Левзеи экстракт применение: (Leuzeae extract fluid), ,
Левзея — описание ингредиента, инструкция по применению, показания и противопоказания
Описание левзеи
Левзея – растение семейства Астровые, произрастающее на Алтае. Ее высота может доходить до 2 м, но обычно не превышает 100 см. Стебли прямостоячие, не ветвистые. Цветы фиолетовые. Корневище имеет много отростков и разрастается в ширину. В качестве лечебного сырья используют корень.
Состав экстракта
Химический состав корневища левзеи представлен:
- дубильными веществами, оказывающими противовоспалительное и антиинфекционное действие;
- алкалоидами, проявляющими тонизирующую и антистрессовую активность;
- каротином – природным антиоксидантом;
- инулином – пребиотиком и стимулятором пищеварения;
- витамином C – мощным антиоксидантом и участником обменных процессов;
- флавоноидами – антиоксидантами;
- эфирным маслом, обладающим антисклеротическим, обезболивающим и спазмолитическим действием.
Фармакологические свойства
Препараты левзеи улучшают кровообращение головного мозга, восстанавливают обменные процессы, оптимизируют кровяное давление и повышают адаптационные способности организма. Улучшение кровотока благоприятно сказывается на зрении и функционировании внутренних органов. Лекарственное растение также улучшает эректильную функцию, работу печени и почек.
Поскольку левзея тонизирует и стимулирует центральную нервную систему, можно использовать ее для стабилизации психического состояния и предупреждения эмоциональных срывов в период избавления от табачной или алкогольной зависимости. Она снимает раздражительность, повышает память и внимательность.
Левзея благоприятно влияет на состав крови и предупреждает формирование атеросклеротических бляшек на сосудистых стенках. Активные компоненты растения повышают работоспособность, что позволяет легче переносить тяжелые физические и интеллектуальные нагрузки.
Растение оптимизирует состав крови. При его регулярном приеме в крови понижается уровень холестерина, оптимизируется концентрация эритроцитов и гемоглобина. С помощью левзеи можно избавиться от кишечных, мышечных болей.
Экстракты левзеи стимулируют секрецию половых гормонов, что помогает восстановить потенцию и нормализовать давление при гипотензии. Они обеспечивают накопление в организме АТФ и гликогена, которые необходимы для высвобождения энергии во время интенсивных нагрузок. В результате улучшения метаболизма из мышечной массы быстрее выводится молочная кислота, что ускоряет восстановление после тренировки.
Внимание! Левзею используют для поддержания нормального уровню глюкозы при выбросе адреналина, что не дает развиться гипогликемии при инсулинотерапии.
Применение левзеи
Левзею можно приобрести в виде капсул, таблеток, бальзама, эликсира, настоя, экстракта. Ее включают в рецептуры лекарственных сиропов, общеукрепляющих и стимулирующих препаратов.
Настои, бальзамы и эликсиры можно пить как самостоятельное лекарство или добавляя в чай. Они имеют приятный вкус и хорошо усваиваются за счет жидкой формы. Твердые препараты левзеи принимают курсами: по 1 месяцу с перерывами в 1–1,5 месяца. Дозировка зависит от вида средства.
Чтобы активные компоненты левзеи лучше усвоились, стоит принимать ее в процессе или сразу после еды. Поскольку она возбуждает и тонизирует центральную нервную систему, не стоит осуществлять ее прием во второй половине дня.
Противопоказания
Левзея противопоказана при непереносимости компонентов, бессоннице, гипертонии. Длительное применение препаратов и народных средств на ее основе может быть чревато нарушением работы сердца, расстройством пищеварения и повышением артериального давления.
дозировка, передозировка и возможные отрицательные последствия
38. Дозировка, Передозировка,Возможные отрицательные последствия Левзея — легенда древней восточной медицины, включен в фармакопею 15 государств
Широко и давно используется в Спорте, Медицине, Науке и Домашней Практике
А также в животноводстве и ветеринарии (птицы, свиньи, КРС, лошади и т.д.)
Не содержит токсичных веществ, совмещается с алкоголем и лекарствами
В официальной медицине применяется от сердечно-сосудистых и раковых болезней
Устраняет головные и сердечные боли, нормализует артериальное давление
Восстанавливает и защищает печень, почки, сердце, мозг и мышцы
ДОЗИРОВКА ПРОДУКТА «ЛЕВЗЕЯ-ПОРОШОК» (из Leuzea, Rhaponticum)
Продукт из Левзеи сафлоровидной — Leuzea, Rhaponticum carthamoides (Willd) Iljin, maral root (рапонтик, рапонтикум, маралий корень) характеризуется значительной широтой оптимальных дозировок. Разовая доза, используемая в профилактических целях, равна 25 мг; лечебная доза – 25-50 мг; спортивная доза может достигать 100 мг и выше. Сравнительные величины доз приведены на рисунке (25 мг — величиной с горошину черного перца).
Левзея употребляется перорально – в виде сухого порошка “под язык” (сублингвально), или, заваривая кипятком, в качестве добавки к черному чаю, в виде фиточая совместно с другими лекарственными травами, а также в качестве спиртовых экстрактов и настоев (в соотношении 1:20…1:100 – масса/объем).
Исходя из необходимости, левзею можно принимать в любое время суток. Принимают поздно вечером, если предстоит работа в ночное время и нужно снять сонливость и усталость, сохранить высокую работоспособность. Если Вы чувствуете, что начинаете заболевать, принимайте чаще – через каждые 3-4 часа.
При вирусной и бактериальной интоксикации, алкогольном опьянении, в случае болезни разовую дозу левзеи-порошка (25 мг) целесообразно увеличить в 2-3 раза. Для спортсменов с высоким уровнем метаболических процессов дозы постепенно могут быть увеличены в 4-10 раз. При этом большие дозы должны сочетаться с адекватным увеличением физических нагрузок на организм. Длительность приема не ограничена – от 2-3 до 10 лет.
Как правило, единовременно используются 1-2 дозы – утром, днем и вечером. Длительность приема для достижения значимого эффекта составляет 7 (1-10 дней). Разовый курс приема, в зависимости от величины и частоты доз, может достигать 30-60 дней, после чего рекомендуется делать перерыв на 30 (10-60) дней. Эффект физиологического последействия на организм человека составляет 1.5-2.0 месяца.
ПЕРЕДОЗИРОВКА
Лекарственный и иммуно-стимулирующий эффект Левзеи сафлоровидной — Leuzea, Rhaponticum carthamoides (Willd) Iljin, maral root (рапонтик, рапонтикум, маралий корень) не увеличивается пропорционально повышению дозы. Кратковременная или разовая передозировка без необходимости не приносит вреда, но и не помогает.
Диапазон кратности доз, при которых стимулирующий эффект малых доз меняется на противоположный тормозящий, достигает 200 раз. Высшая разовая доза равна 5-7 г.
Отрицательный эффект передозировки препарата из надземных частей (листьев левзеи) у подопытных крыс наступает при приеме 20 % от массы тела, при этом наблюдаются кратковременные расстройства органов чувств.
ВОЗМОЖНЫЕ ОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ ПОСЛЕДСТВИЯ
При длительном приеме высоких доз Левзеи (главным образом корней и корневищ, которые могут содержат полиацетиленовые фототоксичные соединения и плесневые грибки) редко, но могут наблюдаться побочные явления в виде индивидуальной непереносимости – тошнота, диарея, рвота, ощущение сухости во рту.
Примечание. Информацию по побочным химическим веществам, содержащихся в корнях и корневищах левзеи сафлоровидной — Leuzea, Rhaponticum carthamoides (Willd) Iljin, maral root (рапонтик, рапонтикум, маралий корень) Вы можете найти по списку, изложенному на странице сайта:
Симптомами передозировки (обычно это спиртовые экстракты из сомнительных источников, загрязненность которых визуально не обнаруживается) являются: повышенная раздражительность, нарушения сна, учащенное сердцебиение, психическая депрессия. При побочных отрицательных действиях показано немедленное промывание желудка, затем – симптоматическое лечение. Тяжелые отравления, аналогичные при приеме других адаптогенов (жень-шень, родиола розовая и т.д.) в литературе не описаны.
Следует подходить осторожно (под наблюдением врача) к применению левзеи сафлоровидной при лечении больных с тяжелыми хроническими заболеваниями сердечно-сосудистой системы (артериальная гипертония тяжелой формы, аритмия), острыми инфекционными заболеваниями, хроническими заболеваниями почек, печени в фазе декомпенсации, психических заболеваний органического генеза, психозов.
Подбор дозы рекомендуется проводить индивидуально, ежедневно прибавляя или убавляя дозу препарата на 10-20 %, постоянно контролируя самочувствие, советуясь с лечащим врачом.
Особенности и различия препаратов из Левзеи, Технология Производства и их Активность описаны на страницах нашего сайта «Экдистен, Левзея и Маралий корень: Заказы, Технология, Дозировка и Активность — Ecdystenum, Rhaponticum-Leuzea and Maral root: Orders, Technology, Dosage, Activity»:
Дополнительная информация по другим Инструкциям (по Серпухе, использованию Левзеи в животноводстве) будет приведена в ближайшее время – следите в разделе «Новости»
ВЫСЫЛАЮТСЯ — Семена и Левзея-порошок для Спорта, Медицины и Домашней Практики
ЗАЯВКИ — Подавать по Электронной Форме: https://leuzea.ru/forms/leuzea_order.htm
Ваши письма по адресу: https://levzea.com
Заказать Левзеи экстракт жидкий 50мл (Камелия-ЛТ ООО) в интернет-аптеке
Аптеки города:
г. Домодедово аэропорт, 1 этажпн-вс круглосуточно
В наличии, 153 ₽
г. Домодедово аэропорт, 2 этажпн-вс круглосуточно
8-495-419-12-81
В наличии, 143 ₽ Голиково, Усковский пр-д, 2
пн-вс 9:00-22:00
+7 495 419-15-65
В наличии, 82 ₽ Жуковский, Клубная ул, 4/8
пн-вс 9:00-21:00
+7 495 221-53-88
В наличии, 82 ₽ Москва, Автозаводская ул., 13/1
пн-пт 8:00-22:00, сб-вс 9:00-22:00
+7 (495)419-24-50
В наличии, 84 ₽ Одинцовский городской округ, Трехгорка, ул. Трехгорная, 4
пн-вс 09:00-21:00
+7(495)419-12-85
В наличии, 68 ₽
Видное, Строительная ул, д. 3, пом. 19-25
пн-вс 8:00-20:00
8 (495) 419-24-84
Москва ул. Сущевский вал,д.5,с.5.
пн-пт 08:00-21:00, сб-вс 09:00-20:00
8(495) 419 29 10
Москва, Живописная ул, 12
пн-пт 8:00-22:00, сб 8:00-21:00, вс 9:00-21:00
+7 495 419-06-22
Москва, Нижняя Красносельская ул, д 35, с 49
пн-пт 9:00-22:00, сб-вс 10:00-22:00
+7 495 419 13 48
Москва, Самора Машела ул, 2А
пн-пт 9:00-22:00, сб-вс 9:00-21:00
+7 495 419-12-51
Москва, ул. Большая Тульская, д.11
пн-пт 08:00-21:00, сб-вс 09:00-20:00
8(495) 419 30 12
Ногинск, 1-ая Ильича ул, строение 6/29
пн-вс 9:00-22:00
+7 495 221-53-85
Ногинск, Дмитрия Михайлова ул, 1
пн-вс 9:00-22:00
+7 495 419-06-21
Химки, Ленинский пр, 1к1
пн-вс 8:00-21:00
+7 495 419 12 97
Состав
Рапонтикума сафлоровидного корневищ с корнями — 1000 г
Спирт этиловый (этанола) 70 % — достаточное количество для получения 1 л экстракта.Лекарственная форма
экстракт жидкий для приема внутрь
Описание
Жидкость красновато-коричневого цвета. В процессе хранения возможно выпадение осадка.
Фармакодинамика
Оказывает общетонизирующее действие, повышает работоспособность.
Показания к применению
Физическое и умственное переутомление, астеническое состояние.
Побочные действия
Возможны аллергические реакции, головная боль, повышение артериального давления, нарушение сна, раздражительность, диспепсия.
Взаимодействие
Возможно усиление действия стимуляторов центральной нервной системы и аналептиков (кофеин, камфора, фенамин и др.), препарат является физиологическим антагонистом средств, угнетающих центральную нервную систему (в том числе барбитуратов, транквилизаторов, седативных препаратов, нейролептиков и т.д.).
Способ применения и дозы
Внутрь, по 20-30 капель 2-3 раза в сутки до еды, разводя в небольшом количестве воды. Курс лечения 30-40 дней. Целесообразность проведения повторного курса определяется врачом.
Особые указания
Во избежание нарушения сна препарат не следует применять во второй половине дня не позднее чем за 3-4 часа до сна.
Форма выпуска
Экстракт жидкий для приема внутрь.
Условия отпуска из аптек
Без рецепта
Условия хранения
В сухом, защищенном от света месте при температуре от +15 С до + 25 С.
Хранить в недоступном для детей месте.
Срок годности
3 года.Не применять по истечении срока годности, указанного на упаковке.Производитель и организация, принимающие претензии потребителей
КАМЕЛИЯ НПП, ОООРастительный экстракт корня левзеи сухой
Латинское наименование: Rhaponticum carthamoides
Другие названия: маралий корень.
Экстракт левзеи получен в результате вакуумной экстракции наземной части лекарственного растения левзеи сафлоровидной.
|
Основные свойства:
Растворимость сухого экстракта левзеи: в воде. Норма ввода: 1-3%. |
Применение сухого экстракта левзеи в производстве БАД
Экстракт левзеи сафлоровидной включается в состав БАД, призванных повышать работоспособность при физическом и умственном переутомлениях. И это только благодаря способности левзеи действовать нацентральную нервную систему возбуждающе, повышать артериальное давление, увеличивать скорость кровотока, учащать дыхание.
Применение сухого экстракта левзеи в косметике
В косметической продукции используется в качестве компонента, оказывающего противовоспалительное, успокаивающее действие.
Химический состав корней левзеи сафлоровидной
Органические кислоты, смолы, эфирные масла, а также алкалоиды, дубильные вещества, инулин, аскорбиновая кислота, каротин и другие витамины и соединения.
Основные биологически активные вещества сухого экстракта левзеи: экдистен не менее 0,4%.
Хотите экстракт левзеи купить, заполните форму заказа или позвоните по указанным вверху телефонам.
Срок хранения экстракта: 3 года в сухом, защищенном от прямых солнечных лучей, месте.
