вашей целью является рост мышц и вы активно тренируетесь, дневная доза многокомпонентного белка должна составлять около 1,4-3,3 г / кг веса, для снижения веса при регулярных тренировках вам необходимо принимать 2,2- 3,3 г / кг веса. Мы рекомендуем вам потреблять около от 20 до 25 граммов многокомпонентного белка на порцию.[20] [21] Подробнее о дозировке протеина читайте в статье о правильном времени и оптимальной дозировке протеина.

Теории и исследования основываются на комбинациях различных типов белков, но нам интересно ваше мнение. Каков ваш опыт работы с многокомпонентным белком? Напишите нам , какие эффекты многокомпонентного протеина вы наблюдали на себе и что вам больше подходит, многокомпонентный или однокомпонентный протеин. Если вы найдете эту статью полезной, мы были бы рады, если бы вы могли поддержать ее, поделившись ею.

Источники:

[1] Многокомпонентный белок — https://www.body-attack.com/protein-multi-component.html

[2] Типы сывороточного протеина — http://wheyproteininstitute.org/facts/wheyproteintypes

[3] Сывороточный протеин — https://examine.com/supplements/whey-protein/

[4] Хьюго Ривера — Все, что вам нужно знать о различных протеиновых добавках! — https://www.bodybuilding.com/fun/all_about_protein.htm

[5] Крисси Кендалл — Ваш экспертный справочник по сывороточному протеину — https: // www.bodybuilding.com/content/your-expert-guide-to-whey-protein.html

[6] Мэтт Велк — Какой протеин лучше всего подходит для вас? 7 форм разбиваются! — https://www.bodybuilding.com/content/protein-types-best-for-you.html

[7] Гэвин Ван Де Валле — В чем разница между казеином и сывороточным протеином? — https://www. healthline.com/nutrition/casein-vs-whey

[8] Агнес А. Фекете, Д. Ян Гивенс, Джули А. Лавгроув — Лактотрипептиды, полученные из казеина, снижают систолическое и диастолическое артериальное давление в метаанализе рандомизированных клинических испытаний — https: // www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4303860/

[9] Д. П. Моханти, С. Мохапатра, С. Мисра, П. С. Сау — Биоактивные пептиды, полученные из молока, и их влияние на здоровье человека — https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4992109/

[10] Уиллоуби Д.С., Стаут Дж. Р., Уилборн С.Д. — Влияние тренировок с отягощениями и добавок протеина плюс амиокислоты на анаболизм мышц, массу и силу. —

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16988909

[11] Андерсен Л.Л., Туфекович Г., Зебис М.К., Крамери Р.М., Верлан Г., Кьяер М., Суетта С., Магнуссон П., Аагаард П. — Влияние тренировок с отягощениями в сочетании с своевременным приемом белка на размер мышечных волокон и мышечную силу. —

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/156

[12] Протеиновые коктейли: они вам нужны? — https://www.webmd.com/diet/protein-shakes

[13] Эми Гудсон — Соевый белок: хорошо или плохо? — https://www.healthline.com/nutrition/soy-protein-good-or-bad

[14] Тан Дж. Э., Мур Д. Р., Куйбида Г. В., Тарнопольский М. А., Филлипс С. М. — Прием гидролизата сыворотки, казеина или изолята соевого белка: влияние на синтез смешанного мышечного белка в состоянии покоя и после упражнений с отягощениями у молодых мужчин.-

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19589961

[15] DN Butteiger, M. Cope, P Liu, R. Mukherjea, E Volpi, BB Rasmussen, ES Krul — Смесь сои, сыворотки и казеината расширяет постпрандиальный синтез протеина в скелетных мышцах — https: //www.ncbi.nlm.nih .gov / pmc / article / PMC4164044 /

[16] Роджер Локбридж — 47 фактов о белке, которые вы должны знать — https://www. bodybuilding.com/fun/which-protein-will-help-you.html

[17] Чад Керксик — Говяжий протеин или сывороточный протеин — что лучше? — https: // www.prosource.net/blogs/blog-1/beef-protein-vs-whey-protein-which-is-better

[18] Симонс ТБ, Шутцлер С.Е., Кок Т.Л., Чинкс Д.Л., Вулф Р.Р., Паддон-Джонс Д. — Старение не ухудшает анаболический ответ на богатую белком пищу. — https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17684218

[19] Дональд К. Лейман, Нэнси Родригес — Яичный белок как источник белка, силы и энергии — https://www.researchgate.net/publication/232241300

[20] Науки инженерной медицины — Белки и аминокислоты — https: // www.nap.edu/read/10490/chapter/1

[21] Сколько белка вам нужно в день? — https://examine.com/nutrition/how-much-protein-do-you-need/

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie.Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie.Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файлах cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Исследование многокомпонентных подходов для сайт-селективной конъюгации нативных белков

Препринт

, представленный 11.03.2020, 15:37 и опубликованный 12.03.2020, 05:34 Шарлоттой Сорней, Стивом Хессманном, Стефаном Эрбом, Игорем Довганом, Энтони Ehkirch, Thomas Botzanowski, Sarah Cianferani, Alain Wagner, Guilhem Chaubet

Сайт-селективная модификация белков была объектом интенсивных исследований в последние десятилетия, особенно в терапевтической области.Выдающиеся результаты были получены с рекомбинантными белками, для которых сайт-специфическая конъюгация стала возможной благодаря включению определенных аминокислотных остатков или пептидных последовательностей. В то время как мутантные белки находятся в центре внимания, нативные и природные белки остались в тени, а сайт-селективные методы их конъюгирования изучены недостаточно. Кроме того, хотя эти несколько методов дают хорошие результаты для белков малого и среднего размера, большинство из них, как правило, терпят неудачу при применении к более крупным конструкциям, таким как антитела. Чтобы устранить это ограничение, мы пришли к выводу, что стремление к одновременной конъюгации двух аминокислотных остатков должно дать более высокие шансы на разработку сайт-селективной стратегии по сравнению с подавляющим большинством существующих методов, которые нацелены исключительно на один остаток. Мы выбрали четырехцентровую трехкомпонентную реакцию Уги для реализации этой идеи с целью конъюгирования боковых аминовых и карбоксилатных групп двух соседних лизина и аспартата / глутамата. Здесь мы показываем, что эта стратегия может дать доступ к ценным конъюгатам, несущим несколько различных полезных нагрузок, и ограничивает потенциальные сайты конъюгации только шестью на модели антитела трастузумаба.