Левзеи экстракт жидкий (Leuzeae extract fluid): описание, рецепт, инструкция
Leuzeae extract fluid
Аналоги (дженерики, синонимы)
Трекрезан, Биоарон, Вигор, Вивабон, Ван-Би, Авиценна, Кедровит, ЛадастенТриметаболДействующее вещество
Левзеи сафлоровидной корневища с корнями (Rhizomata cum radicibus Leuzeae carthamoidis )
Фармакологическая группа
Общетонизирующие средства и адаптогены
Рецепт
Международный:
Rp.: Extr. Leuzeae fluidi 40 ml
D. S. По 20-30 капель 2-3 раза в день.
Rp.: T-rae Leuzeae 50 ml
D. S. По 20 капель 2-3 раза в день до еды.
Россия:
Отпускается без рецепта
Фармакологическое действие
Средство растительного происхождения, оказывает адаптогенное и общетонизирующее действие. Способствует накоплению гликогена и АТФ в скелетных мышцах, печени и сердце, снижает концентрацию глюкозы при адреналиновой гипергликемии и препятствует развитию гипогликемии при введении инсулина. Обладает гиполипидемическим и антигипоксическим свойствами, повышает устойчивость организма к неблагоприятным воздействиям внешней среды, к физическим нагрузкам. Повышает умственную работоспособность, снижает утомляемость, улучшает память, потенцию, повышает способность к концентрации внимания.
Фармакодинамика
Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.
Фармакокинетика
Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.
Способ применения
Для взрослых:
Принимают внутрь. Капли и экстракт для приема внутрь: по 20-30 кап. 2-3 раза/сут, во время еды. Сырье растительное (брикеты): 1 г сырья (2 брикета) заливают 200 мл воды, нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, охлаждают при комнатной температуре 45 мин, процеживают, оставшееся сырье отжимают и доводят объем до 200 мл. Настой принимают по 100 мл до еды утром и днем. Курс лечения — 2-3 нед.
Показания
— В составе комбинированной терапии: астения, физическое и — умственное переутомление, снижение потенции, период реконвалесценции.
Противопоказания
— Артериальная гипертензия
— Аритмии
— Острый период инфекционных заболеваний
— Повышенная нервная возбудимость
— Эпилепсия
— Нарушения сна, хронические заболевания печени и почек, хронический алкоголизм (для лекарственных форм, содержащих этанол)
— Беременность, период лактации, детский возраст (до 12 лет)
— Повышенная чувствительность к растительному средству.
Особые указания
Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.
Побочные действия
— Возможно: повышение АД, головная боль, раздражительность, бессонница, диспепсия
— Аллергические реакции.
Передозировка
Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.
Лекарственное взаимодействие
Данных по этому разделу нет. В текущий момент мы обрабатываем информацию, пожалуйста вернитесь позже.
Форма выпуска
Экстракт для приема внутрь (жидкий) 1 л корневища с корнями левзеи сафлоровидной 1 кг. 50 мл — флаконы темного стекла (1) — пачки картонные
Левзеи Экстракт Жидкий | Российские аналоги импортных лекарств с ценами
Фармакологическое действие
Средство растительного происхождения, оказывает адаптогенное и общетонизирующее действие. Способствует накоплению гликогена и АТФ в скелетных мышцах, печени и сердце, снижает концентрацию глюкозы при адреналиновой гипергликемии и препятствует развитию гипогликемии при введении инсулина. Обладает гиполипидемическим и антигипоксическим свойствами, повышает устойчивость организма к неблагоприятным воздействиям внешней среды, к физическим нагрузкам. Повышает умственную работоспособность, снижает утомляемость, улучшает память, потенцию, повышает способность к концентрации внимания.Показания
В составе комбинированной терапии: астения, физическое и умственное переутомление, снижение потенции, период реконвалесценции.Режим дозирования
Принимают внутрь. Капли и экстракт для приема внутрь: по 20-30 кап. 2-3 раза/сут, во время еды. Сырье растительное (брикеты): 1 г сырья (2 брикета) заливают 200 мл воды, нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, охлаждают при комнатной температуре 45 мин, процеживают, оставшееся сырье отжимают и доводят объем до 200 мл. Настой принимают по 100 мл до еды утром и днем. Курс лечения — 2-3 нед.Побочное действие
Возможно: повышение АД, головная боль, раздражительность, бессонница, диспепсия; аллергические реакции.Противопоказания к применению
Артериальная гипертензия, аритмии, острый период инфекционных заболеваний, повышенная нервная возбудимость, эпилепсия, нарушения сна, хронические заболевания печени и почек, хронический алкоголизм (для лекарственных форм, содержащих этанол), беременность, период лактации, детский возраст (до 12 лет), повышенная чувствительность к растительному средству.Применение при беременности и кормлении грудью
Противопоказан при беременности и в период лактации.Применение у детей
Противопоказан в детском возрасте до 12 лет.Применение при нарушениях функции печени
Противопоказан при хронических заболеваниях печени.Применение при нарушениях функции почек
Противопоказан при хронических заболеваниях почек.Особые указания
Во избежание нарушения сна не следует применять во второй половине дня, позднее чем за 3-4 ч до сна.Левзея: выращивание и применение
Антонов сад – сайт для увлеченных дачников
Приглашаем в наш уютный уголок! Мы рады общению и ждем на огонек любителей-цветоводов, знающих огородников и экспериментаторов, которые и совет дадут, и на вопросы ответят.Мы с жадностью по всей России собираем статьи, видеоинструкции, фото и мастер-классы, чтобы интересные и нужные материалы удобно было почитать и посмотреть.
Сейчасуже 2000 статей о возделывании томатов, огурцов и перцев, уходе за яблоней, грушей и сливой, посеве семян на рассаду, в теплицу и в открытый грунт, формировке деревьев и кустарников, пасынковании и прищипке овощей, подкормке цветов.
Особенно важно для дачников определить точные сроки посадки и благоприятные дни посева, полива, удобрения и обрезки. Для этого мы регулярно публикуем актуальный Лунный календарь и размещаем перечень сезонных работ с января по декабрь.
Разделы наполняются заметками об агротехнике фруктов, ягод, цветов и овощей. Найдутся хитрые садоводческие приемы для всех климатических регионов. Когда сажать лук и чеснок в Подмосковье? Как ухаживать за виноградом в Средней полосе? Какие сорта выбрать для Дальнего востока? Как укрыть розы в Сибири?
Ежедневно мы добавляем тексты о том, как сохранить здоровье сеянцев, защитить молодые всходы от напастей и обеспечить жителей загородного участка полноценной диетой и правильным питанием. Посетители с радостью делятся наблюдениями о том, как жители парников и грядок набирают силу. Вместе ищем действенные способы эффективной борьбы с болезнями и вредителями, рассчитываем нормы подкормок и удобрений.
Хотите похвастаться самыми крупными помидорами? Выбираете лучшие образцы для засолки? Стремитесь подать к столу ранний урожай? Пробуете надежные способы избавиться от сорняков? Смело спрашивайте в рубрике «Вопрос-Ответ» и получайте ответы быстрые и точные. Эксперты со стажем, агрономы, научные сотрудники и опытные любители с гордостью познакомят с личными лайфхаками и подсказками.
Садоводы со страстью создают удивительные оазисы, наполненные красотой растений и щедрым урожаем! Расскажите, как вы поселили экзотических гостей на грядках, какие заморские новинки рискнули попробовать. Покажите фотографии и опишите наблюдения за огородом. Редакция и читатели с удовольствием узнают, что выращивают в Забайкалье и Приморье, Ленинградской и Московской области. Продаете и покупаете саженцы? Ищете редкие коллекционные семена? Размещайте частные объявления о покупке и продаже, поиске и предоставлении услуг.А вдруг найдутся помидоры-гиганты авторской селекции прямо в вашем регионе или с отправкой с Урала!
Ну, а когда захочется отдохнуть от любимого дела, заглядывайте в Полезные рецепты – для здорового тела и вкусного стола. Простые маски и кремы в домашних условиях, изысканные заготовки, салаты, компоты и шашлыки – все, чторадуетв сезон и напоминает вкус свежих плодов зимними вечерами. Антонов сад рад всем, для кого дача и земледелие – источник радости и частичка души!
Левзея лекарственная (жидкий экстракт): особенности применения
Впервые левзею начали высаживать в 1816 году в Лондонском саду. Как позже выяснилось, это травянистое альпийское растение не только имеет привлекательный внешний вид, но и обладает лечебными свойствами. Встречается в автономном округе Алтайского края, в Восточном Саяне и Южной Сибири. На высоте 2000 м растет мараловая трава, которую еще называют левзея.
Лечебные качества
В медицине используются корни, лекарственное сырье которых — чаще всего настойки, экстракты и отвары.В корневищах содержатся флавоноиды, дубильные вещества, каротин, аскорбиновая кислота, инулин, камеди, эфирное масло. Благодаря такому богатому химическому составу левзея (жидкий экстракт) может излечить человека от различных недугов, а также приумножить силы организма.
Недаром народные целители называют это растение природным адаптогеном, так как оно обладает тонизирующим, общеукрепляющим и стимулирующим действием. Рекомендован левзей (жидкий экстракт) людям, деятельность которых связана с тяжелыми физическими нагрузками. Лекарство повышает иммунитет, улучшает самочувствие, снимает усталость и стимулирует умственную работу.
Применяется при гипотонии, переутомлении, нервной возбудимости, астении и депрессии. Подготовленное сырье способствует быстрой акклиматизации перед экзаменами. Обладает сосудорасширяющими свойствами, а также нормализует кровообращение и обменные процессы. Кроме того, левзея (жидкий экстракт) помогает снизить уровень сахара в крови, поэтому рекомендуется при сахарном диабете.
С помощью этого дара природы целители борются с бессонницей, алкогольной зависимостью, чрезмерной раздражительностью и даже импотенцией.Клинические исследования доказали, что он улучшает память и концентрацию левзеи (жидкий экстракт). Цена на препарат невысокая, она колеблется в пределах 65 рублей за флакон 50 мл.
Заявление
Препарат не является лекарственным средством. Может применяться совместно с медикаментозной терапией. Назначен при:
— истощение, слабость, астения;
— физическое и умственное перенапряжение;
— стресс, депрессия;
— Реабилитация после перенесенных заболеваний;
— хронический алкоголизм;
— снижение потенции.
После 20-дневного курса нормализуется аппетит, сон, настроение. Экстракт применяют по 30 капель во время еды (трижды в день).
Кто против Левзеи?
Жидкий экстракт нельзя принимать детям, не достигшим возраста 12 лет. Препарат не рекомендуется применять при эпилепсии, аритмии, стенокардии, атеросклерозе, артериальной гипертензии, гиперчувствительности к компонентам. Воздерживаться от него необходимо беременным и кормящим женщинам. В любом случае перед применением лейзеи следует проконсультироваться с врачом.
Жидкий экстракт: отзывы потребителей
Множество положительных характеристик дает этот препарат. Восторженно отзываются об этом спортсмены и бодибилдеры. По их словам, добавка придает силы, бодрости и энергии. После его применения снимается утомляемость и раздражительность. Многие советуют использовать это средство в межсезонье, после длительного лечения и в стрессовых ситуациях.
Влияние 20-гидроксиэкдизона, экстрактов Leuzea carthamoides, дексаметазона и их комбинаций на активацию NF-κB в клетках HeLa | Журнал фармации и фармакологии
Аннотация
Objectives
Растительный стероид 20-гидроксиэкдистерон (20E) и 20E-содержащие экстракты из Leuzea carthamoides (Willd.) DC продаются с заявлением об анаболическом и иммуномодулирующем воздействии. Тем не менее, их влияние на активацию ядерного фактора каппа B (NF- κ B), ключевого игрока в иммунном ответе и судьбе клеток, и их влияние на NF- κ B-ингибирующую активность стероидных противовоспалительных препаратов. пока неизвестно.
Методы
Способность 20E, экстрактов левзеи и выбранных стероидных / нестероидных противовоспалительных препаратов влиять на активацию NF- κ B была исследована с использованием в качестве экспериментальной модели рака шейки матки человека HeLa-IL- 6 клеток, стабильно трансфицированных репортерным геном, связанным с IL-6.Влияние на жизнеспособность и пролиферацию клеток отслеживали (анализ МТТ). HPLC-DAD использовался для установления связи между химическими структурами экстрактов левзеи и их биоактивностью.
Основные выводы
20E ингибировал активацию NF- κ B (IC50 31,8 мкм), но был менее активен, чем другие метаболиты растений (ксантогумол 3,8 мкм, витаферин A 1,4 мкм). Экстракты левзеи с высоким содержанием 20E имели удовлетворительный активирующий эффект, но, напротив, некоторые экстракты с низким содержанием 20E значительно ингибировали активацию NF- κ B при IC50 в диапазоне от 3.От 5 до 6,2 мкг / мл. Комбинированные тесты подтвердили, что 20E не объясняет модуляцию NF- κ B, достигаемую экстрактами левзеи. Экстракты, но не сам 20E, показали значительную модуляцию ингибирующего действия дексаметазона NF- κ B.
Выводы
20E вряд ли является основным игроком в ингибирующих эффектах NF- κ B, проявляемых некоторыми экстрактами левзеи in vitro . В случае подтверждения in vivo следует проявлять осторожность в отношении продаваемых экстрактов левзеи, которые не стандартизированы или стандартизированы только для 20E, поскольку различные исходные материалы и экстракты могут даже вызывать противоположные эффекты.Что еще более важно, наши результаты указывают на потенциал взаимодействия левзеи со стероидными противовоспалительными препаратами.
Введение
Фитоэкдистероиды — это гидроксилированные стероиды растительного происхождения, многие из которых связаны с активностью гормона линьки насекомых. 20-гидроксиэкдистерон (20E, рис. 1) является основным представителем этой химической группы и широко распространен в царстве растений. Фитоэкдистероиды привлекли — с момента их открытия в 1960-х годах — большой научный интерес из-за их инсектицидной активности, экологической роли и потенциального применения в защите растений.Совсем недавно было предложено использование фитоэкдистероидов у животных и людей на основании их предполагаемого вмешательства в метаболические пути стероидов у млекопитающих. [1] Хотя основное внимание по-прежнему уделяется эстрогенным и анаболическим эффектам, мало опубликовано об иммуномодулирующем и противовоспалительном потенциале этих соединений. [2–5] Кроме того, в зависимости от используемых тестовых моделей были получены противоречивые результаты. Тренин и Володин [6] описали 20E как модулятор лимфоцитов и нейтрофилов человека, а Tanaguchi et al . [7] и Harmatha и др. . [8] не обнаружил противовоспалительного действия 20E у крыс и изолированных макрофагов мышей, соответственно.
Рисунок 1
20-гидроксиэкдизон (20E).
Рисунок 1
20-гидроксиэкдизон (20E).
20E является основным фитоэкдистероидом в Leuzea carthamoides (Willd.) DC. (син. Rhaponticum carthamoides (Willd.) Iljin, Asteraceae ). Основываясь на традиционном использовании левзеи, научные данные собирались с начала 1960-х годов в Советском Союзе, а затем в 1980-х годах в странах Восточной Европы, прежде чем впоследствии вызвали интерес во всем мире. [9–11] В результате были описаны различные эффекты для L. carthamoides , включая анаболические, [12,13] цитотоксические, противораковые, антиметастатические, [14,15] тонизирующие / адаптогенные [16–18] и иммуномодулирующие свойства. [19,20] Его лекарственные применения были заменены его использованием в качестве анаболического «функционального» корма и пищевой добавки. Продукты обычно основаны либо на сухом порошкообразном корне, либо на его гидроэтанольных экстрактах, и предлагаются через Интернет в качестве естественной альтернативы спорному использованию стероидов в животноводстве, а также для употребления в пищу людьми с анаболическими свойствами. [5] Многие из этих продуктов, которые, как утверждается, обладают иммуноукрепляющими свойствами вместе с анаболическим действием, не раскрывают вид, часть растения или тип используемой экстракции. Это может создавать риски, например, для пациентов, страдающих хроническими иммунными состояниями, которые могут испытывать соблазн комбинировать такие продукты со своей текущей терапией на основе стероидов без медицинского наблюдения. Интересно, что утверждается, что препараты цельного растения, в основном традиционный гидроэтанольный экстракт корня, а также препараты из надземных частей, предпочтительнее очищенных составов 20Е, которые также доступны. [21]
Ядерный фактор каппа B (NF- κ B) играет центральную роль в клеточном иммунном ответе, воспалении и судьбе клеток, и на его активацию влияют глюкокортикоиды. [22] Экдистероиды, такие как муристерон A, взаимодействуют с системой NF- κ B, демонстрируя эффекты, сравнимые с дексаметазоном и ретиноевой кислотой, что приводит к передаче сигналов апоптоза в клетках мышиной лимфомы WEHI-231. [23] Экдистероиды эргостанового типа из Polyporus umbellatus проявили сильную противовоспалительную активность в тесте на индуцированное ТРА воспаление на мышах. [24] Эти данные побудили нас исследовать влияние экстрактов 20E и левзеи на активацию in vitro NF- κ B, отдельно или в комбинации с дексаметазоном и другими известными ингибиторами NF- κ B. Насколько нам известно, это первый случай, когда влияние экстрактов 20E, а также экстрактов левзеи на активацию NF- κ B было изучено и дополнительно квалифицировано путем сравнения и комбинации с другими модуляторами NF- κ B. Для этого была выбрана хорошо зарекомендовавшая себя люминометрическая тест-система с использованием репортерного гена в стабильно трансфицированных клетках HeLa.NF- κ B регулирует экспрессию многих генов, которые играют роль в иммунитете, включая ген, кодирующий интерлейкин-6, плейотропный цитокин. Либерман и Балтимор обнаружили, что промоторная область гена интерлейкина-6 (IL-6) имеет предполагаемый сайт связывания NF- κ cB после обнаружения, что фрагмент промотора IL-6, содержащий этот сайт, специфически связывает высокоочищенный NF — Белок κ B и белок NF-cB в ядерных экстрактах клеток Jurkat, индуцированных сложным эфиром форбола. [25] Тот же самый форбол-12-миристат-13-ацетат (PMA) -индуцируемый ядерный фактор связывается с промотором IL-6 и сайтом иммуноглобулина κ B, в результате чего HeLa luc (Hela-IL-6 ) модель популярного инструмента в иммунологических исследованиях. Цитотоксичность и пролиферативные эффекты были определены с помощью анализа MTT, а методология HPLC-DAD отпечатков пальцев, которая включает определение 20E, была разработана для картирования химических структур в продуктах, полученных из левзеи, и выявления связей между составом и биоактивностью.
Материалы и методы
Стандартные вещества, растительный материал и экстракты
20-гидроксиэкдизон (20E), партенолид, дексаметазон, генистеин, ксантогумол, хлорогеновая кислота и кофейная кислота (все Sigma-Aldrich, Великобритания) служили эталонными стандартами. Витаферин A и WF-1 (5,6-эпокси-1-оксовита-2,14,24-триенолид, выделенный из Withania frutescens (L.) Pauquy) были любезно предоставлены доктором Надей Якобо (Школа фармации, Лондон).
Сухие травы и корнеплоды трехлетнего растения Leuzea carthamoides , происходящего из Исследовательской станции экологического сельского хозяйства Миккели (Финляндия) и продаваемого под торговой маркой Lujza , выращивались в районе Рорбах в Верхней Австрии и были предоставлены г-на Хуберта Фолкингера (Путцляйнсдорф, Австрия). Ваучерный образец (№ 658.291) был депонирован в гербарии Biologiezentrum der Oberösterreichischen Landesmuseen (Линц, Австрия). Растения выращивали в период с 2002 по 2005 год, собирали урожай в июне 2005 года и сушили при комнатной температуре.Перед экстракцией высушенный корневой материал разрезали на кусочки длиной не более 10 мм. С надземных частей — далее называемых травой — все основные стебли (диаметром> 10 мм) были удалены перед разрезанием на куски длиной 10 мм.
Корень и трава дважды мацерировали метанолом или 60% этанолом в течение 2 дней соответственно. Неочищенные метанольные экстракты фильтровали и упаривали в вакууме досуха ( R-Me , H-Me) . Метанольный экстракт травы фракционировали градиентным разделением жидкость / жидкость между водой и органическими растворителями в порядке гексана, дихлорметана и этилацетата в три этапа каждая.После объединения, роторного испарения и окончательной сушки в атмосфере азота до постоянного веса они дали три фракции ( H-Me-hex , H-Me-diclo , H-Me-etac ). 60% -ные экстракты этанола восстанавливали в вакууме до тех пор, пока большая часть этанола не выпарилась. К оставшемуся водному слою добавляли этилацетат. Этот процесс повторяли до тех пор, пока фракция этилацетата не оставалась прозрачной, после чего объединенные фракции сушили в вакууме ( R-Et60-etac, H-Et60-etac ).Кроме того, оставшаяся водная фракция корня ( R-Et60-wa ) была лиофилизирована и включена в исследование.
Культура клеток
Клеточная линия HeLa-IL-6 была любезно предоставлена доктором М. Л. Линхардом Шмитцем, Университет Гиссена, Германия). Он содержит плазмиду, сконструированную, как описано Plaisance et al. , выше гена люциферазы, вместе с плазмидой отбора pMEP4. Эта конструкция включает белок, связывающий сигнальную последовательность рекомбинации, Jkappa, который конститутивно связан с сайтом NF-kappaB промотора интерлейкина-6 и действует как негативный регуляторный фактор. [26]
Клетки поддерживали в среде DMEM (Invitrogen, UK) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки и антибиотиков (полная среда) при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO 2 и разделяли при слиянии. Клеткам позволяли расти в среде до слияния 60–80% перед сбором для анализов MTT и NF- κ B. Плотность клеток доводили до 7,5 × 10 4 клеток / мл в среде. Используя 96 (24) луночные планшеты, 200 мкл (500 мкл) ресуспендированной клеточной суспензии на лунку инкубировали в течение 18–24 ч при 37 ° C с 5% CO 2 , влажностью 95%.
Анализы жизнеспособности и пролиферации клеток
Для анализа МТТ [3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолийбромид], впервые описанного Мосманном в 1983 году, [27] образцов, растворенных в основном в ДМСО или метаноле, разбавляли в среды для начальной концентрации 50 мкг / мл для экстрактов и 100 мкм для отдельных соединений. После удаления старой среды в каждую тестовую лунку добавляли 100 мкл среды, содержащей максимум 0,5% растворителя, исключая колонки 2 (200 мкл среды в качестве контроля), 3 (холостой пробы, 200 мкл среды без МТТ) и 4 (200 мкл тестового раствора в качестве начальная концентрация).Затем отбирали 100 мкл из колонки 4 и проводили двойные разведения от колонки 5 к колонке 11. После инкубации в течение 6 (12, 24) часов, удаления старой среды и промывки PBS (Invitrogen, UK), 150 мкл раствора МТТ ( SIGMA, 0,5 мг / мл в PBS), и планшеты инкубировали еще 90 мин. Раствор МТТ заменяли 200 мкл смеси ДМСО (10%) / изопропанол (90%), планшеты оборачивали алюминиевой фольгой и оставляли на 10 мин перед ресуспендированием и измерением с использованием фотометрического режима люминометра Anthos Lucy 1. при 570 нм (эталонный фильтр при 620 нм, ASYS, Ойгендорф, Австрия).Все показания были скорректированы путем вычитания холостого поглощения. Скорректированные значения оптической плотности конвертировали в процентные значения роста по сравнению с необработанным контролем. Жизнеспособность менее 85% контроля была определена как токсичная, жизнеспособность более 115% — как пролиферативная. Токсические эффекты выражали двумя способами: в виде максимальной нетоксичной концентрации (MNTC = 85% от соответствующего контроля) и в виде значения IC50. Образцы тестировали в трех экземплярах.
Анализ пролиферации выполняли аналогичным образом с увеличенным числом клеток с использованием 24-луночных планшетов вместо 96-луночных планшетов.
NF-
κ B Репортерный анализ IL-6 КлеткиHela-IL-6 выращивали до слияния в 24-луночных планшетах, среду заменяли средой, не содержащей сыворотки, и с максимальной долей растворителя 2% (0,5% в случае ДМСО) добавляли к образцам. После 40 мин инкубации добавляли стимулятор (PMA, 50 нг / мл, TNF- α 10 нг / мл), и клетки дополнительно инкубировали (37 ° C) в течение 6 или 24 часов. После лизиса с помощью 70 мл реагента для лизиса (Promega) 30 мкл из каждой лунки добавляли в двух экземплярах в белый 96-луночный планшет.Пятьдесят микролитров свежеприготовленного реагента люциферазы (Promega) добавляли автоматически с использованием системы люминометра Anthos Lucy 1. После времени реакции 10 с были записаны полученные люминометрические данные. Положительный (стимулированные только с помощью растворителя клетки) и отрицательный (клетки без стимуляции) контроли были включены в каждую чашку для расчета разницы между отрицательным контролем и образцом (или положительным контролем) в виде процента от положительного контроля. Средние значения были рассчитаны из двух показаний на образец, двух образцов на планшет, трех планшетов на эксперимент и двух независимых экспериментов.В дополнение к значениям IC50 значения MNEC были рассчитаны как 85% от положительного контроля. Это облегчило сравнение диапазона активности с учетом того, что ингибирование иногда не достигало 50% от контроля или проявляло первые цитотоксические эффекты. Для сравнения образцов, которые не ингибировали, но дополнительно активировали NF- κ B, по аналогии с подходом IC50 были рассчитаны концентрации, которые вызывали повышение активации NF- κ B на 50% по сравнению с положительным контролем (AC150).Порог MNEC был установлен на уровне 115% от положительного контроля.
Комбинированные эксперименты
Чтобы изучить возможную роль 20E в общем эффекте экстрактов левзеи, 20E объединяли с сесквитерпенлактон-партенолидом, хлорогеновой и кофейной кислотами (активация PMA). Экстракты также тестировались в сочетании с различными концентрациями 20E (активация PMA и TNF- α ).
Потенциал взаимодействия 20E исследовали путем измерения комбинированного действия 20E и стандартного глюкокортикоидного дексаметазона после активации PMA и TNF- α .Соответственно, выбранные экстракты левзеи были объединены с дексаметазоном.
Статистический анализ
При необходимости, проводились попарные сравнения конкретных видов лечения с контрольным лечением в соответствии с планом эксперимента, как указано в подписях к рисункам. Соответствующими контрольными обработками были либо контроль носителя, либо, в случае экспериментов с комбинациями, монотерапия одним из партнеров комбинации в соответствующей концентрации. P <0,05 для двух разных монотерапий.
Анализ ВЭЖХ
Используя систему HPLC Waters ™ 900, детектор Waters ™ 996 PDA и устройство автоматического пробоотборника Waters ™ 717plus, управляемое программным обеспечением EmPower ™, был применен 80-минутный градиентный метод с использованием смесей растворителей воды (TFA 0,1%), воды — смесь ацетонитрила (65:35, TFA 0,1%) и ацетонитрила с расходом 0,9 мл / мин при 25 ° C. Система была оборудована колонкой Agilent Zorbax RX-C18 (5 мкм 4.6 × 250 мм Highchrom, Великобритания) и защитную колонку Nova-Pak® C8 3,9 × 20 мм (Waters UK Elstree, UK). Образцы (начальная концентрация экстракта 10 мг / мл, стандартные эталоны 1 мг / мл) разбавляли метанолом или смесями метанол / вода, иногда используя несколько капель ДМСО для достижения полного растворения. Перед использованием все образцы фильтровали через шприцевой фильтр Acrodisc® 0,45 мм (Fisher Scientific, Лафборо, Великобритания). Каждый раствор образца вводили в трех экземплярах (30 мкл).
По отпечатку пальца были записаны все основные пики, т.е.е. те, которые представляют более 1% от общей площади пика при интегрировании при 220 или 256 нм, и были получены качественные, полуколичественные и количественные данные. Качественный профиль: пики классифицировали в соответствии с их УФ-спектрами (210–400 нм). Помимо типичных спектров производных кофейной кислоты (CAF), флавоноидов (FLA) и экдистероидов, встречающихся у левзеи, включая характерный циклогексеноновый хромофор (ECD), мы обнаружили четыре других доминирующих типа спектров, которые были классифицированы в группы от A до D.Наконец, все другие соединения со спектрами, не соответствующими ни одному из предыдущих классов, были включены в группу «Прочие» (Таблица 1).
Полуколичественный профиль: для сравнения отпечатков пальцев соотношение между площадями под кривой (AUC) регистрировали при 220 нм, чтобы оценить долю классов соединений в экстракте / фракции.
Количественное определение: 20E использовали в качестве стандарта для расчета общего содержания фитоэкдистероидов (общий ECD), хлорогеновой кислоты для расчета общего содержания производных кофейной кислоты (общего CAF), а кверцетин использовали для определения общего содержания флавоноидов ( общий FLA) (Таблица 1).
Результаты
Влияние чистого 20E на жизнеспособность клеток и активацию NF-
κ B20E сравнивали с синтетическими стероидами дексаметазоном и мифепристоном (RU286), природными соединениями со стероидной активностью (генистеин, ксантогумол, витаферин A, WF-1), известным NF- κ B-ингибирующим сесквитерпеновым партенолидом, а также кофеином. и хлорогеновые кислоты. Эффект только тестируемых соединений (без стимуляции) на жизнеспособность клеток (MTT) клеток HeLa-IL-6 измеряли через 6 и 24 часа (таблица 2).20E имел значение IC50 ниже, чем у дексаметазона, но выше, чем у мифепристона. Очевидно, более цитотоксичными оказались два витаферина, партенолид и ксантогумол, в то время как генистеин и кофейная кислоты не оказали большого влияния на жизнеспособность клеток. Не наблюдалось измеримого пролиферативного эффекта на клетки HeLa при обработке 20E в стандартной процедуре МТТ с использованием 96-луночных планшетов.