Финансирование

ANR-10-INBS-08-03

«Région Grand-Est» и «LabEx MEDALIS»

«Национальная ассоциация исследований и технологий» (ANRT) и Syndivia

История

Учреждение
Страсбургский университет

Страна
Франция

ORCID Для отправителя заявки
0000-0001-6462-5112

Декларация о конфликте интересов

Выберите Нет вариант

RefWorksBibTeXRef. managerEndnoteDataCiteNLMDC

(PDF) Симметрия, стабильность и динамика многодоменных и многокомпонентных белковых систем

связывает неродные промежуточные соединения сворачивания, чтобы способствовать правильному сворачиванию,

претерпевает значительные структурные изменения при связывании с

ATP и GroES, которые также являются гептамер (67, 68). Этот пример

подчеркивает важность мобильности, связанной с

стабильными и высокосимметричными биологическими системами.

Выводы

Роль симметрии в покоящихся или статических системах субъективно

приятна.Поэтому неудивительно, что внутренняя симметрия

была интуитивным обоснованием многих научных гипотез

. Модель симметрии Моно для кооперативности оказалась успешной благодаря этому подходу. Но природа не всегда

выбирает наиболее спокойный или гармоничный мотив в поисках движения в жизни. Молекулярные биологи должны обязательно рассмотреть китайские

бронзы, узоры Ранголи, рисунки Леонардо да Винчи и

гравюры Эшера; но им следует также рассмотреть «Творение» Микеланджело

, если они хотят понять жизнь и движение

на молекулярном уровне.

Мы благодарим профессора М. Виджаяна и доктора К. Сугуна за предоставление набора координат

структуры высокого разрешения комплекса лектин арахиса

(34) до публичного выпуска. Мы также благодарим докторов наук. Naga-

rajaram, Sowdhamini и Dhanaraj за предложения и комментарии по

рукописи. Все рисунки были подготовлены с помощью программы

SETOR (69). Это исследование поддержано Wellcome Trust.

1. Шульц, Г. Э. и Ширмер, Р.Х. (1979) Принципы структуры белка

. (Спрингер, Нью-Йорк).

2. Крейтон, Т. Е. (1993) Белки: структуры и молекулярные свойства.

erties. (Фриман, Нью-Йорк).

3. Влодавер, А., Миллер, М., Яскольски, М., Сатьянараяна, Б.К.,

Болдуин, Э., Вебер, ИТ, Селк, Л.М., Клоусон, Л., Шнайдер, Дж.

и Кент, SBH (1989) Science 245, 616–621.

4. Лапатто, П., Бланделл, Т., Хеммингс, А., Оверингтон, Дж., Уайлдер-

сприн, А., Wood, S., Merson, JR, Whittle, PJ, Danley, DE,

Geoghegan, KF, Hawrylik, SJ, Lee, SE, Scheld, KG &

Hobart, PM (1989) Nature (London) 342, 299–302.

5. Бак, Б., Лапатто, Л., Налини, В., Дриссен, Х., Линдли, П.Ф.,

Махадеван, Д., Бланделл, Т.Л. и Слингсби, К. (1990) Nature

( Лондон) 347, 776–780.

6. Хубер Р., Дайзенхофер Дж., Колман П. М., Мацусима М. и

Палм, В. (1976) Nature (Лондон) 264, 415–420.

7. Илик, С. Э., Рул, С. А., Картер, округ Колумбия, Гринхау, Т. Дж., Бабу,

Ю. С., Кук, В. Дж., Хабаш, Дж., Хелливелл, мл., Стоклер, Д. Д.,

Паркс, мл. RD, Chen, SF и Bugg, CE (1990) J. Biol. Chem.

265, 1812–1820.

8. Weis, M. S., Wacker, T., Weckesser, J., Welte, W. & Schulz, G. E.

(1990) FEBS Lett. 267, 268–272.

9. Frier, J. A. & Perutz, M. F. (1977) J. Mol. Биол. 112, 97–112.

10.Варгезе, Дж. Н., Лейвер, У. Г. и Колман, П. М. (1983) Nature

(Лондон) 303, 35–40.

11. Эмсли, Дж., Уайт, Х.Э., О’Хара, Б.П., Олива, Г., Сринивасан, Н.,

Щекотка, И.Дж., Бланделл, Т.Л., Пепис, М.Б. и Вуд, СП (1994)

Nature (Лондон) 367, 338–345.

12. Шрив А.К., Читам Г.М.Т., Холден Д., Майлз Д.А.А.,

Тернелл, В.Г., Воланакис, Дж. Э., Пепис, М. Б., Блумер, А. К. и

Гринхау, Т.J. (1996) Nat. Struct. Биол. 3, 346–354.

13. Ванденаккер, Ф., Сарфати, С., Твидди, Э. М., Коннелл, Т. Д.,

Холмс, Р. К. и Хол, В. Г. Дж. (1996) Структура 4, 665–678.

14. Blundell, T., Dodson, G., Hodgkin, D. & Mercola, D. (1972) Adv.

Protein Chem. 26, 279–402.

15. Бейкер, Э. Н., Бланделл, Т. Л., Катфилд, Дж. Ф., Катфилд, С. М.,

Додсон, Э. Дж., Додсон, Г. Г., Ходжкин, Д. М. К., Хаббард,

Р. Э., Иссакс, Н.W., Reynolds, C.D., Sakabe, K., Sakabe, N. &

Vijayan, M. (1988) Philos. Пер. R. Soc. Лондон сер. B 319,

369–456.

16. Теннент, Г. А., Батлер, П. Дж. Г., Хаттон, Т., Вулфитт, А. Р.,

Харви, Д. Дж., Радемахер, Т. В. и Пепис, М. Б. (1993) Eur.

J. Biochem. 214, 91–97.

17. Брейг, К., Отвиновски, З., Хегде, Р., Бойсверт, округ Колумбия,

Иоахимиак, А. , Хорвич, А.Л. и Сиглер, П.Б. (1994) Nature

(Лондон) 371, 578– 586.

18. Вильмсен, Х. У., Леонард, К. Р., Тичелаар, В., Бакли, Дж. Т. и

Паттус, Ф. (1992) EMBO J. 11, 2457–2463.

19. Паркер, М.В., Бакли, Д.Т., Постма, JPM, Такер, А.Д.,

Леонард, К., Паттус, Ф. и Церноглу, Д. (1994) Nature (Лондон)

367, 292–295 .

20. Лоу, Дж., Сток, Д., Яп, Б., Цвикл, П., Баумейстер, В., Хубер,

,

Р. (1995) Science 268, 533–539.