Таблица 2Влияние 20E, дексаметазона и эталонных стандартов на жизнеспособность клеток после 6 и 24 ч инкубации (анализ МТТ, диапазон тестирования 0.4–100 мкм) и на PMA-активированном NF- κ B (через 6 часов после стимуляции), определенном в клетках HeLa-IL-6
| . | Жизнеспособность клеток (MTT) . | NF- κ B ингибирование . | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 6 часов . | 24 ч . | 6 часов . | |||||||
| MNTC a . | IC50 . | MNTC и . | IC50 . | MNEC b . | IC50 . | ||||
| 20E | 34,2 ± 4,4 | 69,9 ± 8,3 | 29,2 ± 3,0 | 59,4 ± 7,7 | 6,6 ± 2,4 | 31,8 ± 5,2 | |||
| Dexamet | 25,1 ± 3,0 | > 100 | 7.1 ± 0,2 | 35,2 ± 2,7 | |||||
| Мифепристон | 6,3 ± 0,7 | 32,0 ± 6,6 | 2,7 ± 1,2 | 12,5 ± 1,4 | Дальнейшая активация | ||||
| Генистеин | 9032 100 | 15,7 ± 0,9 | 98,5 ± 5,8 | 10,4 ± 0,3 | 43,4 ± 8,5 | ||||
| Ксантогумол | 7,4 ± 0,4 | 24,8 ± 2,9 | 2,2 ± 0.4 | 5,8 ± 0,7 | 2,5 ± 0,5 | 3,8 ± 1,7 | |||
| Витхаферин А | 5,1 ± 1,0 | 9,6 ± 1,4 | 1,2 ± 0,3 | 0,24 ± 0,11 | 0,25 ± 0,04 ± 0,3 | ||||
| WF-1 | 10,1 ± 1,2 | 18,2 ± 2,0 | 2,5 ± 0,7 | 0,35 ± 0,08 | 0,91 ± 0,07 | 5,2 ± 1,4 | |||
| парфенолид | 0 ± 0,3 | 20,7 ± 4,1 | 2,8 ± 0,5 | 4,6 ± 1,9 | 0,8 ± 0,1 | 3,2 ± 2,2 | |||
| Кофейная кислота | > 100 | > 100 | 80,0 ± 2,7 | 100 | 48,6 ± 4,5 | 96,8 ± 9,0 | |||
| Кислота хлорогеновая | 84,7 ± 7,6 | > 100 | 72,6 ± 5,9 | > 100 | 37,6 ± 2,7 | ||||
| . | Жизнеспособность клеток (MTT) . | NF- κ B ингибирование . | |||||||
| 6 часов . | 24 ч . | 6 часов . | |||||||
| MNTC a . | IC50 . | MNTC и . | IC50 . | MNEC b . | IC50 . | ||||
| 20E | 34,2 ± 4,4 | 69,9 ± 8,3 | 29,2 ± 3,0 | 59,4 ± 7,7 | 6,6 ± 2,4 | 31,8 ± 5,2 | |||
| Dexamet | 25,1 ± 3,0 | > 100 | 7,1 ± 0,2 | 35,2 ± 2,7 | |||||
| Мифепристон | 6,3 ± 0,7 | 32,0 ± 6.6 | 2,7 ± 1,2 | 12,5 ± 1,4 | Дальнейшая активация | ||||
| Genistein | 47,6 ± 3,2 | > 100 | 15,7 ± 0,9 | 98,5 ± 5,8 | 10,4 ± 0,3 | ||||
| Ксантохумол | 7,4 ± 0,4 | 24,8 ± 2,9 | 2,2 ± 0,4 | 5,8 ± 0,7 | 2,5 ± 0,5 | 3,8 ± 1,7 | |||
| Витаферин А | 5.1 ± 1,0 | 9,6 ± 1,4 | 1,2 ± 0,3 | 0,24 ± 0,11 | 0,25 ± 0,04 | 1,4 ± 0,3 | |||
| WF-1 | 10,1 ± 1,2 | 18,2 ± 2,0 | 2,5 | 0,35 ± 0,08 | 0,91 ± 0,07 | 5,2 ± 1,4 | |||
| Партенолид | 3,0 ± 0,3 | 20,7 ± 4,1 | 2,8 ± 0,5 | 4,6 ± 1,9 | 0,83 ± 0,1 | 2,2||||
| Кофейная кислота | > 100 | > 100 | 80.0 ± 2,7 | > 100 | 48,6 ± 4,5 | 96,8 ± 9,0 | |||
| Хлорогеновая кислота | 84,7 ± 7,6 | > 100 | 72,6 ± 5,9 | > 100 | 6632337,6 ± 11,8 | ||||
Влияние 20E, дексаметазона и эталонных стандартов на жизнеспособность клеток через 6 и 24 ч инкубации (анализ MTT, диапазон испытаний 0,4–100 мкм) и на PMA-активированный NF- κ B (6 ч после стимуляции), определенная в клетках HeLa-IL-6
| . | Жизнеспособность клеток (MTT) . | NF- κ B ингибирование . | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 6 часов . | 24 ч . | 6 часов . | ||||
| MNTC a . | IC50 . | MNTC и . | IC50 . | MNEC b . | IC50 . | |
| 20E | 34,2 ± 4,4 | 69,9 ± 8,3 | 29,2 ± 3,0 | 59,4 ± 7,7 | 6,6 ± 2,4 | 31,8 ± 5,2 |
| Dexamet | 25,1 ± 3,0 | > 100 | 7,1 ± 0,2 | 35,2 ± 2,7 | ||
| Мифепристон | 6,3 ± 0,7 | 32,0 ± 6.6 | 2,7 ± 1,2 | 12,5 ± 1,4 | Дальнейшая активация | |
| Genistein | 47,6 ± 3,2 | > 100 | 15,7 ± 0,9 | 98,5 ± 5,8 | 10,4 ± 0,3 | |
| Ксантохумол | 7,4 ± 0,4 | 24,8 ± 2,9 | 2,2 ± 0,4 | 5,8 ± 0,7 | 2,5 ± 0,5 | 3,8 ± 1,7 |
| Витаферин А | 5.1 ± 1,0 | 9,6 ± 1,4 | 1,2 ± 0,3 | 0,24 ± 0,11 | 0,25 ± 0,04 | 1,4 ± 0,3 |
| WF-1 | 10,1 ± 1,2 | 18,2 ± 2,0 | 2,5 | 0,35 ± 0,08 | 0,91 ± 0,07 | 5,2 ± 1,4 |
| Партенолид | 3,0 ± 0,3 | 20,7 ± 4,1 | 2,8 ± 0,5 | 4,6 ± 1,9 | 0,83 ± 0,1 | 2,2|
| Кофейная кислота | > 100 | > 100 | 80.0 ± 2,7 | > 100 | 48,6 ± 4,5 | 96,8 ± 9,0 |
| Хлорогеновая кислота | 84,7 ± 7,6 | > 100 | 72,6 ± 5,9 | > 100 | 6632337,6 ± 11,8 | |
| . | Жизнеспособность клеток (MTT) . | NF- κ B ингибирование . | ||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 6 часов . | 24 ч . | 6 часов . | ||||||||||
| MNTC a . | IC50 . | MNTC и . | IC50 . | MNEC b . | IC50 . | |||||||
| 20E | 34,2 ± 4,4 | 69,9 ± 8,3 | 29,2 ± 3,0 | 59.4 ± 7,7 | 6,6 ± 2,4 | 31,8 ± 5,2 | ||||||
| Дексаметазон | > 100 | > 100 | 25,1 ± 3,0 | > 100 | 7,1 ± 0,2 | 2,7 Mife | 6,3 ± 0,7 | 32,0 ± 6,6 | 2,7 ± 1,2 | 12,5 ± 1,4 | Дальнейшая активация | |
| Genistein | 47,6 ± 3,2 | > 100 | 15.7 ± 0,9 | 98,5 ± 5,8 | 10,4 ± 0,3 | 43,4 ± 8,5 | ||||||
| Ксантогумол | 7,4 ± 0,4 | 24,8 ± 2,9 | 2,2 ± 0,4 | 5,8 ± 0,7 | 2,5 3,8 ± 1,7 | |||||||
| Витаферин A | 5,1 ± 1,0 | 9,6 ± 1,4 | 1,2 ± 0,3 | 0,24 ± 0,11 | 0,25 ± 0,04 | 1,4 ± 0,3 | ||||||
| WF-11 ± 1,2 | 18,2 ± 2,0 | 2,5 ± 0,7 | 0,35 ± 0,08 | 0,91 ± 0,07 | 5,2 ± 1,4 | |||||||
| Парфенолид | 3,0 ± 0,3 | 20,7 ± 4,1 | 2,8 4,6 ± 1,9 | 0,8 ± 0,1 | 3,2 ± 2,2 | |||||||
| Кофейная кислота | > 100 | > 100 | 80,0 ± 2,7 | > 100 | 48,6 ± 4,5 | 96,8 ± 9,0 | 9029 Хлорогеновая кислота84.7 ± 7,6 | > 100 | 72,6 ± 5,9 | > 100 | 37,6 ± 2,7 | 66,0 ± 11,8 |
Принимая во внимание результаты МТТ, 20E испытывали при пяти концентрациях (2, 5, 10, 25 и 50 мкм) на модификации PMA, вызвавшей активацию NF- κ B через 6 часов. Опять же, другие синтетические и природные стероидные соединения, а также партенолид, кофейная кислота и хлорогеновая кислота были протестированы в качестве эталонов (Таблица 2). Наиболее сильное ингибирование NF- κ B проявляли партенолид, ксантогумол и витанолиды (IC50 между 1.4 и 5,2 мкм и MNEC 0,25–2,5 мкм), в то время как 20E был сопоставим с дексаметазоном и генистеином, демонстрируя умеренное, но устойчивое ингибирование со значениями IC50 между 32–43 мкм и MNEC 6,6–10,4 мкм. Он также имел аналогичные кривые «концентрация-ответ», показывающие небольшое увеличение активности NF- κ B ниже 5 мкм и явное снижение активации NF- κ B при концентрациях выше 10 мкм. Однако кривая доза-ответ обычно выходила на плато при приближении к 50% -ному ингибированию, в то время как токсические эффекты начинались примерно при 50 мкм.Поразительно, но мифепристон дал противоречивые результаты в семи независимых экспериментах, демонстрируя иногда ингибирующие, но часто активирующие эффекты. С другой стороны, кофейная и хлорогеновая кислоты лишь незначительно ингибировали NF- κ B. Стало очевидно, что для сильных ингибиторов NF- κ B интервал между эффективным ингибированием NF- κ B и токсическими эффектами был очень узким. наша клеточная модель. Все нетоксичные концентрации, вызывающие ингибирование NF- κ B через 6 часов, становились токсичными через 24 часа.
Влияние экстрактов корня левзеи и трав на жизнеспособность клеток и активацию NF-
κ BЭкстракты и фракции корня левзеи и травы были протестированы на их влияние на жизнеспособность клеток с использованием максимальных концентраций 100 мкг / мл после 24 ч инкубации в соответствии со стандартной процедурой МТТ в 96-луночных планшетах (таблица 3). Только два экстракта, H-Me-diclo и H-Et60-etac, отрицательно повлияли на жизнеспособность клеток со значениями IC50 4,2 и 16 мкг / мл соответственно.