21. Neidhart, D. J., Kenyon, G.Л., Герлт, Дж. А. и Пецко, Г. А.

(1990) Nature (Лондон) 347, 692–694.

22. Макдермотт, Г., Принс, С. М., Фрир, А. А., Хоутомтвейт —

Лоулесс, А. М., Папиз, М. З., Когделл, Р. Дж. И Иссакс, Северо-Западный округ,

(1995) Nature (Лондон) 374, 517–521 .

23. Meining, W., Bacher, A., Bachmann, L., Schmid, C., Weinkauf,

,

S., Huber, R. & Nar, H. (1995) J. Mol. Биол. 253, 208–218.

24. Антсон, А.А., Отридж, Дж., Бжозовски, А.М. , Додсон, Э. Дж.,

Додсон, Г. Г., Уилсон, К. С., Смит, Т. М., Янг, М., Курецки,

Т. и Голлник, П. (1995) Nature (Лондон) 374, 693–700.

25. Уоррен, С. Г., Эдвардс, Б. Ф. П., Эванс, Д. Р., Уайли, Д. К. и

Липскомб, В. Н. (1973) Proc. Natl. Акад. Sci. USA 70, 1117-1121.

26. Лоуренс, М. К., Сузуки, Э., Варгезе, Дж. Н., Дэвис, П. К., Ван

Донкелаар, А., Таллох, П. А. и Колман, П. М. (1990) EMBO J.

9, 9–15.

27. Дубе П., Таверес П., Лурц Р. и Ван Хил М. (1993) EMBO J.

12, 1303–1309.

28. Хоар Р. Дж., Харрисон П. М. и Хой Т. Г. (1975) Nature (Lon-

don) 255, 653–654.

29. Карраш С., Буллоу П. А. и Гош Р. (1995) EMBO J. 14,

631–638.

30. Блумер, А. К., Чампнесс, Дж. Н., Бриконь, Г., Стаден, Р.,

Клаг, А. (1978) Nature (Лондон) 276, 362–368.

31. Винклер, Ф.K., Schutt, C.E., Harrison, S.C. и Bricogne, G.

(1977) Nature (London) 265, 509–513.

32. Einspahr, H. , Parks, E.H., Suguna, K., Subramanian, E. &

Suddath, F. L. (1986) J. Biol. Chem. 261, 6518–6527.

33. Liao, D.-I., Kapadia, G., Ahmed, H., Vasta, G.R. & Herzberg,

O. (1994) Proc. Natl. Акад. Sci. USA 91, 1428–1432.

34. Банерджи, Р., Дас, К., Равишанкар, Р., Сугуна, К., Суролия, А.

,

и Виджаян, М.(1996) J. Mol. Биол. 259, 281–296.

35. Нейсмит, Дж. Х., Эммерих, К., Хабаш, Дж., Харроп, С. Дж., Хелли-

колодец, Дж. Р., Хантер, В. Н., Рафтери, Дж., Калб, А. Дж. И Ярив, Дж.

( 1994) Acta Crystallogr. Д 50, 847–858.

36. Сринивасан Н., Уайт Х. Э., Эмсли Дж., Вуд С. П., Пепис М. Б.

и Бланделл Т. Л. (1994) Структура 2, 1017–1027.

37. Кельман З., Финкельштейн Дж. И Одоннелл М. (1995) Curr. Биол. 5,

1239–1242.

38. Крик, Ф. Х. К. и Уотсон, Дж. Д. (1956) Nature (Лондон) 177,

473–475.

39. Каспер Д. Л. и Клаг А. (1962) Cold Spring Harbor Symp.

Кол. Биол. 27, 1–24.

40. Томпсон Д. (1952) О росте и форме. (Кембриджский университет

Press, Кембридж, Великобритания).

41. Вуд С. П., Олива Г., О’Хара Б. П., Уайт Х. Э., Бланделл,

Т. Л., Перкинс С. Дж., Сардхарвалла И. и Пепис М. Б. (1988) J. Mol.

Биол.202, 169–173.

42. Сринивасан Н., Руфино С. Д., Пепис М. Б., Вуд С. П. и

Бланделл Т. Л. (1996) Chemtracts Biochem. Мол. Биол. 6, 149–164.

43. Шаанан Б., Лис Х. и Шарон Н. (1991) Science 254, 862–866.

44. Pepys, M. B. (1994) в Samter’s Immunological Diseases, eds.

Франк, М. М., Остин, К. Ф., Клэман, Х. Н. и Унанью, Е. Р.

(Литл-Браун, Бостон), 5-е изд., Стр. 637–655.

45. Бланделл, Т., Линдли, П., Миллер, Л., Мосс, Д., Слингсби, К., Щекотка,

I., Тернелл, Б. и Вистоу, Г. (1981) Nature (Лондон) 289,

771–777.

46. Уайт, Х. Э., Дриссен, Х. П. С., Слингсби, К., Мосс, Д. С. и

Линдли, П. Ф. (1989) J. Mol. Биол. 207, 217–235.

47. Вистоу Г. , Саммерс Л. и Бланделл Т. (1985) Nature (Лондон)

315, 771–773.

48. Антсон, А. А., Додсон, Э. Дж. И Додсон, Г. Г. (1996) Curr. Мнение.

Struct.Биол. 6, 142–150.

49. Баннер, Д. Д., Блумер, А. К., Петско, Джорджия, Филлипс, округ Колумбия,

Погсон, К. И., Уилсон, И. А., Корран, PH, Фурт, Эй-Джей, Милман,

Дж. Д., Оффорд, Р. Э., Приддл, Дж. Д. и Уэйли С. Г. (1975) Nature

(Лондон) 255, 609–614.

50. Уолл, М.А., Коулман, Д.Э., Ли, Э., Инигуезллухи, Дж. А., Познер,

,

Б.А., Гилман, А.Г. и Спранг, С.Р. (1995) Cell 83, 1047–1058.

51. Сондек, Дж., Бом, А., Ламбрайт, Д.Г., Хамм, Х. Э. и Сиглер,

,

П. Б. (1996) Nature (Лондон) 379, 369–374.

52. Ламбрайт, Д. Г., Сондек, Дж., Бом, А., Скиба, Н. П., Хамм,

,

Х. Э. и Сиглер, П. Б. (1996) Nature (Лондон) 379, 311–319.

Статья для коллоквиума: Blundell and Srinivasan Proc. Natl. Акад. Sci. USA 93 (1996) 14247

Многокомпонентный белковый комплекс опосредует передачу сигналов стресса окружающей среды в Bacillus subtilis

Abstract

Активность фактора транскрипции общего стресса σ B из Bacillus subtilis регулируется непосредственно механизмом переключения партнеров в какие ключевые белковые взаимодействия регулируются фосфорилированием серина. Сигналы энергии или стресса окружающей среды передаются на σ B независимыми путями, каждый из которых заканчивается дифференцированно регулируемой серинфосфатазой, активность которой требуется для контроля регуляторов переключения партнеров. Мы представляем генетические и биохимические доказательства того, что активация сигнальной фосфатазы в окружающей среде RsbU модулируется вторым, атипичным переключателем партнера, который включает избыточные негативные регуляторные белки в большом многокомпонентном сигнальном комплексе. В современной модели отрицательная регуляция фосфатазы RsbU зависит исключительно от белка-антагониста RsbS.Здесь мы проводим критический генетический тест, который делает недействительной эту модель и демонстрирует, что одного антагониста RsbS недостаточно для предотвращения передачи сигналов окружающей среды. Также необходим один из семейства четырех белков-коантагонистов, здесь переименованных в RsbRA, RsbRB, RsbRC и RsbRD, каждый с карбоксиконцевым доменом, очень похожим на весь белок RsbS. Поскольку любой отдельный член семейства RsbR вместе с RsbS был достаточен для передачи сигналов окружающей среды, мы пришли к выводу, что белки RsbR служат в качестве избыточных ко-антагонистов, необходимых для функции антагониста RsbS.Кроме того, очистка RsbRA из клеточных экстрактов с помощью аффинной никелевой хроматографии и гель-фильтрационной хроматографии обнаружила многокомпонентный комплекс, содержащий ко-антагонисты RsbRA и RsbRB вместе с антагонистом RsbS. Мы предполагаем, что этот комплекс служит машиной для передачи сигналов напряжения на σ B , и что свойства комплекса могут способствовать восприятию стресса окружающей среды.

Ключевые слова

Bacillus subtilis

общая реакция на стресс

сигма-факторы

преобразование сигнала

фосфорилирование серин-треонин

Сокращения

CB

Кумасси бриллиантовый синий

Полный текст Рекомендуемые статьи Авторские права © 2004 Elsevier Ltd.Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Цитирующие статьи

Архитектура многокомпонентных протеиновых клеток для фотокатализа (Технический отчет)

Гупта, Арунава и Превелидж, Питер Э. Архитектура многокомпонентных протеиновых клеток для фотокатализа . США: Н. П., 2016. Интернет. DOI: 10,2172 / 1233559.

Гупта, Арунава и Превелидж, Питер Э. Архитектура многокомпонентных протеиновых клеток для фотокатализа . Соединенные Штаты. https://doi.org/10.2172/1233559

Гупта, Арунава и Превелиге, Питер Э. Мон. "Архитектура многокомпонентных протеиновых клеток для фотокатализа". Соединенные Штаты. https://doi.org/10.2172/1233559. https://www.osti.gov/servlets/purl/1233559.

@article {osti_1233559,
title = {Архитектура многокомпонентных протеиновых клеток для фотокатализа},
author = {Гупта, Арунава и Превелиге, Питер Э},
abstractNote = {Основная цель проекта заключалась в разработке основанных на белковом шаблонах подходов к синтезу и направленной сборке полупроводниковых наноматериалов, эффективных для поглощения видимого света и производства водорода. В целом, реакции фотокатализа, управляемые видимым светом, демонстрируют низкую квантовую эффективность для преобразования солнечной энергии, в первую очередь из-за проблем и ограничений, связанных с материалами, таких как контроль ширины запрещенной зоны, зонной структуры, фотохимической стабильности и доступной реактивной площади поверхности фотокатализатор. Синтез многокомпонентных иерархических наноархитектур, состоящих из полупроводниковых наночастиц (НП) с желаемыми оптическими свойствами, созданных для максимальной пространственной близости для оптимального переноса электронов и энергии, представляет собой привлекательный способ решения проблемы.Вирусные капсиды представляют собой высокосимметричные самособирающиеся наночастицы белковой клетки, которые существуют в различных размерах и симметриях. Селективное осаждение неорганических веществ в определенных местах на вирусных капсидах обеспечивает точный контроль над размером, расстоянием и сборкой наноматериалов, что приводит к однородным и воспроизводимым наноархитектурам. Мы использовали возможности самосборки 420-субъединицы, 60 нм икосаэдра, капсида вируса P22, чтобы управлять зарождением, ростом и близостью ряда материалов компонентов.Контролируемое изготовление на внешней стороне термостабильной оболочки было достигнуто путем генетического кодирования специфических связывающих пептидов во внешнюю петлю, которая отображается на каждой из 420 субъединиц белка оболочки. Локализация дополнительных материалов внутри частицы была достигнута за счет использования «слитых белков каркаса». Каркасный домен управляет полимеризацией белка оболочки, в результате чего оболочка белка оболочки окружает ядро ​​приблизительно из 300 молекул каркаса / слияния.Слитый домен содержит пептид, который специфически связывает интересующий полупроводниковый материал.},
doi = {10.2172 / 1233559},
url = {https://www.osti.gov/biblio/1233559}, журнал = {},
номер =,
объем =,
place = {United States},
год = {2016},
месяц = ​​{1}
}

Lentinula edodes производит многокомпонентный белковый комплекс, содержащий марганец (II) -зависимую пероксидазу, лакказу и β-глюкозидазу | Письма о микробиологии FEMS

Абстрактные

Многокомпонентный белковый комплекс, содержащий марганец (II) -зависимую пероксидазу, лакказу и β-глюкозидазу, был выделен из экстрактов культур базидиомицета белой гнили Lentinula edodes . Этот белковый комплекс показал единственную полосу белка при электрофорезе в нативном полиакриламидном геле (PAGE). Однако на додецилсульфате натрия (SDS) -PAGE он показал три основных полосы и несколько дополнительных второстепенных полос размером от 60 до 180 кДа, что позволяет предположить, что это комплекс из шести-восьми различных белков. Молекулярная масса этого комплекса была оценена примерно в 660 кДа из положения элюирования при гель-фильтрации. Этот ферментный комплекс оказался эффективным при трансформации экологически стойких ксенобиотиков, пентахлорфенола и 2,5-дихлорфенола.