Таблица 3 Выход экстракции, влияние на жизнеспособность клеток и активацию NF- κ B и основанный на ВЭЖХ / DAD количественный профиль экстрактов из корня (R) и травы (H) Leuzea carthamoides
| . | Доходность a (%) . | Влияние на жизнеспособность клеток b (MNTC) (мкг / мл) . | Влияние на жизнеспособность клеток c (IC50) (мкг / мл) . | Влияние на NF- κ B d (IC50 или AC150) (мкг / мл) . | Всего CAF e (вычислено как CLO) (мг / г) . | Всего FLA f (вычислено как QUE) (мг / г) . | Всего ECD г (вычислено как 20E) (мг / г) . | 20E (мг / г) . |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| R-Me | 9,49 | 91,1 ± 12,7 | > 100 | Активация | 181,2 ± 7,13 | 2,1 ± 0,42 | 32,2 ± 2,25 | 84205 2,5 |
| R-Et60-etac | 4,93 | 29,1 ± 11,3 | 84,3 ± 14,2 | Активация | 378,0 ± 13,02 | <0,5 | 46,9 ± 3,25 | 29.6 ± 5,30 |
| 5,2 ± 2,0 | ||||||||
| R-Et60-wa | 16,54 | > 100 | > 100 | Активация | 66,3 ± 7,63 | 0,5 ± 0,28 | 9120 1,5 12,5 ± 1,25||
| 125 ± 2,2 | ||||||||
| H-Me | 9,94 | 41,2 ± 5,3 | 87,5 ± 3,5 | Ингибирование | 21,1 ± 1,19 | 45,5 ± 2,06 9032.8 ± 0,52 | н.о. ч | |
| 15,5 ± 1,4 | ||||||||
| H-Me-hex | 1,93 | 35,1 ± 21,1 | 76,0 ± 18,4 | Нет эффекта | 4,7 ± 0,52 | 1,4 ± 0,28 4,53 | <0,5 | |
| H-Me-diclo | 0,83 | 1,9 ± 0,2 | 4,2 ± 0,5 | Ингибирование | 2,5 ± 0,19 | 20,7 ± 1,50 | 5.7 ± 0,71 | <0,5 |
| 5,9 ± 1,6 | ||||||||
| H-Me-etac | 0,85 | 54,5 ± 9,2 | 91,1 ± 12,7 | Нет эффекта | 56,6 ± 2,07 | <0,5 | nd ч | |
| H-Et60-etac | 3,48 | 7,3 ± 5,9 | 16,3 ± 2,8 | Ингибирование | 61,6 ± 0,90 | 416,8 ± 35,3 | 83.3 ± 6,83 | н.о. ч |
| 12,1 ± 0,8 |
| . | Доходность a (%) . | Влияние на жизнеспособность клеток b (MNTC) (мкг / мл) . | Влияние на жизнеспособность клеток c (IC50) (мкг / мл) . | Влияние на NF- κ B d (IC50 или AC150) (мкг / мл) . | Всего CAF e (вычислено как CLO) (мг / г) . | Всего FLA f (вычислено как QUE) (мг / г) . | Всего ECD г (вычислено как 20E) (мг / г) . | 20E (мг / г) . |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| R-Me | 9,49 | 91,1 ± 12,7 | > 100 | Активация | 181.2 ± 7,13 | 2,1 ± 0,42 | 32,2 ± 2,25 | 21,1 ± 0,98 |
| 84 ± 2,5 | ||||||||
| R-Et60-etac | 4,93 | 29,1 ± 11,3 | 14,2 9032378,0 ± 13,02 | <0,5 | 46,9 ± 3,25 | 29,6 ± 5,30 | ||
| 5,2 ± 2,0 | ||||||||
| R-Et60-wa | 16,54 | > 100324 | 66.3 ± 7,63 | 0,5 ± 0,28 | 13,0 ± 1,58 | 12,5 ± 1,25 | ||
| 125 ± 2,2 | ||||||||
| H-Me | 9,94 | 41,2 ± 5,3 | 9032 ± 3,5 21,1 ± 1,19 | 45,5 ± 2,06 | 11,8 ± 0,52 | nd h | ||
| 15,5 ± 1,4 | ||||||||
| H-Me-шестигранник | 1,93 | 35,1 ± 21,1 | 76.0 ± 18,4 | Нет эффекта | 4,7 ± 0,52 | 1,4 ± 0,28 | 35,4 ± 4,53 | <0,5 |
| H-Me-diclo | 0,83 | 1,9 ± 0,2 | 9032 ± 0,5 Ингибирование2,5 ± 0,19 | 20,7 ± 1,50 | 5,7 ± 0,71 | <0,5 | ||
| 5,9 ± 1,6 | ||||||||
| H-Me-etac | 0,85 | 54,5 12323 9032,17 | Нет эффекта | 56,6 ± 2,07 | 289,1 ± 23,78 | <0,5 | н.о. ч | |
| H-Et60-etac | 3,48 | 7,3 ± 5,9 | 16,3 ± 2,8 | Ингибирование | 61,6 ± 0,90 | 416,8 ± 35,3 | 83,3 ± 620,83 n ч | |
| 12,1 ± 0,8 |
Выход экстракции, влияние на жизнеспособность клеток и активацию NF- κ B и основанный на ВЭЖХ / DAD количественный профиль экстрактов из корня (R) и травы ( H) Leuzea carthamoides
| . | Доходность a (%) . | Влияние на жизнеспособность клеток b (MNTC) (мкг / мл) . | Влияние на жизнеспособность клеток c (IC50) (мкг / мл) . | Влияние на NF- κ B d (IC50 или AC150) (мкг / мл) . | Всего CAF e (расч.как CLO) (мг / г) . | Всего FLA f (вычислено как QUE) (мг / г) . | Всего ECD г (вычислено как 20E) (мг / г) . | 20E (мг / г) . | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| R-Me | 9,49 | 91,1 ± 12,7 | > 100 | Активация | 181,2 ± 7,13 | 2,1 ± 0.42 | 32,2 ± 2,25 | 21,1 ± 0,98 | |
| 84 ± 2,5 | |||||||||
| R-Et60-etac | 4,93 | 29,1 ± 11,3 | 84,3 ± 14,2 | 205 | 205 <0,5 | 46,9 ± 3,25 | 29,6 ± 5,30 | ||
| 5,2 ± 2,0 | |||||||||
| R-Et60-wa | 16,54 | > 100 | > 100 | Активация 66 | Активация 66 | 3 ± 7,63 | 0,5 ± 0,28 | 13,0 ± 1,58 | 12,5 ± 1,25 |
| 125 ± 2,2 | |||||||||
| H-Me | 9,94 | 41,2 ± 5,3 | 9032 ± 3,5 21,1 ± 1,19 | 45,5 ± 2,06 | 11,8 ± 0,52 | nd h | |||
| 15,5 ± 1,4 | |||||||||
| H-Me-шестигранник | 1,93 | 35,1 ± 21,1 | 76.0 ± 18,4 | Нет эффекта | 4,7 ± 0,52 | 1,4 ± 0,28 | 35,4 ± 4,53 | <0,5 | |
| H-Me-diclo | 0,83 | 1,9 ± 0,2 | 9032 ± 0,5 Ингибирование2,5 ± 0,19 | 20,7 ± 1,50 | 5,7 ± 0,71 | <0,5 | |||
| 5,9 ± 1,6 | |||||||||
| H-Me-etac | 0,85 | 54,5 12323 9032,17 | Нет эффекта | 56,6 ± 2,07 | 289,1 ± 23,78 | <0,5 | н.о. ч | ||
| H-Et60-etac | 3,48 | 7,3 ± 5,9 | 16,3 ± 2,8 | Ингибирование | 61,6 ± 0,90 | 416,8 ± 35,3 | 83,3 ± 620,83 n ч | ||
| 12,1 ± 0,8 |
| . | Доходность a (%) . | Влияние на жизнеспособность клеток b (MNTC) (мкг / мл) . | Влияние на жизнеспособность клеток c (IC50) (мкг / мл) . | Влияние на NF- κ B d (IC50 или AC150) (мкг / мл) . | Всего CAF e (вычислено как CLO) (мг / г) . | Всего FLA f (расч.как QUE) (мг / г) . | Всего ECD г (вычислено как 20E) (мг / г) . | 20E (мг / г) . |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| R-Me | 9,49 | 91,1 ± 12,7 | > 100 | Активация | 181,2 ± 7,13 | 2,1 ± 0,42 | 32,2 ± 2,25 | 84205 2,5 |
| R-Et60-etac | 4.93 | 29,1 ± 11,3 | 84,3 ± 14,2 | Активация | 378,0 ± 13,02 | <0,5 | 46,9 ± 3,25 | 29,6 ± 5,30 |
| 5,2 ± 2,0 | 16,54 | > 100 | > 100 | Активация | 66,3 ± 7,63 | 0,5 ± 0,28 | 13,0 ± 1,58 | 12,5 ± 1,25 |
| 125 ± 2,2 | 41,2 ± 5,3 | 87,5 ± 3,5 | Ингибирование | 21,1 ± 1,19 | 45,5 ± 2,06 | 11,8 ± 0,52 | н.о. ч | |
| 15,5 ± 1,4 | ||||||||
| H-Me-hex | 1,93 | 35,1 ± 21,1 | 76,0 ± 18,4 | Нет эффекта | 4,7 ± 0,52 | 1,4 ± 0,28 4,53 | <0,5 | |
| H-Me-diclo | 0.83 | 1,9 ± 0,2 | 4,2 ± 0,5 | Ингибирование | 2,5 ± 0,19 | 20,7 ± 1,50 | 5,7 ± 0,71 | <0,5 |
| 5,9 ± 1,6 | ||||||||
| H- | 0,85 | 54,5 ± 9,2 | 91,1 ± 12,7 | Нет эффекта | 56,6 ± 2,07 | 289,1 ± 23,78 | <0,5 | nd ч |
| H-Et60-etac | 3.48 | 7,3 ± 5,9 | 16,3 ± 2,8 | Ингибирование | 61,6 ± 0,90 | 416,8 ± 35,3 | 83,3 ± 6,83 | н.о. ч |
| 12,1 ± 0,8 |
Для проверки возможного пролиферативного эффекта анализ МТТ был повторен с увеличенным числом клеток с использованием 24-луночных планшетов (с плотностью клеток, как в NF- κ B). Через 12 и 24 часа не наблюдалось значительного увеличения жизнеспособности митохондрий, что указывает на увеличение количества клеток для любого из образцов (данные не показаны).
В соответствии с этими результатами экстракты корней и трав были затем протестированы на их способность изменять индуцированную PMA активацию NF- κ B в концентрациях, не влияющих только на жизнеспособность клеток (рис. 2). Все три экстракта корня активировали NF- κ B по сравнению с контролем (значения AC150: R-Me, 84 мкг / мл; R-Et60-etac, 5,2 мкг / мл; R-Et60-wa, 125 мкг / мл. ).
Рисунок 2
Влияние экстрактов корня левзеи и трав на PMA-индуцированное ингибирование NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 (в процентах относительно контроля носителя).Среднее значение трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Обозначает значимость ( P <0,05).
Рисунок 2
Влияние экстрактов корня левзеи и трав на индуцированное PMA ингибирование NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 (процентное отношение к контролю с носителем). Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Обозначает значимость ( P <0,05).
Что касается экстрактов трав, H-Me показал зависимое от концентрации ингибирование NF- κ B (IC50 15.5 мкг / мл). Две его фракции не имели эффекта (гексан, этилацетат), тогда как фракция дихлорметана имела IC50 5,9 мкг / мл с более сильным ингибированием при более высоких концентрациях, чем неочищенный экстракт, но активирующим действием при концентрациях ниже 1 мкг / мл. H-Et60-etac также ингибируется в зависимости от концентрации (IC50 12,1 мкг / мл).
Комбинированное воздействие экстрактов 20E и левзеи на активацию NF-
κ BДля оценки вклада 20E, основного экдистероида левзеи, в общий эффект экстрактов левзеи, 20E в трех концентрациях (5, 10, 25 мкм) были добавлены в корень NF- κ , активирующий B экстракты и ингибирующие экстракты трав.Концентрации экстракта были близки к их IC50 (для ингибирующих экстрактов) или AC150 (для активирующих экстрактов) (рис. 3). В то время как один 20E умеренно снижал активацию NF- κ B, после стимуляции как PMA, так и TNF α не наблюдалось устойчивой значимой или дозозависимой модификации эффектов экстрактов ни для активирующих экстрактов корней, ни для ингибирующих трав. экстракты. Неожиданно оказалось, что в некоторых случаях после совместной инкубации экстракта / 20E были обнаружены более высокие уровни NF- κ B, чем после инкубации только экстракта.
Рисунок 3
Влияние экстрактов левзеи отдельно и в сочетании с 20E (5, 10 и 25 мкм) на PMA- (a) и TNF α — (b), индуцированную активацию NF- κ B в HeLa-IL -6 ячеек. Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним экстрактом (анова с последующим тестом Бонферрони).
Рисунок 3
Влияние экстрактов левзеи отдельно и в сочетании с 20E (5, 10 и 25 мкм) на PMA- (a) и TNF α — (b), индуцированное активацией NF- κ B в HeLa- Клетки ИЛ-6.Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним экстрактом (анова с последующим тестом Бонферрони).
Чтобы установить комбинированные эффекты определенных классов соединений, присутствующих в экстрактах левзеи, а именно сесквитерпенелактонов и фенолкарбоновых кислот, 20E был объединен с партенолидом ингибитора NF- κ B в качестве модели сесквитерпенелактона [28,29] , а также с кофейной и хлорогеновой кислотой из-за характерного присутствия фенолкарбоновых кислот в наших экстрактах левзеи (рис. 4).На ингибирующие эффекты партенолида не повлияло, в то время как добавление 20E в концентрациях от 5 до 25 мкм увеличивало NF- κ B умеренно при обработке кофеиновой и хлорогеновой кислотой через 6 часов после стимуляции PMA. Никаких изменений не наблюдалось при измерении через 6 и 24 часа после стимуляции TNF α (данные не показаны). указывает на значимость ( P <0.05) комбинированного лечения по сравнению с одним только 20E (ANOVA с последующим тестом Бонферрони).
Во всех комбинированных экспериментах первые токсические эффекты наблюдались при использовании 20E в концентрациях 50 мкм. Следовательно, эти результаты не были учтены, поскольку они потенциально могут повлиять на люминометрические показания.
Комбинированное действие дексаметазона с экстрактами 20E или левзеи на NF-
κ BЧтобы установить возможные фармакодинамические взаимодействия между 20E, экстрактами левзеи и стероидными противовоспалительными препаратами, в Национальном федеральном федеральном округе были испытаны комбинации с дексаметазоном в различных соотношениях (5: 1, 2: 1, 1: 1, 1: 2, 1: 5). — κ B.20E в низких концентрациях (5 и 10 мкм) не оказывал значительного влияния на эффект дексаметазона после стимуляции PMA. Более высокие концентрации 20E (25 мкм) усиливали ингибирующий эффект дексаметазона после стимуляции как PMA, так и TNF α (фиг. 5).
Рисунок 5
Влияние дексаметазона (DEX 5 мкм, 10 мкм, 25 мкм) на индуцированную PMA- (a) и TNF α — (b) активацию NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 отдельно и в сочетании с 20E (5, 10, 25 мкм).Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Указывает значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним дексаметазоном с использованием ANOVA с последующим тестом Бонферрони.
Рисунок 5
Влияние дексаметазона (DEX 5 мкм, 10 мкм, 25 мкм) на PMA- (a) и TNF α — (b), индуцированную активацию NF- κ B в HeLa-IL-6 только клетки и в сочетании с 20E (5, 10, 25 мкм). Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего.* Указывает значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним дексаметазоном с использованием ANOVA с последующим тестом Бонферрони.
Дексаметазон (20 мин предварительной инкубации, 20 мкм) в комбинации с активными экстрактами левзеи тестировали на той же клеточной модели (рис. 6). Одно только противовоспалительное лекарственное средство уменьшало PMA-индуцированную активацию NF- κ B дозозависимо, и этот эффект был добавлен к эффекту ингибирующих экстрактов, в то время как эффект активирующих экстрактов казался сниженным (например,грамм. водная фракция 60% этанольного экстракта листьев). Следовательно, вызываемое дексаметазоном ингибирование NF- κ B может быть усилено некоторыми экстрактами левзеи, тогда как другие эффективно нейтрализовали этот эффект.
Рисунок 6
Влияние одного дексаметазона (DEX 20 мкм), экстрактов Leuzea отдельно и комбинаций DEX / экстракт на индуцированное PMA ингибирование NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 (в процентах относительно контроля носителя). Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего.указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним дексаметазоном с использованием ANOVA с последующим тестом Бонферрони.
Рисунок 6
Влияние одного дексаметазона (DEX 20 мкм), одного экстракта левзеи и комбинаций DEX / экстракт на индуцированное PMA ингибирование NF- κ B в клетках HeLa-IL-6 (в процентах относительно контроля носителя) . Среднее трех определений в трех повторностях и стандартная ошибка среднего. * Обозначает значимость ( P <0.указывает на значимость ( P <0,05) комбинированного лечения по сравнению с одним дексаметазоном с использованием ANOVA с последующим тестом Бонферрони.
ВЭЖХ отпечаток пальца и содержание 20E в экстрактах левзеи
Обнаружение характерных классов соединений, описанных для Leuzea, было достигнуто путем сравнения УФ-спектров с чистыми эталонными стандартами хлорогеновой кислоты, кофейной кислоты, 20E, кверцетина и партенолида (рис. 7). Был выбран полуколичественный метод для сравнения процентов AUC суммарных пиков из этих групп (таблица 1 и рисунок 8).Экстракты корней (R-Me, R-Et60-etac) содержали преимущественно фенолкарбоновые кислоты, за которыми следовали соединения группы D и группы ECD (с 20E в качестве основного пика при t r 22 мин), но мало флавоноидов (рисунки 7 и 8 ). 20E в меньшей степени также был обнаружен в отпечатке R-Et60-wat. Однако во всех трех экстрактах корней 20E не был основным пиком даже при 256 нм, вблизи максимума поглощения соединения.
Рисунок 7
ПрофилиВЭЖХ при 256 нм (а) эталонных стандартов и (б) экстракта из корня левзеи (R-Me) и профили ВЭЖХ при 220 нм двух экстрактов из травы левзеи: (в) H-Et60- etac и (d) H-Me-дикло.Пики, отличные от 20E, классифицируются согласно УФ-спектрам (см. Таблицу 1).