1 Введение

Базидиомицет белой гнили Lentinula edodes (Berk.) Pegler (съедобный гриб шиитаке) — наиболее широко культивируемый гриб в Восточной Азии, и его выращивание считается самым крупным процессом биоконверсии с использованием древесины [1]. L. edodes является активным лигно-целлюлолитическим организмом, способным разлагать отдельные компоненты лигноцеллюлозы, то есть лигнин, целлюлозу и гемицеллюлозу, секретируя массив окислительных и гидролитических ферментов [2]. Лакказы (EC 1.10.3.2) и марганец (II) -зависимые пероксидазы (MnPs, EC 1.11.1.7) представляют собой одну группу ферментов, которые ответственны за разложение лигнина грибком [3]. В последнее время эти ферменты привлекают широкое внимание из-за их способности разлагать устойчивые в окружающей среде ксенобиотики, такие как пентахлорфенол (PCP) и диоксины [4,5].

MnP, в частности, считается ключевым ферментом для разложения этих загрязнителей [6]. Исследования Валли и Голда [7] показали участие MnP в многоступенчатом пути разложения дихлорфенола (DCP).Grabski et al. [8] использовали иммобилизованный MnP из L. edodes в двухступенчатом биореакторе MnP для каталитического образования хелатного Mn 3+ и последующего окисления хлорфенолов. До сих пор сообщалось о MnP с 44,6 кДа и 59 кДа из различных штаммов L. edodes [1,9], хотя по крайней мере четыре изофермента MnP были идентифицированы в базидиомицетном грибе белой гнили, Phanerochaete crysosporium [10] . В ходе поиска новых MnP производства L.edodes , в экстрактах культур мы обнаружили высокомолекулярный ферментный комплекс, обладающий активностями MnP, лакказы и β-глюкозидазы (EC 3.2.1.21). В этом сообщении мы сообщаем об изоляции и свойствах ферментного комплекса.

2 Материалы и методы

2.1 Организм и условия культивирования

L. edodes дикариотический штамм TMI 800 (Микологический институт Тоттори, Тоттори, Япония) использовали на протяжении всего исследования.Культуры, которые выращивали при 20 ° C в течение 4 недель в пластиковых бутылках (9 × 20 см), содержащих коммерческую среду, состоящую из рисовых отрубей и буковых опилок, были приобретены в сельскохозяйственном кооперативе Kinko Shiitake, Тоттори, Япония. Затем культуры инкубировали с периодической аэрацией через отверстия на крышке при 25 ° C в течение 40 дней перед использованием.

2.2 Приготовление экстрактов

Мицелий со средой поблизости отделяли от остальной среды и экстрагировали 1: 2.5 (мас. / Об.) 50 мМ триэтаноламин-малеиновый буфер, pH 6,0, при перемешивании. Этап экстракции повторяли в общей сложности пять раз. Полученные таким образом экстракты объединяли и фильтровали через стеклянный фильтр. Полученный фильтрат центрифугировали при 9150 × g в течение 25 мин. Красящие вещества, в основном состоящие из полифенольных соединений в супернатанте [9], удаляли добавлением сшитой формы поливинилпирролидона (ПВП) в конечной концентрации 7,7% (мас. / Об.) [11]. Полученные таким образом экстракты фильтровали через стеклянный фильтр и обрабатывали для второй обработки ПВП с последующим центрифугированием (9150 × г, , 25 мин) для удаления мелких частиц ПВП.Обесцвеченные экстракты концентрировали с использованием мембраны PM 10 (Amicon Scientific Systems, Лексингтон, Массачусетс, США) и фильтровали через фильтры Millipore (размер пор 0,22 мкм). Отфильтрованные образцы, наконец, подвергали ультрацентрифугированию (60 000 × г, , 60 мин) в ультрацентрифуге Beckman XL-70. Образцы обрабатывали при 4 ° C на всех этапах.

2.3 Ферментные анализы

Активность лакказы, пероксидазы и MnP определяли при 37 ° C путем измерения окисления 3 ‘, 3’, 5 ‘, 5′-тетраметилбензидина (TMBZ) или 2,2’-азино-бис-3-этилбензтиазолин-6 -сульфоновая кислота (ABTS) в присутствии или в отсутствие H 2 O 2 и Mn 2+ .Активность лакказы с использованием TMBZ в качестве субстрата анализировали в реакционных смесях (2 мл), содержащих 1 мМ TMBZ и соответствующее количество фермента в 50 мМ McIlvaine буфере, pH 4,0. Окисление TMBZ измеряли, отслеживая увеличение поглощения при 650 нм [12]. Активность лакказы с ABTS в качестве субстрата измеряли путем инкубации 3 мл реакционной смеси, содержащей 0,03% (мас. / Об.) ABTS, с соответствующим количеством фермента в буфере McIlvaine, и за окислением ABTS следовало увеличение поглощения при 420 нм [1]. Активность пероксидазы определяли добавлением к растворам для анализа лакказы H 2 O 2 до конечной концентрации 80 мкМ и вычитанием увеличения поглощения, вызванного активностью лакказы. Активность MnP измеряли после добавления к реакционным смесям как 80 мкМ H 2 O 2 , так и 100 мкМ MnSO 4 .5H 2 O с корректировкой путем вычитания активности без добавления Mn 2+ . Одна единица активности фермента с TMBZ была определена как количество фермента, которое катализирует окисление TMBZ, так что изменение A 650 равно 0.01 в минуту [12]. Когда ABTS использовался в качестве субстрата, одна единица активности фермента была выражена как количество фермента, необходимое для окисления 1 мкмоль ABTS в минуту с использованием значения ε 420 для окисленного ABTS 3,6 × 10 4 M -1 см -1 [13]. Активность β-глюкозидазы определяли с использованием 2-мл реакционных смесей, содержащих 10 мМ p -нитрофенил β-d-глюкопиранозид ( p NPG) в 50 мМ буфере McIlvaine, pH 4,0 и соответствующее количество фермента. После 30 мин инкубации при 37 ° C реакцию останавливали добавлением 3,0 мл 1 М карбоната натрия и измеряли высвобождение нитрофенола p с помощью спектрофотометра при 400 нм. Одна единица β-глюкозидазы определяется как количество, которое продуцировало 1 мкмоль p -нитрофенола в минуту.

2.4 Очистка ферментного комплекса

Десять миллилитров (40 мг белка) конечного экстракта наносили на анионообменную колонку Q Sepharose (Pharmacia) (2.5 × 18 см), уравновешенный 50 мМ бис-трис-HCl, pH 6,8. Активность MnP элюировали тем же буфером ступенчатым градиентом концентрации NaCl 0, 0,1, 0,5 и 1 М при скорости потока 3,5 мл мин. -1 и собирали во фракции по 14 мл. Фракции, элюированные 1 М NaCl, объединяли, концентрировали и загружали на препаративную колонку для гель-фильтрации TSK 4000 (5,5 × 60 см) (Tosoh Corporation, Токио, Япония), уравновешенную 50 мМ натрий-ацетатным буфером, pH 5,0, содержащим 100 мМ Na . 2 СО 4 .Элюцию проводили тем же буфером при скорости потока 7 мл мин. -1 и собирали фракции объемом 10,5 мл. Фракции пика III были объединены и использованы для дальнейшего анализа. Содержание белка измеряли по методу Брэдфорда [14], используя бычий сывороточный альбумин в качестве стандарта.

2,5 Электрофорез в полиакриламидном геле (СТРАНИЦА)

PAGE проводили в присутствии и в отсутствие додецилсульфата натрия (SDS) с использованием предварительно приготовленных гелей (ATTO Co, Tokyo, Japan) в соответствии с инструкциями поставщика.Гели окрашивали на белок с помощью набора для окрашивания серебром Bio-Rad (Геркулес, Калифорния, США).

2.6 Преобразование PCP и 2,5-DCP

Реакционные смеси (4 мл) для измерения трансформации хлорфенола состояли из 50 мМ буфера McIlvaine, pH 4,0, 50 мкМ PCP или 2,5-DCP, 100 мкМ MnSO 4 , 80 мкМ H 2 O 2 и ферментный препарат, содержащий 2,9 ед. MnP и 1,7 ед. лакказы (на основе окисления TMBZ). Реакцию инициировали добавлением H 2 O 2 .Эту смесь инкубировали при 30 ° C в течение 16 часов и реакцию останавливали добавлением 1,4 г NaCl и 1 мл гексана. Непосредственно перед завершением реакции добавляли 50 мкМ трибромфенола (ТВФ, внутренний стандарт). Остаточные хлорфенолы и ТБФ экстрагировали интенсивным перемешиванием на смесителе Vortex в течение 30 с, после чего фазы разделяли центрифугированием (900 × г , 5 мин). Хлорфенолы в гексановых экстрактах анализировали с помощью ВЭЖХ (Shimadzu LC 10) с обращенно-фазовой колонкой C-18 (3.2 × 125 мм) упакованы Enviro Sep PP (Phenomenex, Торранс, Калифорния, США) при 45 ° C. Хлорфенолы элюировали из колонки с градиентом 0,1% уксусной кислоты (A) и 0,1% уксусной кислоты плюс метанол (B) следующим образом (% (об. / Об.) B мин. -1 ): 30/0, 60 / 10, 100/25, 100/35 и 30/36 при скорости потока 0,5 мл мин. -1 . Элюирование контролировали при 290 нм и количественно определяли по площади пика.

3 Результаты

Большая часть (70 ~ 80%) активности MnP, присутствующей в культуральном экстракте, была элюирована из колонки с Q-сефарозой с 0.Буфер, содержащий 5 M NaCl и обнаруженный в низкомолекулярном белке (ах) (данные не показаны). Напротив, профиль гель-фильтрации объединенных фракций MnP, элюированных 1 M NaCl-содержащим буфером из Q-сефарозы, который составлял примерно 15% от общей активности, показал существование четырех видов высокомолекулярных MnP в дополнение к низкомолекулярным свободным молекулам. фермент (ы), судя по их позициям элюирования (рис. 1). Пики I, II и IV образуют более двух полос белка на нативном PAGE, показывая, что эти фракции представляют собой смеси крупных белков или белковых агрегатов, включающих активность MnP.Однако объединенные фракции пика III (фракции 76–87 на рис. 1), которые элюировались в положении, сравнимом с положением тиреоглобулина (669 кДа), демонстрировали только одну полосу белка на нативном ПААГ (рис. 2, слева), что указывает на молекулу в этой фракции присутствует либо чистый крупный белок, либо дискретный белковый агрегат.

1

Гель-фильтрационная хроматография TSK 4000 объединенных фракций MnP, элюированных из колонки с Q-сефарозой 1 М буфером, содержащим NaCl. Пики MnP обозначены как I – V.Используемые калибровочные белки для гель-фильтрации представляют собой тиреоглобулин (A, 669 кДа), альдолазу (B, 158 кДа) и бычий сывороточный альбумин (C, 68 кДа). Целлюлосома из штамма YM4 Clostridium thermocellum (приблизительно 3,5 МДа) элюировалась во фракции 55. На измерение белка после фракции 99 влияли красящие вещества, и оно не показано. MnP (●), белок (○).

1

Гель-фильтрационная хроматография TSK 4000 объединенных фракций MnP, элюированных из колонки с Q-сефарозой 1 М буфером, содержащим NaCl.Пики MnP обозначены как I – V. Используемые калибровочные белки для гель-фильтрации представляют собой тиреоглобулин (A, 669 кДа), альдолазу (B, 158 кДа) и бычий сывороточный альбумин (C, 68 кДа). Целлюлосома из штамма YM4 Clostridium thermocellum (приблизительно 3,5 МДа) элюировалась во фракции 55. На измерение белка после фракции 99 влияли красящие вещества, и оно не показано. MnP (●), белок (○).

2

Native PAGE (слева) и SDS-PAGE (справа) фракций пика III (фракции 76–87 на рис.1 были объединены). Нативный ПААГ и SDS-PAGE проводили в 5% (мас. / Об.) И 7,5% (мас. / Об.) Полиакриламидных гелях, соответственно. Показаны соответствующие положения миграции стандартов молекулярной массы (миозин, 200 кДа; β-галактозидаза, 116 кДа; бычий сывороточный альбумин, 66 кДа; овальбумин, 45 кДа).

2

Нативный PAGE (слева) и SDS-PAGE (справа) фракций пика III (фракции 76–87 на рис. 1 объединены). Нативный ПААГ и SDS-PAGE проводили в 5% (мас. / Об.) И 7,5% (мас. / Об.) Полиакриламидных гелях, соответственно.Показаны соответствующие положения миграции стандартов молекулярной массы (миозин, 200 кДа; β-галактозидаза, 116 кДа; бычий сывороточный альбумин, 66 кДа; овальбумин, 45 кДа).

Указание на то, что L. edodes продуцирует неизвестный белок или агрегат, содержащий MnP большой массы, побудило нас к его характеристике, поскольку свободные мономерные ферменты 44,6 кДа и 59 кДа были единственными MnP, о которых сообщалось в L. edodes , а агрегаты ферментов отсутствовали. белки с большой массой не известны для MnP.Подвергнув объединенные фракции пика III в SDS-PAGE, были получены три основные полосы (72, 115, 130 кДа) и несколько дополнительных полос минорного белка размером от 60 до 180 кДа (рис. 2, справа). Это предполагает, что молекула представляет собой белковый агрегат, содержащий от шести до восьми субъединиц. По словам производителя набора для окрашивания серебром, белые полосы, образованные в положениях, соответствующих 72 кДа и 60 кДа, подразумевают присутствие белков, содержащих небольшое количество остатков цистеина (если таковые имеются).