Рисунок 7
Профили ВЭЖХ при 256 нм (а) эталонных стандартов и (б) экстракта из корня левзеи (R-Me) и профили ВЭЖХ при 220 нм двух экстрактов из травы левзеи: (в) H-Et60 -etac и (d) H-Me-дикло. Пики, отличные от 20E, классифицируются согласно УФ-спектрам (см. Таблицу 1).
Рисунок 8
Полуколичественный профиль экстрактов левзеи в соответствии с основными группами, идентифицированными по УФ / видимому спектрам 200–400 нм.Процент суммарной AUC для каждой группы соединений, обнаруженной при 220 нм (см. Таблицу 1).
Рис. 8
Полуколичественный профиль экстрактов левзеи по основным группам, идентифицированным по УФ / видимым спектрам 200–400 нм. Процент суммарной AUC для каждой группы соединений, обнаруженной при 220 нм (см. Таблицу 1).
Экстракт травы H-Me и фракции H-Me-etac и H-Et60-etac были богаты флавоноидами и соединениями группы A (Рисунки 7 и 8). Две другие фракции не содержали флавоноидов, но преимущественно составляли компоненты без хромофоров (группа B) с небольшими частями ECD и группы C (H-Me-гекс) или в основном присутствовали соединения типа B и C (H-Me-дикло).
Содержание 20E, а также общее количество производных кофейной кислоты, общее количество флавоноидов и общее количество экдистероидов, рассчитанное на основе внешних стандартов (хлорогеновая кислота, кверцетин, 20E, соответственно), показано в таблице 3. Только в экстрактах корней мы смогли детектировать 20E (R-Me 21 мг / г, R-Et60-etac 29 мг / г, R-Et60-wa 12 мг / г). Однако другие соединения со спектром, подобным 20E, также были обнаружены в экстрактах трав (максимум 83 мг / г в H-Et60-etac). Нельзя исключить пониженное присутствие 20E в экстрактах H-Me, H-Me-etac и H-Et60-etac, поскольку отпечаток пальца показал другие пики (флавоноиды и A), элюирующиеся совместно с этим соединением.Производные кофейной кислоты варьировались от 66 мг / г (R-Et60-wa) до 378 мг / г (R-Et60-etac) в экстрактах корней и от 2,5 мг / г (H-Me-diclo) до 62 мг / г. (H-Et60-etac) в экстрактах трав. Более высокие количества флавоноидов были обнаружены только в экстрактах трав, особенно они преобладали во фракциях этилацетата (H-Me-etac 289 мг / г, H-Et60-etac 416 мг / г).
Взаимосвязь между классами метаболитов и активностью NF-
κ B экстрактов левзеиВ совокупности профиль всех экстрактов корня, активирующих NF- κ B, показал преобладание CAF вместе с 20E и другими неидентифицированными экдистероидами.Они сопровождались основными пиками для компонентов D-типа или (водная фракция) A- и B-типов. Напротив, экстракты трав, ингибирующих NF- κ , содержали явно меньше CAF и ECD, но преобладали другие группы, такие как B в H-Me-дикло и FLA и A в H-Me и H-Et60. -etac (рис. 7c и 7d). Общая картина взаимосвязи между соединениями классов FLA, A или B и измеренным эффектом NF- κ B не может быть установлена из восьми проанализированных здесь экстрактов, поскольку NF- κ B-неактивные экстракты L-Me- В hex и L-Me-etac в равной степени преобладали компоненты B или FLA / C, соответственно.Не удалось найти простой, прямой корреляции между содержанием 20E, общим количеством экдистероидов, общим CAF или общим FLA и фармакологическими эффектами.
Обсуждение
Влияние чистого 20E на жизнеспособность клеток и активацию NF-
κ BЭкдистероиды, как сообщается, обладают низкой токсичностью, со значениями LD50 выше 10 мг / кг у мышей после перорального или внутрибрюшинного введения; фактически предполагается постоянное безвредное воздействие пищи на животных и человека. [5] Также результаты in vitro для 20E в четырех разных типах клеток, включая HeLa, показали низкую цитотоксичность с IC50 ≥ 50 мкг / мл. [30] Это согласуется с нашими результатами для клеток HeLa-IL-6, где цитотоксичность для 20E была немного выше, чем для дексаметазона.
Различные фармакологические эффекты экдистероидов и экдистероидсодержащих растений стимулировали предположения о возможном вмешательстве в стероидные метаболические пути млекопитающих. [1,5] Но экдистероиды, включая 20E, не должны взаимодействовать со стероидными рецепторами у млекопитающих и даже широко используются в коммерческих тестовых наборах in vitro для экспрессии индуцируемых экдистероидами трансгенов генов млекопитающих.В этих системах высококонцентрированные понастерон и муристерон А действуют как индукторы, в то время как другие экдистероиды оказались неактивными. [5] Однако иногда возникает вопрос, действительно ли экдистероиды не влияют на физиологию клеток млекопитающих. Oehme и др. . [31] , например, сообщил об ингибировании апоптоза, индуцированного Fas-лигандом и TNF-лигандом, муристероном А на уровне каспазы-8. В дополнение к этому противоречию следует отметить, что некоторые стероиды и нестероиды растительного происхождения, включая кукурбитацины, витанолиды, стильбеноиды или лигнаны, которые взаимодействуют со стероидными системами позвоночных, оказались лигандами эдистероидных рецепторов, т.е.е. аналоги насекомых рецепторов ядерных гормонов млекопитающих, входящие в суперсемейство регуляторов транскрипции. [32–34]
Наши данные, полученные в модели HeLa-IL-6, предполагают вызванное 20E ингибирование NF- κ B, сравнимое с ингибированием, индуцированным дексаметазоном или генистеином, которые, как известно, ингибируют этот ядерный фактор. in vivo и in vitro . Тем не менее, сравнение с партенолидом, витанолидами и ксантогумолом показывает, что 20E может не достичь эффективности более мощных ингибиторов NF- κ B растительного происхождения.
Признано, что аномальный домохозяйство NF- κ B в раковых клетках — один из механизмов, ответственных за предотвращение гибели клеток в токсичных условиях для нормальных клеток — дает ингибиторам NF- κ B возможность нацеливаться на раковые клетки за счет снижения повышенных исходных уровней, подавляя «нормальный» апоптотический ответ. [35] Наши результаты показывают определенное соответствие между мощным ингибированием NF- κ B (6 часов) и последующей гибелью клеток (24 часа) со сравнимыми значениями IC50 для всех веществ.Наряду с этим, связь между ингибированием NF- κ B стероидами, включая муристерон А и понастерон, и последующей индукцией апоптоза уже поддерживалась Донжерковичем и др. ., [23] при последующем измерении жизнеспособности клеток. моменты времени в ячейках WEHI-231.
Несмотря на ингибирующий эффект одного 20E в концентрациях от 7 до 50 мкм, остаются вопросы из-за отсутствия ожидаемого аддитивного или синергетического ингибирования при сочетании с партенолидом, дексаметазоном или экстрактами левзеи.Иногда для некоторых из этих комбинаций обнаруживались даже противоположные эффекты.
Противовоспалительные эффекты для 20E были описаны некоторыми авторами (согласно обзору Lafont и Dinan 2003), [5] , но есть также сообщения, которые не могут подтвердить такие эффекты in vivo . [7] Harmatha et al . [8] не смог обнаружить сниженную продукцию NO перитонеальными макрофагами при стимуляции ЛПС или интерфероном, даже после инкубации с 20E до 100 мкм.Наши эксперименты являются первым отчетом о 20E как модулятора активации NF- κ B и предполагают, что необходимы дальнейшие тесты in vitro и in vivo. Ингибирующий эффект наблюдался как после стимуляции PMA, так и TNF α , что может указывать на независимость от задействованного пути; либо классический канонический, либо альтернативный. [36]
Влияние экстрактов корня левзеи и трав на жизнеспособность клеток и активацию NF-
κ BТрадиционные препараты левзеи представляют собой гидроэтанольные экстракты корня, которые, как сообщается, содержат 0.04–0,81% от 20E. [11] С нашей метанольной (гидроэтанольной) мацерацией 20E был получен в концентрации 20 мг / г корня (35 мг / г корня), что находится в среднем диапазоне предыдущих отчетов. Общее содержание экдистероидов в экстрактах некоторых трав было сравнимо с таковым в экстрактах корней, что позволяет предположить, что экстракты, обогащенные экдистероидами, также могут быть получены (зарегистрированный диапазон 20E в листьях 0,03–1,22% [11] ). Надземные части могут быть экономической альтернативой корням, потому что многолетние растения допускают постоянное культивирование и повторный сбор урожая. [30]
Протестированные экстракты и фракции демонстрируют различные химические профили и частично противоположные фармакологические эффекты. Экстракты, полученные из трав, были либо эффективными ингибиторами NF- κ B, либо вообще не влияли на активацию NF- κ B. Экстракты корней вызывали умеренное дальнейшее увеличение PMA или TNF- α , индуцированной активацией NF- κ B. Этот эффект был наиболее выражен для экстракта с наибольшим содержанием 20E (29,6 мг / г; R-Et60-etac).При рассмотрении не только 20E, но и всех экдистероидоподобных соединений экстракты с самым высоким содержанием экдистероидов (83; 47; 35 мг / мл) ингибировали, активировали или не оказывали никакого эффекта.
Хотя CAF преобладает в экстрактах корней с NF- κ B сверхактивирующими эффектами, решающая роль является спорной, учитывая аналогичное общее содержание CAF в активирующем R-Et60-wa (66 мг / г) и ингибирующем H- Et60-etac (62 мг / г) экстракты. Точно так же концентрация флавоноидов, которые были более характерны для тестируемых здесь экстрактов трав, не коррелировала с влиянием на NF- κ B.Помимо необходимого различия отдельных компонентов в группах ECD, CAF и FLA, можно сделать вывод, что за измеряемую активность ответственны соединения, отличные от типичных веществ, рассматриваемых здесь для определения отпечатков пальцев. Левзея содержит интересное сочетание фармакологически активных классов, к которым можно отнести традиционно описанные и доказанные эффекты. Помимо экдистероидов 20E, макистерона C, полиподина B и аджугастерона C [37,38] и флавоноидов, [39,40] больше внимания можно уделить сесквитерпеновым лактонам, [28,29] тиофенполиацетиленам, [41,42] и стильбены, [43] , которые известны своими цитотоксическими и противовоспалительными свойствами в различных моделях, включающих модуляцию активности NF- κ B (см. Также обзор Кокоски и Яновской [11] ).Также уже предлагались N-ферулоилсеротонины. [8] Различная активность составляющих групп в отношении отдельных физиологических мишеней может вызвать непредсказуемые экспериментальные эффекты при испытании целых смесей с определенными пропорциями этих групп. С другой стороны, комбинация B-ингибирующего и активирующего принципов NF- κ в Leuzea может играть роль в его иммуномодулирующем и адаптогенном применении ввиду ранее предполагаемых биполярных умеренных эффектов, ответственных за формирование клеточного ответа на ослабленная стрессовая реакция. [44]
Вклад 20E в действие in vitro на активацию NF-
κ B экстрактов левзеиСомнения по поводу вклада 20E в противовоспалительные эффекты экстрактов левзеи были выражены Harmata et al. . (2008). [8] Хотя 20E сам по себе был ингибитором NF- κ B в нашей тестовой модели, аналогичные неопределенности возникают в отношении вклада 20E в ингибирование NF- κ B, вызванное экстрактами левзеи по трем причинам.Во-первых, химическая структура активирующих, ингибирующих и неактивных экстрактов: по отпечаткам пальцев наиболее сильными ингибиторами были экстракты с содержанием менее 0,5 мг 20E / г растительного материала или явно низким содержанием 20E по сравнению с другими составляющими. В экстрактах, содержащих больше активированного 20E NF- κ B, концентрация 20E в клеточной среде для диапазона активности экстрактов намного ниже, чем в тестах с одним 20E.
Вторая причина — это минимальное влияние добавления 20E на экстракты: во время наших экспериментов с добавлением мы увеличили естественное содержание 20E в тестируемых экстрактах (максимум 29 мг / г) путем добавления чистого 20E.Используя концентрацию экстракта на уровне примерно IC50 (максимум 100 мг / мл), естественное содержание 20E экстракта в среде максимум 1,3 нг / мл было искусственно увеличено с 2,28 мкг / мл до 11,4 мкг / мл чистого 20E. Однако активность экстракта существенно не изменилась по сравнению с одним экстрактом.
Последней причиной является минимальное воздействие при сочетании 20E с другими ингибиторами NF- κ B: добавление 20E к партенолиду (соотношение 1: 10–2: 1), кофейной кислоте (1: 2–10: 1) и хлорогеновая кислота (1: 1–10: 1) либо не оказывала существенного влияния на эффект, полученный при использовании одних только других соединений, либо даже увеличивала активность NF- κ B.Также комбинации с дексаметазоном (1: 10–5: 1) не показали значительного эффекта.
Таким образом, ни 20E, ни экдистероидоподобные соединения, по-видимому, не отвечают за модулирующие эффекты экстрактов левзеи NF- κ B. Хотя экстракты левзеи могут быть наделены интересным иммуномодулирующим потенциалом, 20E не объясняет модуляцию κ B NF-. В дополнение к его сомнительному вкладу в противовоспалительное действие, пригодность 20E в качестве аналитического маркера при использовании стандартных методов HPLC-UV ограничена.Несомненно, характерный компонент, указывающий на качество, трудности в обнаружении в УФ / видимом диапазоне по сравнению с более заметными соединениями и различение структурно очень похожих экдистероидов в прошлом приводили к определенному нежеланию обнаруживать 20E стандартными методами ВЭЖХ в смесях. [45]
Хотя 20E не всегда можно было обнаружить с помощью нашего метода отпечатков пальцев, мы показываем, что анализ ВЭЖХ может предоставить полезную информацию о составе экстракта для качественного контроля. Это может быть далее развито для стандартного количественного определения 20E и, что еще более важно, для других составляющих групп (сесквитерпенлактонов, стильбенов).Примечательно, что многие продукты Leuzea, предлагаемые для продажи в Интернете, не имеют спецификации используемой части растения или типа экстракта и декларируют только содержание 20E. Доказательства связи между концентрацией 20E и фармакологическим действием препаратов левзеи в основном отсутствуют. Наши результаты подтверждают предыдущие сомнения и предполагают, что необходимы более сложные стандарты качества для экстрактов левзеи.
Влияние дексаметазона в сочетании с экстрактами 20E или левзеи на NF-
κ BСпособность глюкокортикоидов подавлять иммунную функцию тесно связана со способностью глюкокортикоидного рецептора (GR) ингибировать транскрипционную активность NF- κ B.Это осуществляется посредством прямой физической ассоциации вместе с дополнительным механизмом антагонизма, включающим конкуренцию за общие механизмы транскрипционных кофакторов антагонизма NF- κ B-GR. [46] Точки пересечения этих двух физиологических медиаторов воспаления — популярная тема исследований. [47] Дексаметазон предотвращает активацию NF- κ B с помощью различных внеядерных и внутриядерных механизмов. Например, усиление синтеза I κ Ba, которое зависит от ранней и временной активации NF- κ B, связывание лиганда с C-концом глюкокортикоидных рецепторов, способствующее ядерной транслокации рецептора, а также связывание с NF- κ B через ДНК-связывающий домен глюкокортикоидного рецептора. [48–50] Эффект подавления NF- κ B дексаметазоном в клетках HeLa, обнаруженный в наших экспериментах, был описан ранее. [51] В отличие от других методов обнаружения модуляции NF- κ B выше по течению, люминометрическое обнаружение экспрессии IL-6 позволяет измерить общий, окончательный результат перекрестного взаимодействия глюкокортикоид-NF- κ B при транскрипционный уровень и не зависит от реальных задействованных вышестоящих механизмов.
Результаты после добавления 20E к клеткам, обработанным дексаметазоном, не были окончательными.Напротив, значительная модификация эффекта дексаметазона на активацию NF- κ B была обнаружена как для ингибирования, так и для активации экстрактов левзеи. Следовательно, наши результаты предполагают, что 20E не может существенно влиять на другие стероидные методы лечения с точки зрения опосредованной NF- κ B иммунореактивности на клеточном уровне, в то время как экстракты левзеи влияют. Если подтверждается in vivo , этот потенциал может открыть возможности для снижения концентраций стероидов, когда требуется ингибирование NF- κ B, как при некоторых противовоспалительных методах лечения или комбинированном лечении рака.С другой стороны, наши результаты требуют дальнейшего изучения широкого использования препаратов левзеи в анаболических целях, где можно ожидать комбинации с другими стероидами. Возможные противоположные эффекты, в зависимости от состава экстракта, требуют лучшей стандартизации и фармаконадзора.
Выводы
Таким образом, 20E впервые описан здесь как in vitro ингибитор активации NF- κ B, но это соединение вряд ли будет основным игроком в ингибирующих эффектах NF- κ B, проявляемых некоторые экстракты левзеи.Судя по нашим результатам, следует проявлять осторожность в отношении продаваемых экстрактов левзеи, которые не стандартизированы или стандартизированы только для 20E, поскольку естественные вариации химического состава исходного материала и его экстрактов могут вызывать различные эффекты. Что еще более важно, наши результаты указывают на потенциал взаимодействия левзеи со стероидными противовоспалительными препаратами. Это должно быть дополнительно изучено in vivo , чтобы исключить риски при использовании не по назначению. Однако это может также предоставить возможности, когда желательно снижение дозы стандартных стероидных препаратов.
Декларации
Конфликт интересов
Автор (ы) заявляют (ют), что у них нет конфликта интересов, который необходимо раскрывать.
Финансирование
Это исследование не получало специального гранта от какого-либо финансирующего агентства в государственном, коммерческом или некоммерческом секторах.
Сокращения
-
20E
-
AC150
активирующая концентрация 150%
-
CAF
Производные кофейной кислоты (квалифицировано в соответствии со спектром UV / VIS по отпечатку пальца HPLC)
-
ECD
ecdyster / VIS спектр)
-
FLA
флавоноидов (квалифицируется в соответствии с УФ / видимым спектром)
-
MNEC
максимальная не влияющая концентрация
Благодарности
Авторы благодарны профессору М.L. Lienhard Schmitz, Университет Гиссена, Германия, за любезно предоставленную линию клеток HeLa-IL-6 и полезные комментарии по их биохимии.
Список литературы
1
Холодова
УД
.Фитоэкдистероиды: биологические эффекты, применение в сельском хозяйстве и дополнительной медицине
.Укр Биохим Ж
2001
;73
:21
—29
,2
Курнуков
AG
,Сыров
VN
.[Противовоспалительные свойства экдистерона]
.Мед Ж Узбекистана
1988
;10
:27
—29
[на русском языке] .3
Сахибов
AD
et al.[Экспериментальный анализ иммунотропного действия фитоэкдистероидов]
.Докл Акад. Наук Узбекской ССР
1989
;8
:55
—57
[на русском языке] .4
Фомовская
GN
et al.[Иммуномодулирующее действие экдистероидов]
.Укр Биохим Ж
1992
;64
:56
—61
[на украинском языке] .5
Lafont
R
,Dinan
L
.Практическое применение экдистероидов у млекопитающих, включая человека: обновление
.J Insect Sci
2003
;3
:1
—30
.6
Тренин
DS
,Володин
В.В.
20-гидроксиэкдизон как модулятор лимфоцитов и нейтрофилов человека: оценка in vitro
.Arch Insect Biochem Physiol
1999
;41
:156
—161
,7
Танигучи
SF
et al.Влияние Pfaffia iresinoides на экспериментальный воспалительный процесс у крыс
.Phytother Res
1997
;11
:568
—571
.8
Harmatha
J
et al.Отсутствие влияния обычных фитоэкдистероидов на продукцию оксида азота иммуноактивированными макрофагами млекопитающих
.Стероиды
2008
;73
:466
—471
,9
Соколов
ПД
. (глав. красный)[Растительные Ресурсы СССР. Цветковые растения. Их Химический состав. Использование.]
Санкт-Петербург
:Семейство сложноцветных
,1993
[на русском языке].10
Оплетал
L
et al.[Фитотерапевтические аспекты болезней системы кровообращения 6. Leusea carthamoides (WILLD.) DC: современное состояние исследований и возможное использование таксона]
.Чешская словесная ферма
1997
;46
:247
—255
[на чешском языке] .11
Kokoska
L
,Janovska
D
.Химия и фармакология Rhaponticum carthamoides : обзор
.Фитохимия
2009
;70
:842
—855
.12
Slama
K
et al.Гормоны насекомых у позвоночных: анаболические эффекты 20-гидроксиэкдизона у японского перепела
.Experientia
1996
;52
:702
—706
,13
Гаджиева
RM
и др.[Сравнительное исследование анаболической активности веществ растительного происхождения: Экдистен, леветон и Прайм Плюс]
.Эксп Клин Фармакол
1995
;58
:46
—48
[на русском языке] .14
Гольдберг
ED
et al.Влияние экстрактов лекарственных растений на развитие метастатического процесса
.Булл Эксп Биол Мед
2004
;138
:288
—294
.15
Gaube
F
et al.Эффекты Leuzea carthamoides DC.на клетках аденокарциномы рака молочной железы человека MCF-7, обнаруженных с помощью профилирования экспрессии генов и функциональных анализов
.Planta Med
2008
;74
:1701
—1708
.16
Худзенко
OP
et al.[Лекарственные растения как потенциальные источники антигипоксических препаратов с термозащитными свойствами]
.Фарм Ж
1992
;0
:62
—64
[на украинском языке].17
Смоленова
Л
и др.[Клиническое исследование действия экстракта Leuzea carthamoides на пожилых людей]
.Фарм Обзор
1993
;62
:197
—202
. 18
Азизов
AP
,Сейфулла
RD
.[Влияние элтона, леветона, фитотона и адаптона на работоспособность экспериментальных животных]
.Эксп Клин Фармакол
1998
;61
:61
—63
[на русском языке].19
Азизов
AP
et al.Влияние настойки левзеи и леветона на гуморальный иммунитет спортсменов]
.Эксп Клин Фармакол
1997
;60
:47
—48
[на русском языке] .20
Кормош
N
и др.Влияние комбинации экстрактов из нескольких растений на клеточный и гуморальный иммунитет пациентов с распространенным раком яичников
.Phytother Res
2006
;20
:424
—425
.21
Володин
В.В.
и др.[Биологическая активность 20-гидроксиэкдизона и его ацетатов]
.Растительные ресурсы
1999
;2
:76
—81
[на русском языке] .22
Li
Q
,Verma
IM
.Регуляция NF-kappaB в иммунной системе
.Nat Rev Immunol
2002
;2
:725
—734
.23
Donjerković
D
et al.Опосредованная стероидами и ретиноидами остановка роста и апоптоз в клетках WEHI-231: роль NF- κ B, c-Myc и CKI p27kip1
.евро J Immunol
2000
;30
:1154
—1161
.24
Sun
Y
,Yasukawa
K
.Новые противовоспалительные экдистероиды эргостанового типа из склероция Polyporus umbellatus
.Bioorg Med Chem Lett
2008
;18
:3417
—3420
.25
Либерман
TA
,Балтимор
D
.Активация экспрессии гена мтерлейкина-6 посредством фактора транскрипции NF-KB
.Mol Cell Biol
1990
;10
:2317
—2334
.26
Plaisance
S
et al.Белок, связывающий сигнальную последовательность рекомбинации, Jkappa конститутивно связан с сайтом NF-kappaB промотора интерлейкина-6 и действует как негативный регуляторный фактор
.Mol Cell Biol
1997
;17
:3733
—3743
,27
Мосманн
T
.Быстрый колориметрический анализ клеточного роста и выживаемости: применение для анализа пролиферации и цитотоксичности
.J Immunol Methods
1983
;65
:55
—63
,28
Nowak
G
et al.[Сесквитерпеновые лактоны ххх. Цинаропикрин у видов подтрибы centaureinae]
.Acta Soc Bot Pol
1986
;55
:17
—22
[на польском языке] 29
Nowak
G
et al.[Сесквитерпеновые лактоны xxxiv. Guaianolides в роду Leuzea D.C]
.Acta Soc Bot Pol
1988
;57
:157
—164
[на польском языке] 30
Biskup
E
,Lojkowska
E
.Оценка биологической активности экстрактов Rhaponticum carthamoides
.J Med Plants Res
2009
;3
:1092
—1098
.31
Oehme
I
et al.Агонисты экдизон-индуцируемой системы экспрессии млекопитающих ингибируют апоптоз, индуцированный Fas-лигандом и TRAIL, в клеточной линии карциномы толстой кишки человека RKO
.Разница в гибели клеток
2006
;13
:189
—201
.32
Динан
L
et al.Кукурбитацины — антагонисты стероидных гормонов насекомых, действующие на рецептор экдистероидов
.Biochem J
1997
;27
:643
—650
.33
Динан
L
et al.Растительные натуральные продукты как агонисты и антагонисты стероидных рецепторов насекомых
.Наука о пестицидах
1999
;55
:331
—335
.34
Harmatha
J
,Dinan
L
.Биологическая активность лигнанов и стильбеноидов, связанная с химическими взаимодействиями насекомых и растений
.Phytochem Rev
2003
;2
:321
—330
0,35
Takahashi
N
et al.Ингибирование апоптоза, опосредованного 53BP2S, ядерным фактором κ B и белками семейства Bcl-2
.Genes Cells
2005
;10
:803
—811
,36
Niederberger
E
,Geisslinger
G
.Путь IKK-NF- κ B: источник новых молекулярных мишеней лекарств в терапии боли?
FASEB J
2008
;22
:3432
—3442
.37
Girault
JP
et al.Экдистероиды leuzea-carthamoides
.Фитохимия
1988
;27
:737
—742
.38
Pis
J
et al.Экдистероиды из корней Leuzea carthamoides
.Фитохимия
1994
;37
:707
—711
.39
Варга
E
et al.Флавоноиды из Leuzea carthamoides DC
.Herba Hungarica
1990
;29
:51
—55
.40
Sharaf
M
et al.Два флавонольных 5-O-гликозида из корней Leuzea carthamoides
.Фитотерапия
2001
;72
:940
—942
.41
Szendrei
K
et al.Ацетилены тиофена из корней левзеи
.Фитохимия
1984
;23
:901
—902
.42
Chobot
V
et al.Фототоксическая активность тиофенполиацетилена из Leuzea carthamoides
.Фитотерапия
2006
;77
:194
—198
.43
Хайду
Z
et al.Стильбен из корней Leuzea carthamoides
.J Nat Prod
1998
;61
:1298
–1299
.44
Паносян
A
et al.Адаптогены растений III. Более ранние и более свежие концепции и аспекты их действия
.Фитомедицина
1999
;6
:287
—300
.45
Динан
L
et al.Хроматографические процедуры выделения стероидов растений
.J Chromatogr A
2001
;935
:105
—123
.46
McKay
LI
,Cidlowski
JA
.Перекрестная связь между ядерным фактором каппа B и рецепторами стероидных гормонов: механизмы взаимного антагонизма
.Мол эндокринол
1998
;12
:45
—56
.47
McKay
LI
,Cidlowski
JA
.Молекулярный контроль иммунных / воспалительных реакций: взаимодействия между ядерным фактором каппа B и путями передачи сигналов стероидных рецепторов
.Endocr Ред.
1999
;20
:435
—459
.48
Scheinman
RI
et al.Характеристика механизмов, участвующих в трансрепрессии NF-каппа B активированными глюкокортикоидными рецепторами
.Mol Cell Biol
1995
;15
:943
—953
.49
Кастро-Кальдас
M
et al.Дексаметазон предотвращает индуцированную интерлейкином-1b активацию ядерного фактора-kB, регулируя синтез IkB-a в лимфобластных клетках
.Медиаторы воспаления
2003
;12
:37
—46
.50
Гарсайд
H
et al.Глюкокортикоидные лиганды определяют различные взаимодействия с NF- κ B за счет аллостерических эффектов на ДНК-связывающий домен глюкокортикоидного рецептора
.J Biol Chem
2004
;279
:50050
—50059
.51
Дворжак
Z
et al.Дифференциальное действие выбранных природных соединений с противовоспалительной активностью на рецептор глюкокортикоидов и NF-kappaB в клетках HeLa
.Chem Biol Interact
2006
;159
:117
—128
.© 2011 Авторы. JPP © 2011 Королевское фармацевтическое общество
Эта статья публикуется и распространяется в соответствии с условиями модели публикации стандартных журналов Oxford University Press (https://academic.oup.com/journals/pages/open_access/funder_policies/chorus/standard_publication_model)
Leuzea Max — Жидкий экстракт
Leuzea Max
100 мл
• • • ПИЩЕВАЯ ДОБАВКА • • •
Что такое Leuzea Max?
Левзея — растение, обладающее целебными свойствами различной природы.Он находит применение как в традиционной медицине, так и в современной медицине. Экстракт Leuzea Max — натуральный адаптоген.
Помогает организму справляться с физическими и умственными нагрузками. Его также можно использовать в качестве усилителя энергии каждый день. Российские спортсмены разделяют мнение, что каждый, кто попробовал экстракт Leuzea Max , готов полностью отказаться от анаболических стероидов.
На основании этого мы получили высококонцентрированный экстракт следующего уровня, а именно — Leuzea Max .Экдистерон, содержащийся в Leuzea , аналогичен по действию некоторым анаболическим стероидам.
Преимущества Leuzea Max
- Улучшает переработку и усвоение питательных веществ и, в основном, белков. Подходит для приема в составе диет с высоким содержанием белка.
- Хорошо усваиваемые белки и важные аминокислоты облегчают их попадание в кровоток. Это способствует более быстрому восстановлению после напряженных тренировок.
- Стимулирует рост мышц за счет сжигания жира.
- Естественным образом определяет мышцы.