Ферментативную активность белкового агрегата оценивали на различных субстратах. Как показано в таблице 1, он окислял TMBZ и ABTS, а с добавлением H 2 O 2 и Mn 2+ активность по окислению TMBZ и ABTS увеличивалась, что свидетельствует о сосуществовании лакказы, пероксидазы и MnP в совокупности. . Однако окисление вератрилового спирта, хорошего субстрата для лигнинпероксидазы, не наблюдалось даже в присутствии H 2 O 2 . Комплекс имел высокую активность по гидролизу p NPG (Таблица 1), но не гидролизовал p NP β-d-целлобиопиранозид, p NP β-d-ксилопиранозид и карбоксиметилцеллюлозу.Как показано на фиг. 3, максимальные активности наблюдались между pH 3,5 и 4,5 для лакказы и при pH 5,0 для MnP. Активность лакказы упала до нуля при pH 6,0, тогда как MnP был активен в широком диапазоне pH. β-глюкозидаза имела относительно острый оптимум pH 4,0. Мы попытались приписать активности лакказы, MnP и β-глюкозидазы субъединицам, разделенным на SDS-PAGE, путем окрашивания активности с использованием TMBZ, ABTS и 4-метилумбеллиферил β-d-глюкопиранозида в качестве субстратов, но не было обнаружено активности даже в образце, обработанном SDS при 60 ° C предположительно из-за инактивации субъединичных ферментов.

1

Активность ферментов комплекса 660 кДа a

, Mn +2 b-09 , Mn +2
Субстрат b Со-субстрат Тип активности Ед. лакказа 39,1
TMBZ H 2 O 2 пероксидаза 23,3
TMBZ H 32 H 32 2 909 2 пероксидаза 66.6
ABTS — лаккас 11,3
ABTS H 2 O 2 O 2 пероксидаза 0,6 0,6 пероксидаза марганца 10,2
p NPG — β-глюкозидаза 240
субстрат Тип активности Единицы мг −1c
TMBZ — лакказа «> 39.1
TMBZ H 2 O 2 пероксидаза 23,3
TMBZ H 2 O 2 1034 + марганец 970970 марганец 970
ABTS — лаккаса 11,3
ABTS H 2 O 2 пероксидаза 0,6 9109 4 9033 9033 9033 ABTS 0,6 9109 9109
пероксидаза марганца 10.2
p NPG — β-глюкозидаза 240
1

Активность ферментов комплекса 660-кДа a

2
Субстрат Co1067 субстрат Тип активности Ед. мг −1c
TMBZ — лакказа «> 39,1
67 TMBZ

9103 .3
TMBZ H 2 O 2 , Mn +2 пероксидаза марганца 66,6
ABTS H 2 O 2 пероксидаза 0,6
ABTS H 2 O 2 , Mn +2 пероксидаза марганца 10,1070
p NPG — β-глюкозидаза 240
мг 2
Субстрат b Co-субстрат 16 Тип
TMBZ — лакказа 39,1
TMBZ H 2 O 2 пероксидаза «> 23.3
TMBZ H 2 O 2 , Mn +2 пероксидаза марганца 66,6
ABTS H 2 O 2 пероксидаза 0,6
ABTS H 2 O 2 , Mn +2 пероксидаза марганца 10,1070
p NPG — β-глюкозидаза 240

3

Влияние pH на активность лакказы (), MnP (○) и β-глюкозидазы (◻) в комплексе 660 кДа. Активность измеряли в 50 мМ буфере McIlvaine при различных значениях pH с ABTS (для лакказы и MnP) и p NPG (для β-глюкозидазы) в качестве субстратов. Уровни 100% активности лакказы, MnP и β-глюкозидазы соответствуют 11.6, 11,8 и 214 соответственно.

3

Влияние pH на активность лакказы (), MnP (○) и β-глюкозидазы (◻) в комплексе 660 кДа. Активность измеряли в 50 мМ буфере McIlvaine при различных значениях pH с ABTS (для лакказы и MnP) и p NPG (для β-глюкозидазы) в качестве субстратов. Уровни 100% активности лакказы, MnP и β-глюкозидазы соответствуют 11,6, 11,8 и 214 соответственно.

Было продемонстрировано, что PCP и, в меньшей степени, 2,5-DCP в буфере McIlvaine были уменьшены при инкубации с ферментным комплексом 660 кДа в течение 16 часов при 30 ° C (Таблица 2).

2

Обработка PCP и 2,5-DCP комплексом 660 кДа a

Соединение Количество (мкг мл -1 ) Уменьшение (%)
Начальное Остаточный b
PCP 13,3 6,4 ± 0,3 52
DCP 8,2 6,3 ± 0.3 23

70 70

7 7 9107 9107 9107 9107
Соединение Количество (мкг мл −1 ) Уменьшение (%)
Исходное
PCP «> 13,3 6,4 ± 0,3 52
DCP 8,2 6,3 ± 0,3 23
2

Лечение PCP и 2,5-DCPa комплексом 660-kDa a

Соединение Количество (мкг мл −1 ) Уменьшение (%)
Исходное Остаточное b

17 		13.3 6,4 ± 0,3 52
DCP 8,2 6,3 ± 0,3 23
) 89 2
Соединение Кол-во (мкг / мл

816)
Исходный Остаточный b
PCP 13,3 6,4 ± 0,3 52
6,3 ± 0,3 23

4 Обсуждение

В этом исследовании было показано, что в культуре L. edodes , впервые выращенной на коммерческом древесном субстрате, образуются по крайней мере четыре крупных белковых агрегата (приблизительно 300 кДа ~ 4 МДа), обладающих активностью MnP. Один из таких агрегатов с молекулярной массой приблизительно 660 кДа был выделен и оказался ферментным комплексом, состоящим из шести-восьми субъединиц, обладающих четырьмя типами ферментативной активности, т.е.е. лакказа, пероксидаза, MnP и β-глюкозидаза. Однако в некоторых случаях невозможно провести четкое различие между лакказами и пероксидазами, основываясь исключительно на их способности использовать H 2 O 2 в качестве донора кислорода [15]. Фактически, наши данные показывают, что стимуляция окислительной активности H 2 O 2 с ABTS в качестве субстрата практически незначительна (Таблица 1). Таким образом, мы предполагаем, что комплекс, скорее всего, содержит β-глюкозидазу, MnP и лакказу, которая стимулируется H 2 O 2 , когда TMBZ является субстратом. Хотя эти ферментные активности максимальны при различных значениях pH, они, по-видимому, значительно активны при физиологическом pH (около 4,5) жидкостей внеклеточного мицелия. Влияние pH на активность лакказы и MnP в комплексе 660 кДа согласуется с результатами, полученными для свободных мономерных ферментов [9,16].