- Как природный афродизиак, Leuzea Max повышает сексуальную активность, либидо и потенцию.
- Улучшает работу мозга, повышая концентрацию внимания и обостряя рефлексы.
- Как уникальный адаптоген рекомендуется при всех видах стресса.
- Значительно увеличивает физическую выносливость.
Leuzea Max — это активизирующий инструмент, который приносит пользу не только активным людям.Экстракт дает силу любому и легко адаптируется к изменениям окружающей среды, поскольку он приносит пользу иммунной системе и делает ее устойчивой к внешним воздействиям.
Что еще дает Leuzea Max Benefit
- Улучшает настроение и повышает аппетит.
- Помогает при усталости и депрессии, раздражительности и головных болях.
- Имеет общий освежающий эффект.
- Помогает сконцентрироваться и запоминать, что делает его подходящим для всех, кто подвергается психическому стрессу.
- Улучшает работу печени, сердца и мозга.
- Улучшает кровообращение, нормализует содержание гемоглобина в крови, регулирует артериальное давление.
- Обладает болеутоляющим действием на организм независимо от источника боли. Ускоряет заживление ран и переломов.
- Способствует более эффективному и быстрому восстановлению после болезни.
- Обладает сильным дезинтоксикационным действием при пищевых и алкогольных отравлениях.
- У женщин доказано положительное влияние левзеи на репродуктивную способность.
Всасывание левзеи Макс
| Пищевая ценность | |
| Размер порции: | 3 мл |
| Порций в упаковке: | 33 |
| Рекомендуемая суточная доза: | Leuzea Max принимать один раз в день по 3 мл утром; или ранним днем. Для активных спортсменов : Принимать по 3 мл два раза в день во время еды. Если вы соблюдаете диету с высоким содержанием белка : Принимайте 3 мл два раза в день за час до еды. |
| Рекомендуемый период приема: | Для достижения наилучших результатов этот продукт следует принимать 3 месяца (12 недель) подряд. Цикл можно повторить после двухнедельного перерыва. |
| Состав: | Экстракт корня левзеи, вода, этанол. Действующее вещество: 20% |
| Хранение: | Хранить в сухом, прохладном и защищенном от прямых солнечных лучей месте.Храните в недоступном для детей месте! |
| ВНИМАНИЕ: |
|
Без консервантов, красителей и подсластителей!
Экдистерон (Leuzeae carthamoides) — многовековая история
Несколько веков назад в отдаленных и труднодоступных горных районах Южной Сибири первобытные знахари обнаружили корень, увеличивающий продолжительность жизни и энергию, и назвали его «Корнем марала». разновидность местного оленя, марал, выкапывала и ела эти корни во время брачного сезона, когда самцы боролись между собой за самок, чтобы восстановить израсходованную энергию.
Лекари применяли корни от истощения, чтобы противодействовать слабости и восстановить сексуальные функции. Однако лишь немногие люди знали места, где росло растение, и эти знания передавались от одного поколения к другому. В 1942 году, во время Второй мировой войны, России потребовались лекарства для заживления ран, а также для восстановления энергии, потерянной солдатами, поэтому они совершили научные экспедиции в Сибирь, где ходили слухи о существовании растений с лечебным потенциалом.
В результате этих экспедиций был обнаружен корень марала (Leuzea Carthamoides, также называемый Rhaponticum Carthamoides) в горных лесах и равнинах, на ограниченной территории отдаленных районов Алтая, Кузнецкого Алатау и Саян. Они представили подробное ботаническое описание растения и отправили первые связки корней левзеи в различные исследовательские центры Советского Союза для научного изучения. После обширных секретных исследований советские вооруженные силы включили экстракты левзеи в свой набор лекарств для боевых действий, чтобы помочь солдатам в боевом стрессе.После войны исследования продолжились, и в 1965 году был выделен главный активный компонент растения — экдистерон.
Экстракт левзеи стал любимцем кремлевских политиков и использовался в советских космических программах.
Из-за военного применения этих исследований большинство их результатов считались военной тайной и не публиковались в научных статьях. Спустя несколько лет отобранная группа врачей и биохимиков Антидопингового центра Олимпийского комитета России обнаружила, что левзея карфамоидная значительно увеличивает синтез белка.
После падения Берлинской стены в 1989 году и открытия советской медицины остальному миру знание свойств этого растения стало международной научной собственностью. В 1995 году после многочисленных испытаний с участием российских спортсменов экстракт левзеи стал официальным адаптогеном советской олимпийской сборной. Позже он был коммерциализирован, и в настоящее время нелегко найти продукт на основе экдистерона, который действительно работает.
Итак, имея такую долгую историю, актуальным сегодня для бесспорного эффекта является высокий контроль качества.
В VemoHerb мы отслеживаем:
— растительное происхождение;
— экстракционный метод;
— концентрация экдистерона в экстракте лекарственных растений;
— лабораторные испытания готового продукта.
Мои наблюдения за комментариями бодибилдеров и партнеров VemoHerb, которые делятся со мной своим сравнением с различными продуктами Ecdysterone, показывают, что VemoHerb® Ecdysterone — один из лучших вариантов, представленных в настоящее время на рынке.
Лорита Илиева
Химия и фармакология Rhaponticum carthamoides: обзор
Реферат
Rhaponticum carthamoides (Willd.Ильин — это многолетнее растение, широко известное как корень марала или русская левзея, которое веками использовалось в восточных частях России из-за его выраженных лечебных свойств. В этом обзоре, основанном на 117 литературных источниках, многие из которых изначально были опубликованы не на английском языке (в основном на русском), обсуждаются современные знания о традиционном использовании, химии, биологических эффектах и токсичности этого вида. Ранее из различных частей R.carthamoides, основными группами которых являются стероиды, особенно экдистероиды, и фенольные соединения (флавоноиды и фенольные кислоты) в сочетании с полиацетиленами, сесквитерпеновыми лактонами, тритерпеноидными гликозидами и терпенами (эфирное масло). В этом обзоре дается исчерпывающий отчет о химических составляющих (показаны фигуры 120 структур). Было обнаружено, что различные типы препаратов, экстрактов и индивидуальных соединений, полученных из этого вида, обладают широким спектром фармакологического воздействия на несколько органов, таких как мозг, кровь, сердечно-сосудистую и нервную системы, а также на различные биохимические процессы и физиологические функции, включая протеосинтез. , рабочая шапка…Продолжить чтение
Цитирование
31 июля 2013 г. · Журнал хроматографии. a · IM Abu-ReidahA Fernández-Gutiérrez
21 августа 2013 г. · Фитохимия · Maurizio BrunoAntonella Maggio
3 мая 2011 г. · Химический и фармацевтический бюллетень · Wei-Hua HuangShao-Ping Li
января 2014 г. Альтернативная медицина · Михаил Душкин · Евгений Верещагин
15 сентября 2010 · Исследования свободных радикалов · Агнешка Августиняк Невен Заркович
2 апреля 2016 · Окислительная медицина и клеточное долголетие · Ewa SkałaTomasz Śliwiński International · H
11 июня 2014 г. · Международный журнал радиационной биологии · Владимир Г БеспаловСергей Д. Иванов
4 февраля 2014 г. · Исследования природных продуктов · Анна Соймварь Имре Болдисар
5 апреля 2017 г. · Фитотерапия · Jiming WuRuichao Lin 150003
· Молекулярная и клеточная биохимия · Ева СкалаПшемыслав Ситарек
12 октября 2018 г. · Журнал науки о разделении · Иоанна ГлазовскаМариан Камински
7 марта, 2018 · BMC Дополнительная и альтернативная медицина · Habib MosbahBoulbaba Selmi
13 апреля 2012 г. · Фитотерапевтические исследования: PTR · Diana M ChengMary Ann Lila
18 марта 2020 г. · Фитохимический анализ: PCA · Laurence DinanRené Lafont
30 июля 2020 г. · Журнал диетических добавок · Эрик Д. Райан, Эбби Э. Смит-Райан,
, 9 мая 2015 г. · Фитохимический анализ: PCA · Луи Гибу, Рене Лафон,
,13 октября 2011 г. · Журнал фармации и фармакологии · Виланд Пешель, Хосе Мария Прието,
,28 февраля, 2013 · Репродуктивная медицина и биология · Мушуми ДасХирендра Н Сарма
12 января 2017 · Окислительная медицина и клеточное долголетие · Ева СкалаТомаш Сливиньски
28 июля 2016 · Всесторонние обзоры в области пищевой науки и безопасности пищевых продуктов · Бриттани Ласкин 9 января 2000 г. 10, 2019 · Окислительная медицина и клеточное долголетие · Ewa SkałaPrzemysław Sitarek
21 октября, 2016 · Журнал фармации и фармакологии · Ewa SkałaTomasz liwiński
2 сен. , 2018 · Цитотехнологии · Ewa SkałaPrzemysław Sitarek
27 октября 2020 г. · Обзоры медицинских исследований · Alexander G PanossianHildebert Wagner
21 октября 2020 г. 18, 2020 · Журнал Международного общества спортивного питания · Реми Руманиль Паскаль Фанса-Бертон
6 мая 2021 года · Биомедицина · Лоуренс Динан Рене Лафон
11 июля 2018 года · Журнал медицинской химии · Sonali S BharateRam A Vishwakarma
28, 2021 · Питательные вещества · Велислава ТодороваСтанислава Иванова
Лейзея лекарственная (жидкий экстракт): особенности применения
Впервые левзею начали высаживать в 1816 году в Лондонском саду.Как позже выяснилось, это травянистое альпийское растение не только имеет привлекательный внешний вид, но и обладает лечебными свойствами. Встречается в автономном округе Алтайского края, в Восточном Саяне и Южной Сибири. На высоте 2000 м растет мараловая трава, которую еще называют левзея.
Лечебные качества
В медицине используются корни, лекарственное сырье которых — чаще всего настойки, экстракты и отвары. В корневищах содержатся флавоноиды, дубильные вещества, каротин, аскорбиновая кислота, инулин, камеди, эфирное масло.Благодаря такому богатому химическому составу левзея (жидкий экстракт) может излечить человека от различных недугов, а также приумножить силы организма.
Недаром народные целители называют это растение природным адаптогеном, так как оно обладает тонизирующим, общеукрепляющим и стимулирующим действием. Рекомендован левзей (жидкий экстракт) людям, деятельность которых связана с тяжелыми физическими нагрузками. Лекарство повышает иммунитет, улучшает самочувствие, снимает усталость и стимулирует умственную работу.
Применяется при гипотонии, переутомлении, нервной возбудимости, астении и депрессии.Подготовленное сырье способствует быстрой акклиматизации перед экзаменами. Обладает сосудорасширяющими свойствами, а также нормализует кровообращение и обменные процессы. Кроме того, левзея (жидкий экстракт) помогает снизить уровень сахара в крови, поэтому рекомендуется при сахарном диабете.
С помощью этого дара природы целители борются с бессонницей, алкогольной зависимостью, чрезмерной раздражительностью и даже импотенцией. Клинические исследования доказали, что он улучшает память и концентрацию левзеи (жидкий экстракт).Цена на препарат невысокая, она колеблется в пределах 65 рублей за флакон 50 мл.
Заявление
Препарат не является лекарственным средством. Может применяться совместно с медикаментозной терапией. Назначен при:
— истощение, слабость, астения;
— физическое и умственное перенапряжение;
— стресс, депрессия;
— Реабилитация после перенесенных заболеваний;
— хронический алкоголизм;
— снижение потенции.
После 20-дневного курса нормализуется аппетит, сон, настроение.Экстракт применяют по 30 капель во время еды (трижды в день).
Кто против Левзеи?
Жидкий экстракт нельзя принимать детям, не достигшим возраста 12 лет. Препарат не рекомендуется применять при эпилепсии, аритмии, стенокардии, атеросклерозе, артериальной гипертензии, гиперчувствительности к компонентам. Воздерживаться от него необходимо беременным и кормящим женщинам. В любом случае перед применением лейзеи следует проконсультироваться с врачом.
Жидкий экстракт: отзывы потребителей
Множество положительных характеристик дает этот препарат.Восторженно отзываются об этом спортсмены и бодибилдеры. По их словам, добавка придает силы, бодрости и энергии. После его применения снимается утомляемость и раздражительность. Многие советуют использовать это средство в межсезонье, после длительного лечения и в стрессовых ситуациях.
Лечебный левзея (жидкий экстракт): большое количество применений
С тех пор, как Leuzeum был открыт в 1816 году в Лондоне. Тулад накабуки на любой язык, мало-дама в альпийском халамане на хинди просто с потрясающим акит на хитсуру, кунди-пати, который дает накапливание на катанги.Это автономный район Алтая, Восточный Саян и Южная Сибирь. Lumalaki ang maralal na damo, kaya tinawag din itong Leuzea, sa taas na 2000 m.
Терапевтические качества
Самостоятельно, угадать, использовать, от того, что нужно, чтобы приготовить лекарство, приготовленное из настойки, экстракта в отваре. Корневище содержит флавоноиды, дубильные вещества, каротин, аскорбиновую кислоту, инулин, смолы, эфирное масло.Дахил в том, что он кемикал на композицию, левзеи (лидирующие катас) может быть использован в различных карамдамах, и думает, что использует катаван.
Это хинди для многих целителей, которые используют естественный адаптоген, а также тонизирующий, восстанавливающий и стимулирующий эффект. Этот рекурсивный лейзей (экстракт ликидо) в некоторых актибидах уже давно научился писать. Это делает нас более интересными для сакит, нагпапабути в кагалингах, нагpапага на pagkapagod и nagpapalakas ng gawing pangkaisipan.
Ginagamit ito para sa гипотония, переутомление, нервная возбудимость, астения при депрессии. Первоначальные материалы обеспечивают быструю акклиматизацию в процессе обучения. Может оказывать сосудорасширяющее действие, нормализует кровообращение и метаболизм. Этот карагдаган, левзея (экстракт ликидо) очень полезен и эффективен для лечения сахарного диабета.
Этот калейдоскоп, целитель на хинди изучает, работает с алкоголем, лабиринт и удивляет.Клиническая клиника полезна для памяти и концентрируется на левзее (экстракт ликидо). Эта услуга может быть увеличена до 65 рублей за 50 мл ML.
Application
Играть на хинди — это просто. Вы можете использовать лекарственную терапию. Itinalaga kapag:
— пагкахапо, кахинаан, астения;
— писикал при психическом перенапряжении;
— стресс, депрессия;
— Публикация сакит на инициативах;
— таламак на алкоголь;
— Набавасан анг лакас.
Курсы за 20 дней, страницы, страницы и календари нормализованы. Экстракт используется для 30 дней в неделю (все время каждый день).
Китайское письмо на Leuzea?
Игра на хинди лучше всего для детей 12 лет. Здесь есть рекомендации по эпилепсии, аритмии, стенокардии, атеросклерозу, артериальной гипертензии, гиперчувствительности и другим. Он был специально разработан для детей и кормящих матерей.