Существование агрегатов, содержащих MnP с большой массой, с молекулярной массой примерно от 300 кДа до 4 МДа, на что указывает гель-фильтрация TSK 4000, хорошо согласуется с нашими предварительными электронно-микроскопическими наблюдениями сферических частиц разных размеров, имеющих диаметр 10-60. нм в экстрактах культур этого гриба (неопубликованные данные).Хорошо известно, что несколько видов анаэробных бактерий продуцируют комплексы целлюлаза / гемицеллюлаза, называемые целлюлосомами [17]. Целлюлосомы обладают чрезвычайно сильной гидролизующей активностью по отношению к кристаллической целлюлозе, которая демонстрирует стойкое сопротивление ферментативной атаке. Ферментный комплекс массой 660 кДа, выделенный в этом исследовании, можно рассматривать как ферментный комплекс, аналогичный целлюлосоме, но он отличается от целлюлосом тем, что содержит как гидролитические, так и окислительные ферменты. Считается, что организация комплекса, состоящего как из гидролитических, так и из окислительных ферментов, имеет преимущество в разложении стойких лигноцеллюлозных материалов, если это способствует совместному действию этих ферментов и может способствовать заметной способности L. edodes к разложению лигно-целлюлозы. .

Было показано, что ферментный комплекс обладает способностью трансформировать PCP и 2,5-DCP и, таким образом, кажется многообещающим средством для биоремедиации окружающей среды, загрязненной этими ксенобиотиками, но необходимо идентифицировать продукты трансформации и подтвердить их безопасность. перед практическим использованием.

Для выяснения функции и значения комплекса ферментативная активность и структурная роль отдельных субъединиц, а также эффект образования комплекса должны быть сначала выяснены посредством исследований диссоциации и повторной ассоциации.

Благодарности

Эта работа была частично поддержана грантом (Программа биодизайна) Министерства сельского, лесного и рыбного хозяйства Японии.

Список литературы

[1]

(

1995

)

Влияние питательного азота и марганца на продукцию пероксидазы марганца и лакказы Lentinula ( Lentinus ) edodes

.

FEMS Microbiol. Lett.

128

,

81

—

88

. [2]

(

1985

)

Внеклеточные ферменты, продуцируемые культивированным грибом Lentinus edodes во время разложения лигноцеллюлозной среды

.

заявл. Environ. Microbiol.

50

,

859

—

867

. [3]

(

1994

)

Лигнин-модифицирующие ферменты отобранных грибов белой гнили: продукция и роль в деградации лигнина

.

FEMS Microbiol. Ред.

13

,

125

—

188

. [4]

(

1985

)

Окисление стойких загрязнителей окружающей среды грибком белой гнили

.

Наука

228

,

1434

—

1436

. [5]

(

1992

)

Разложение 2,7-дихлордибензо- p -диоксина разлагающим лигнин базидиомицетом Phanerochaete chrysosporium

.

J. Bacteriol.

174

,

2131

—

2137

. [6]

(

1995

)

Потенциал грибов белой гнили при обработке загрязняющих веществ

.

Curr. Мнение. Biotechnol.

6

,

320

—

328

. [7]

(

1991

)

Разложение 2,4-дихлорфенола разрушающим лигнин грибком Phanerochaete chrysosporium

.

Дж.Бактериол.

173

,

345

—

352

. [8]

(

1998

)

Иммобилизация пероксидазы марганца из Lentinula edodes и ее биокаталитическое образование хелата Mn (III) в качестве химического окислителя хлорфенолов

.

Biotechnol. Bioeng.

60

,

204

—

215

. [9]

(

1990

)

Характеристики и N -концевая аминокислотная последовательность пероксидазы марганца, очищенной из культур Lentinus edodes , выращенных на коммерческом древесном субстрате

.

заявл. Micrbiol. Biotechnol.

33

,

359

—

365

. [10]

(

1985

)

Продукция множественных лигниназ Phanerochaete chrysosporium : влияние выбранных условий роста и использование мутантного штамма

.

Enzyme Microb. Technol.

8

,

27

–

32

. [11]

(

1969

)

Удаление фенольных соединений при выделении растительных ферментов

.

Methods Enzymol.

13

,

555

—

563

. [12]

(

1994

)

Взаимосвязь между активностью фенолоксидазы, растворимым белком и эргостеролом с ростом видов Lentinus в бревнах из опилок дуба

.

заявл. Micrbiol. Biotechnol.

41

,

28

–

31

. [13]

(

1988

)

Оксидазы вератрилового спирта из разлагающего лигнин базидиомицета Pleurotus sajor-caju

.

Biochem. J.

255

,

445

—

450

. [14]

(

1976

)

Быстрый и чувствительный метод определения количества белка в микрограммах, использующий принцип связывания белкового красителя

.

Анал. Biochem.

72

,

248

—

254

. [15]

(

1992

)

Доказательства новой внеклеточной пероксидазы: пероксидазы, ингибируемой марганцем, из гриба белой гнили Bjerkandera sp.БОС 55

.

FEBS Lett.

299

,

107

—

110

. [16]

(

1991

)

Очистка и характеристика лакказы из Lentinus edodes

.

Мокузай Гаккаиси

37

,

562

—

569

. [17]

(

1998

)

Целлюлоза, целлюлазы и целлюлосомы

.

Curr. Мнение.Struct. Биол.

8

,

548

—

557

.

Сокращение

    Аббревиатура

  • MnP

    марганец (II) -зависимая пероксидаза

  • PCP

  • DCP

  • PVP

  • TMBZ

    , 50002 TMBZ

    тетраметилбензидин

  • ABTS

    2,2′-азино-бис-3-этилбензтиазолин-6-сульфоновая кислота

  • p NPG

    p -нитрофенил β-d-904 SDS4 9001

    SDS4

  • PAGE

    Электрофорез в полиакриламидном геле

  • TBP

  • PNPase

    полинуклеотидфосфорилаза

© 2001 Федерация европейских микробиологических обществ

.

No related posts.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *